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1 LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA CLÍNICA QUANTIFICAÇÃO BACTERIANA ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br QUANTIFICAÇÃO BACTERIANA As quantificações de bactérias podem ser agrupadas em dois métodos: o direto e o indireto. Os métodos diretos são definidos como aqueles em que a quantificação é realizada diretamente no microrganismo. Podemos citar a contagem em placas (superfície, profundidade e microgota) e a contagem em câmara de Neubauer. Nos métodos indiretos, podemos citar a contagem em microtúbulos, métodos espectrométricos e métodos baseados na quantificação de ATP e RNA mensageiro, ou seja, a contagem não é feita diretamente do microrganismo formado, mas de seus constituintes (MÉTODOS DE CONTAGEM MICROBIANA, 2016). Dos diversos métodos para realizar a contagem de bactérias, o mais comum é a contagem de colônias em placas de Petri, no qual se verifica significativa variação das condições utilizadas: basicamente o meio de cultura, a diluição do inóculo, a temperatura e o tempo de incubação (VIEIRA; NAHAS, 2000). A inoculação consiste na adição de uma parte da amostra ao meio, quando o meio é líquido; no caso do meio sólido, a inoculação será feita por meio de uma alça de inoculação estéril (chamada de alça de Drigalski) para a aplicação de uma parte da amostra à superfície do meio. Esse processo é conhecido como semeadura em estrias (KENNEDY; GEWIN, 1997). É necessário ressaltar que, antes da realização de todo procedimento de inoculação ou semeadura, deve ser realizada a assepsia do local e da alça de inoculação; é necessário acender a chama do bico de Bunsen para criar a zona de segurança para se poder trabalhar na experiência (KENNEDY; GEWIN, 1997). À primeira vista, quando pensamos em microrganismos, algumas pessoas, principalmente aquelas que não estão na área de ciências, pensam logo naqueles que são patogênicos, o que é considerável, já que, muitas vezes, só nos damos conta da existência desses seres vivos quando somos acometidos por alguma doença. mailto:contato@algetec.com.br 2 LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA CLÍNICA QUANTIFICAÇÃO BACTERIANA ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br Contudo, grande parte dos microrganismos apresenta grandes benefícios para a sociedade. Podemos citar, por exemplo, os microrganismos do solo, que estão no processo da compostagem, cuja quantificação é de extrema importância para a manutenção da qualidade do solo. A compostagem gera como produto o composto orgânico, que é utilizado como forma de reaproveitar a matéria orgânica presente em resíduos sólidos que descartamos em nossos lares. Os agentes microbianos que são responsáveis pelo processo de decomposição da matéria orgânica ocorrem por meio de fermentação controlada em condições aeróbicas ou anaeróbicas, nas chamadas unidades ou usinas de compostagem. O composto orgânico (húmus) obtido contém macro e micronutrientes essenciais às plantas e, quando utilizado em solos, ajuda a melhorar suas propriedades físico- químicas, favorecendo a produtividade vegetal, sendo indicado para aplicações e usos em horticultura, fruticultura, produção de grãos, reflorestamento, controle de erosão, entre outros (PEREIRA NETO, 1996). Pode-se observar que as diferentes condições de cultivo empregadas para quantificar o número de bactérias do solo devem-se ao fato de haver diversidade microbiana, sendo praticamente impossível a quantificação de todos os microrganismos em uma única situação de cultivo. Isso ocorre por causa das diferentes necessidades nutricionais requeridas pelos diferentes microrganismos, não sendo viável que todos os microrganismos de dada amostra cresçam em apenas um método de técnica (KENNEDY; GEWIN, 1997). mailto:contato@algetec.com.br 3 LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA CLÍNICA QUANTIFICAÇÃO BACTERIANA ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ALMEIDA, I. R. et al. Sensibilidade da PCR de amplificação de DNA bovino diluído. Estudos, Goiânia, v. 41, p. 55-61, 2014. Disponível em: https://www.researchgate.net/figure/Figura-1-Representacao-da-diluicao-seriada- utilizado-no-estudo-Nota-Adaptado-de-da_fig1_313824050. Acesso em: 24 set. 2020. DIAS, D. L. Diluição de soluções. Manual da Química. Disponível em: https://www.manualdaquimica.com/fisico-quimica/diluicao-solucoes.htm. Acesso em: 24 set. 2020. DINIZ, C. G. Roteiro de aulas práticas. Departamento de Parasitologia, Microbiologia e Imunologia – Setor de Microbiologia – Universidade Federal de Juiz de Fora, 2018. Disponível em: https://www.ufjf.br/microbiologia/files/2013/05/ROTEIRO-PARA- AULAS-PR%c3%81TICAS-bacteriologia-2018-vers%c3%a3o-02-2018.pdf. Acesso em: 24 set. 2020. KENNEDY, A. C.; GEWIN, V. L. Soil microbial diversity: present and future considerations. Soil Science, v. 162, p. 607-617, 1997. MÉTODOS DE CONTAGEM MICROBIANA. Valença, 2016, 28p. Disponível em: http://ww1.microbiologia-de-alimentos.com. Acesso em: 16 set 2020. PEREIRA NETO, J. T. Manual de compostagem. Belo Horizonte: Unicef, 1996. QUAL A FINALIDADE dos meios de cultura em microbiologia? Kasvi, 23 mar. 2018. Disponível em: https://kasvi.com.br/qual-a-finalidade-de-meios-de-cultura-em- microbiologia/. 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C. S.; NAHAS, Ely. Quantificação de bactérias totais e esporuladas no solo. Scientia Agricola, São Paulo, Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, v. 57, n. 3, p. 539-545, 2000. ZONTA, A. et al. Contagem automática de unidades formadoras de colônias em amostras de contra filé com o uso do software Opencv. Brazilian Journal of Biosystems Engineering, v. 12, n. 2, p. 197-211, 2018. Disponível em: https://pdfs.semanticscholar.org/c139/78855df5c14ab34ffcebbc7c81d50ae13c3d.pdf. Acesso em: 24 set. 2020. mailto:contato@algetec.com.br https://pdfs.semanticscholar.org/c139/78855df5c14ab34ffcebbc7c81d50ae13c3d.pdf