Microbiologia Clínica - Métodos de Esterilização - Desinfecção e Assepsia

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Métodos de Esterilização – Desinfecção e Assepsia – Aspectos Teóricos
ANÁLISES CLÍNICAS
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MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO –
DESINFECÇÃO E ASSEPSIA – ASPECTOS TEÓRICOS
CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO
Os microrganismos e seus efeitos podem ser controlados em muitos casos simplesmente 
pela limitação ou inibição do crescimento das células (métodos físicos e métodos químicos).
• Esterilização: remoção ou destruição de todos os microrganismos vivos (incluindo 
vírus e esporos bacterianos). Esterilizantes.
• Descontaminação: tratamento de um objeto ou uma superfície inanimada, de modo a 
torná-los seguros à manipulação. Sanitizantes. 
• Desinfecção: redução do número de bactérias, tornando a superfície inanimada livre 
de patógenos na forma vegetativa (não formadores de endósporos). Substância que 
faz a desinfecção é o desinfetante.
• Assepsia: desinfecção de tecidos vivos, garantindo a ausência de contaminação sig-
nificativa. Produtos antissépticos.
 – Sufixo -cida: morte direta.
 – Sufixo -stático: inibição do crescimento.
 
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MÉTODOS FÍSICOS DE CONTROLE MICROBIANO
Os agentes físicos atuam pela transmissão de energia na forma de calor ou radiação, ou 
pela remoção dos organismos por filtração.
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1. Calor
Energia térmica pode ser aplicada de três maneiras, na forma de:
• calor úmido (por fervura ou autoclavação);
• calor seco; ou
• pasteurização. 
Esterilização por calor úmido: destrói os microrganismos por meio da coagulação das 
proteínas (desnaturação), causada pela quebra das ligações de hidrogênio que mantêm as 
proteínas em sua estrutura tridimensional. Ex.: fervura (100ºC, não elimina esporos) e Auto-
clavação 121ºC por 15 min.
Não é a pressão no interior da autoclave que mata os microrganismos, mas sim as altas 
temperaturas atingidas quando o vapor em contato direto é aplicado sob alta pressão.
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Pasteurização: aplicação de aquecimento controlado, em temperaturas inferiores ao 
ponto de ebulição, a materiais termos sensíveis como o leite para redução da carga micro-
biana (Louis Pasteur).
Não mata todos os organismos: não é sinônimo de esterilização. 
62ºC por 30 minutos , seguido por resfriamento rápido. A pasteurização rápida a 72ºC 
por 15 segundos é frequentemente utilizada.
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Esterilização por calor seco: destrói os microrganismos por efeitos de oxidação. Ex.: 
chama direta ou ar quente (forno em temperaturas na faixa de 170–180ºC, por 2 horas).
2. Radiação
Os dois tipos de radiação usados para matar microrganismos presentes em materiais 
termos sensíveis, ao causarem danos ao DNA, são a luz ultravioleta (UV) e os raios X.
• Luz UV: Radiação não ionizante, de baixa penetração. Maior atividade antimicrobiana 
entre 250 a 260 nm. 
• Raios X: radiação ionizante, de maior energia e poder de penetração que a radiação 
UV, e causam a morte sobretudo pela produção de radicais livres.
3. Filtração
Passagem do material por meio de um filtro, um dispositivo contendo poros de dimen-
sões muito pequenas que impedem a passagem de quaisquer células que possam estar 
presentes.
Método preferencial de esterilização de soluções que contêm componentes termos 
sensíveis.
Filtro de nitrocelulose com poros de 0,22 µm (reter todas as bactérias e esporos). 
Filtros de ar particulado de alta eficiência (HEPA, de high-efficiency particulate air filters).
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preparada e ministrada pela professora Debora Martins Coelho Juliani. 
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Métodos de Esterilização – Desinfecção e Assepsia – Aspectos Teóricos II
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MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO – DESINFECÇÃO E ASSEPSIA – 
ASPECTOS TEÓRICOS II
MÉTODOS FÍSICOS DE CONTROLE MICROBIANO
Obs.: � fervura não esteriliza.
 
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Métodos de Esterilização – Desinfecção e Assepsia – Aspectos Teóricos II
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MÉTODOS QUÍMICOS DE CONTROLE MICROBIANO
Os agentes químicos visam controlar o crescimento de microrganismos em tecidos 
vivos e objetos inanimados.
Poucos agentes químicos proporcionam a esterilidade; a maioria deles meramente reduz 
as populações microbianas níveis seguros ou removem as formas vegetativas de patógenos 
em objetos (desinfecção / assepsia).
Mecanismos:
• Ruptura de membranas celulares lipídicas: desorganização da estrutura lipídica. Ex.: 
álcool, detergentes e fenóis (clorexidina).
Obs.: � o melhor álcool para fazer os processos químicos de desinfecção ou assepsia é o 
álcool 70%. 
• Modificação de proteínas: desnaturação proteica ou bloqueio de atividades enzimáti-
cas. Ex.: álcool, fenóis, óxido de etileno, cloro, iodo, metais pesados (sulfadiazina de 
prata), peróxido de hidrogênio, formaldeído e glutaraldeído, ácidos e bases.
• Modificação do DNA: ligação da molécula de carga positiva aos grupos fosfato de 
carga negativa dos ácidos nucleicos. Ex.: corantes (verde de malaquita, cristal violeta).
Níveis de desinfecção:
• Desinfetantes de alto nível: utilizados para itens utilizados em procedimentos invasivos 
que não podem suportar os procedimentos de esterilização (Ex.: instrumentos cirúrgi-
cos que não podem ser autoclavados). A desinfecção é mais eficiente se for realizada 
uma limpeza prévia da superfície para a remoção de material orgânico. Ex.: calor seco, 
glutaraldeído, peróxido de hidrogênio, ácido peracético e compostos de cloro.
• Desinfetantes de nível intermediário: utilizados para limpeza de superfícies ou de 
instrumentos nos quais é improvável a contaminação com esporos bacterianos ou por 
outros organismos altamente resistentes. Ex.: álcool, iodo, compostos fenólicos.
• Desinfetantes de baixo nível: tratam instrumentos e dispositivos não críticos que, 
embora entrem em contato com os pacientes, não penetram através da mucosa ou 
em tecidos estéreis. Ex.: compostos de amônio quaternário. 
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Métodos de Esterilização – Desinfecção e Assepsia – Aspectos Teóricos II
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Óxido de etileno: quimioesterilizante gasoso. Substituto de processos físicos de esteri-
lização, pois penetra na maioria dos materiais e destrói todos os microrganismos por desna-turação das proteínas.
Alquilação: substituição de átomos de hidrogênio das proteínas de um grupo químico 
por outro radical químico. É a formação de ligações cruzadas em ácidos nucleicos e proteí-
nas, e inibe as funções celulares vitais.
CARATERÍSTICAS E CONTROLE MICROBIANO
• As bactérias gram-negativas geralmente são mais resistentes do que as bactérias 
gram-positivas aos desinfetantes e antissépticos. 
• As micobactérias, os endósporos, os cistos e os oocistos dos protozoários são muito 
resistentes aos desinfetantes e aos antissépticos.
• Os vírus não envelopados geralmente são mais resistentes do que os vírus envelopa-
dos aos desinfetantes e antissépticos.
• Os príons (proteínas infecciosas) são resistentes à desinfecção e à autoclavação. 
Causam a doença comumente chamada de “síndrome da vaca louca”.
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Métodos de Esterilização – Desinfecção e Assepsia - Questões
ANÁLISES CLÍNICAS
MÉTODOS DE ESTERILIZAÇÃO – DESINFECÇÃO E ASSEPSIA – 
QUESTÕES
1. (PR-4/UFRJ/UFRJ/FARMACÊUTICO BIOQUÍMICO/2016) O processo utilizado para es-
terilizar as ampolas que deverão receber as soluções injetáveis é a:
a. Estufa elétrica.
b. Autoclavação sob pressão.
c. Autoclavação por vapor fluente.
d. Flambagem.
e. Radiação ultravioleta.
COMENTÁRIO
Esterilização.
Remoção de todos os microrganismos vivos, incluindo os vírus, esporos. O agente utilizado 
é o esterilizante.
Três métodos de esterilização: calor, radiação e filtração. O gás óxido de etileno também 
esteriliza.
a) Calor seco.
b) A pressão tem o risco de quebra.
c) Pode molhar o material que receberá uma solução injetável.
d) Flambagem só é utilizada para alças microbiológicas.
e) Utilizada para espaços fechados.
2. (FGV/FIOCRUZ/TECNOLOGISTA EM SAÚDE/PRODUÇÃO DE VACINAS VIRAIS/2010) 
Em relação ao processo de esterilização, com base na Resolução RDC N.17 de 2010, 
analise as afirmativas a seguir.
I – A esterilização por radiação é utilizada principalmente em materiais e produtos sen-
síveis ao calor.
II – A esterilização por calor seco pode ser adequada para líquidos não aquosos ou pro-
dutos em pó. 
III – Os métodos de esterilização por gases ou fumigantes somente devem ser usados 
quando não houver nenhum outro método disponível.
Assinale:
a. Se somente a afirmativa I estiver correta.
b. Se somente a afirmativa II estiver correta.
c. Se somente a afirmativa III estiver correta.
d. Se somente as afirmativas I e III estiverem corretas.
e. Se todas as afirmativas estiverem corretas.
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COMENTÁRIO
I – A radiação é utilizada para substituir a esterilização via autoclamação quando há um 
material sensível ao calor.
II – Utilizada quando não se pode expor o material à umidade.
III – O óxido de etileno quando exposto direto ao organismo da pessoa, poderia ser tóxico, 
havendo risco de explosão.
3. (COMPERVE/UFRN/FARMACÊUTICO BIOQUÍMICO/2015) Um método de esterilização 
tem por finalidade remover ou destruir todas as formas de vida encontradas no produto 
considerado, sem, contudo, garantir a inativação de toxinas e enzimas celulares. Sobre 
os diferentes métodos de esterilização, é correto afirmar:
a. A esterilização por filtração com membranas de poro de 0,45 μm é empregada para 
soluções termos sensíveis, sendo capaz de reter 100% de uma cultura contendo 10 7 
Minicro-organismos de Brevundimonas diminuta ATCC 19146.
b. A esterilização pelo calor úmido exige maior tempo de exposição e maiores temperatu-
ras do que a esterilização pelo calor seco.
c. A esterilização por radiação ionizante por raios alfa, beta, gama e raios X é o método 
mais eficaz e não precisa de controle de eficiência do ciclo de esterilização como os de-
mais processos. 
d. A esterilização por óxido de etileno pode ser o método de escolha para materiais que 
não resistem a altas temperaturas.
COMENTÁRIO
a) A dimensão do poro da membrana de nitrocelulose utilizada para filtração é 0,22 μm.
b) Calor úmido: autoclave, com temperatura de 121º C, no tempo de 15 minutos. Calor 
seco: forno, com temperatura de 170º C, no tempo de 2 horas.
c) Pouco utilizado, pois é arriscado.
d) Empregadas quando não houver outro método disponível.
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4. (CETRO/ANVISA/ESPECIALISTA EM REGULAÇÃO/VIGILÂNCIA SANITÁRIA/ÁREA 
1/2013) Esterilidade é a ausência de microrganismos viáveis. Os métodos de esteriliza-
ção têm, por finalidade, remover ou destruir todas as formas de vida, animal ou vegetal, 
macroscópica ou microscópica, saprófitos ou não, do produto considerado, sem garantir 
a inativação de toxinas e enzimas celulares. Em relação aos métodos de esterilização, é 
correto afirmar que:
a. A esterilização pelo calor seco se dá em função de processos oxidativos, que necessi-
tam de altas temperaturas em um curto tempo de exposição.
b. Na esterilização pelo calor em presença de água, são exigidos menores tempos de 
exposição e temperaturas.
c. A esterilização pelo calor úmido causa a solubilização dos lipídeos presentes na mem-
brana celular dos micro-organismos contaminantes, levando à sua inativação ou morte.
d. No método de esterilização por radiação ionizante, a dose absorvida de referência é 
de 250kGy.
e. A filtração para fins de esterilização é, normalmente, realizada com membranas de 
graduação de tamanho de poro nominal de 0,45µm, ou menor.
COMENTÁRIO
a) Calor seco pode ocorrer por oxidação, com temperatura de 170º C, com tempo de 
exposição de 2 horas.
b) Calor úmido (autoclavação): tempo de 15 minutos, com temperatura de 121º C.
c) Os agentes químicos fazem a solubilização dos lipídeos.
d) É de 250 nM.
e) É de 0,22 μm faz esterilização.
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5. (CETRO/ANVISA/ESPECIALISTA EM REGULAÇÃO/VIGILÂNCIA SANITÁRIA/ÁREA 
2/2013) Os métodos de esterilização têm por finalidade remover ou destruir todas as 
formas de vida, animal ou vegetal, macroscópica ou microscópica, saprófitos ou não, do 
produto considerado, sem garantir a inativação de toxinas e enzimas celulares. Em rela-
ção aos métodos de esterilização, é correto afirmar que:
a. A condição de referência para a esterilização pelo calor seco é temperatura mínima de 
100ºC por, pelo menos, 2 horas. 
b. Uma das vantagens do uso de radiações ionizantes é a possibilidade de esterilização 
de produtos termos sensíveis.
c. Uma das vantagens da esterilização por filtração em membranas é a alta resistência 
destas à ruptura durante a montagem, esterilização ou uso.
d. O programa de qualificação do processo de esterilização com óxido de etileno é menos 
amplo que de outros processos de esterilização.
e. A esterilização por calor úmido em autoclave é inadequada para vidrarias e outros ma-
teriais de laboratório.
COMENTÁRIO
a) Temperatura do forno: 170º C.
b) Embora as radiações ionizantes sejam pouco utilizadas, há possibilidade de serem 
utilizadas para produtos termos sensíveis.
c) As membranas utilizadas para filtração são de nitrocelulose, combaixa resistência.
d) O óxido de etileno é muito utilizado, sendo mais amplo que outros processos.
e) É adequada.
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6. (MÁXIMA/SAAE DE AIMORÉS/MG/CONTROLADOR DE QUALIDADE DE ÁGUA E ES-
GOTO/2016) Para a segurança biológica do laboratório é crucial um conhecimento bá-
sico de desinfecção e esterilização e dos seus princípios gerais. De acordo com estes 
princípios, enumere a segunda coluna de acordo com a primeira e assinale a alternativa 
correta.
1) Antimicrobiano.
2) Desinfecção.
3) Antisséptico.
4) Esterilização.
5) Microbiocida.
6) Esporocida.
( ) � Processo que mata e/ou remove todas as classes de microrganismos e esporos.
( ) � Substância que inibe o crescimento e desenvolvimento de microrganismos sem 
necessariamente os matar.
( ) � Agente que mata microrganismos ou impede o seu desenvolvimento e multiplicação.
( ) � Substância química ou mistura de substâncias químicas que matam micror-
ganismos. 
( ) � Meio físico ou químico de matar microrganismos, mas não necessariamente esporos.
( ) � Substância química ou mistura de substâncias químicas utilizadas para matar mi-
crorganismos e esporos.
a. 4-3-1-5-2-6.
b. 2-5-1-3-4-6.
c. 5-2-4-3-1-6.
d. 4-3-2-6-1-5.
COMENTÁRIO
Desinfecção: diminuir número de bactérias, de uma superfície inanimada, e que não inclui 
a eliminação de esporos. Caso seja uma superfície viva falaria em assepsia.
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7. (INSTITUTO AOCP/2017/EBSERH/FARMACÊUTICO/HUJB/UFCG) O farmacêutico que 
atua num ambiente hospitalar deve ter conscientização das variações dos riscos de trans-
missão de infecções, das dificuldades de cada método perante a natureza dos artigos, 
sendo importante, a fim de que possam ser tomadas as precauções necessárias para 
torná-las invariavelmente eficientes. Essa conscientização se inicia pelo conhecimento 
dos conceitos de limpeza, desinfecção, esterilização, antissepsia e assepsia, de modo a 
torna-los utilizáveis na prática. Glutaraldeido 2% por 30 minutos, hipoclorito de sódio 1%, 
álcool 70% e PVPI 10% são considerados, respectivamente:
a. Antisséptico, desinfetante, esterilizante e antisséptico.
b. Esterilizante, desinfetante, esterilizante e antisséptico.
c. Desinfetante, antisséptico, desinfetante e desinfetante.
d. Desinfetante, desinfetante, antisséptico e antisséptico.
e. Esterilizante, antisséptico, antisséptico e esterilizante.
COMENTÁRIO
Glutaraldeido faz desinfecção de alto nível.
Álcool 70% pode ser desinfetante ou antisséptico.
O iodo pode ser utilizado para fazer assepsia da pele. 
(CESPE/2010 /INCA/TECNOLOGISTA JÚNIOR/CITO TECNOLOGIA) Acerca da desin-
fecção e esterilização química, julgue os itens seguintes.
8. Desinfecção é o processo físico ou químico que destrói microrganismos presentes em 
objetos contaminados, sem atingir os esporos bacterianos.
COMENTÁRIO
A desinfecção deixa o material seguro para manipulação.
Ao falar em objetos “contaminados”, trata-se de descontaminação, feito com sanitizante.
9. O tempo de exposição necessário para a destruição de microrganismos depende da con-
centração e da potência do desinfetante.
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ANÁLISES CLÍNICAS
10. (CPCON/PREFEITURA DE CATOLÉ DO ROCHA/PB/BIOMÉDICO/2015) A segurança 
no material de laboratório e médico-hospitalar fica a cargo dos processos de esterilização 
e desinfecção destes materiais, cabendo aos profissionais de saúde habilitados promo-
ver o controle da proliferação de microrganismos através do uso de variadas técnicas. 
Analise as assertivas abaixo e marque a alternativa errada:
a. Os compostos químicos empregados para matar microrganismos na superfície da pele 
e nas membranas mucosas são denominados antissépticos.
b. A esterilização é a eliminação ou remoção de todos os microrganismos, inclusive as 
formas altamente resistentes, que são os esporos bacterianos.
c. A desinfecção consiste na morte de muitos microrganismos, mas não de todos. Para 
uma desinfecção adequada, os patógenos devem ser mortos, apesar de alguns organis-
mos, além de esporos bacterianos, poderem sobreviver ao processo.
d. A esterilização realizada pela autoclavagem consiste na exposição do material a ser 
esterilizado ao vapor de 121 ºC, sob pressão de 1 ATM, por 5 minutos.
COMENTÁRIO
a) O antisséptico faz desinfecção em tecidos vivos.
c) A desinfecção abaixa a contagem de microrganismo, mas não elimina todos.
d) São 15 minutos 
11. (FIOCRUZ/2016/TÉCNICAS LABORATORIAIS EM PARASITOLOGIA) Quanto aos pro-
cessos de esterilização e desinfecção, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as 
alternativas a seguir:
I – Formaldeído e glutaraldeído são desinfetantes que exercem seu efeito pela alquila-
ção.
II – O álcool a 70% é mais ativo que a 95%.
III – Exposição a um comprimento de onda de 254 nm permite a esterilização.
As afirmativas I, II e III são, respectivamente:
a. F, V e V.
b. V, F e F.
c. F, V e F.
d. V, V e V.
e. F, F e V.
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COMENTÁRIO
I – Mesmo mecanismo do óxido de etileno.
II – É preciso diluir um pouco o álcool para aumentar seu tempo de ação na superfície.
III – Exposição à radiação não ionizante (UV).
GABARITO
1. a
2. e
3. d
4. b
5. b
6. a
7. d
8. E
9. C
10. d
11. d
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A presente degravação tem como objetivo auxiliar no acompanhamento e na revisão do conteúdo 
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