Relatório de prática - Coprocultura

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 Coprocultura 
É normal encontrar bactérias em coprocultura, por isso, deve-se atentar às bactérias 
de interesse clínico, que são enteropatogênicas: Salmonella sp, Shigella sp, Escherichia 
coli, e Yersinia. 
No caso da Escherichia coli e da Yersinia, existem as bactérias enteropatogênicas e 
as da microbiota intestinal. Logo, ao identificar a presença dessas bactérias, deve ser feita 
uma sorotipagem, através de uma reação de aglutinação, para caracterizá-las. 
 Para a realização do exame de cultura de fezes, após coleta, com auxílio de 
uma alça de platina, o material foi colocado em um tubo de ensaio contendo 
Tetrationato, um meio de enriquecimento seletivo, que favorece o crescimento 
de bactérias patogênicas e inibe o crescimento de bactérias não patogênicas. 
 Em seguida, o tubo foi agitado e observou-se se a cor da solução estava 
semelhante à cor das fezes. 
 O tubo de ensaio na estufa a 37º C por cerca de 3 horas, até o fim da aula. 
 Após decorrido esse tempo, o conteúdo foi retirado da estufa e semeado nos 
meios Ágar EMB, que favorece o crescimento de bactérias Gram negativas e 
no Ágar SS, para crescimento de Salmonella sp e Shigella sp. Para o semeio, 
fez-se estrias próximas até a metade da placa, em seguida a alça foi flambada 
para retirar um pouco das bactérias e o semeio continuou com estrias mais 
distanciadas e em direção diferente da anterior, para que se possa obter 
colônias isoladas. 
 As placas foram colocadas na estufa a 37ºC mais uma vez. 
 
 
 
 
 
 
 Leitura das placas – Coprocultura 
 Após 48 horas de incubação, as placas foram retiradas da estufa para leitura. 
 Observou-se as colônias que cresceram nas placas de EMB e SS. 
 No Ágar EMB, as bactérias de importância clínica são colônias verdes 
metálicas (sugestivo de E. coli) e incolores. No ágar SS, as colônias 
importantes são incolores ou pretas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Nas placas estudadas, observou-se presença de colônias verde metálicas no EMB, 
bem como de uma colônia preta no SS. Foram realizadas então as provas 
bioquímicas para identificação das bactérias. 
 
 Provas bioquímicas - Coprocultura 
 Com auxílio de uma haste de inoculação introduziu-se as bactérias nos meios 
TSI, SIM, CITRATO, LIA e UREIA. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Os testes foram colocados na estufa. 
 Após 24 horas, foi realizada a leitura das provas bioquímicas. 
 
Ágar EMB com presença de bactéria 
com coloração verde metálica, 
sugestivo de Escherichia coli. 
Ágar SS com presença de bactérias 
com coloração preta, sugestivo de 
Salmonella sp. 
Citrato 
TSI LIA 
SIM
M 
Ureia 
Resultados: 
PROVA COLÔNIA PRETA COLÔNIA VERDE 
TSI Ápice e base de cor amarelo, 
sem presença de H2S, com 
presença de gás 
Ápice e base de cor 
amarelo, sem presença de 
H2S, com presença de gás 
SIM Positivo Negativo 
CITRATO Positivo Positivo 
LIA Positivo Positivo 
UREIA Positivo Negativo 
INDOL Positivo Positivo 
 
 
Ordem dos tubos nas fotografias: Ureia, LIA, Citrato, SIM e TSI, respectivamente. 
 Para ambas as bactérias, o tubo do TSI ficou completamente amarelo, mostrando 
que a bactéria fermentou os três açúcares: glicose, lactose e sacarose. Além disso, 
hoube formação de bolhas, mostrando a produção de CO2. No entanto, não houve 
produção de H2S, já que não houve formação de pigmentação negra. 
 Para a colônia preta, houve turvação no tubo do SIM, mostrando que a bactéria é 
móvel. Para a colônia verde, não houve turvação do SIM. Em ambas, após a 
adição de 5 gotas do reagente de Kovacs, houve produção de um pigmento rosa, 
indicando indol positivo. 
 Nos dois tubos de Citrato, houve aparição de coloração azul, indicando Citrato 
positivo. Como na colônia verde, havia suspeita de E. coli, recomendou-se a 
repetição do teste. No entanto, ao realizar a sorotipagem, optou-se pela não 
repetição do teste. 
 Os tubos de lisina continuaram com a cor original, púrpura, mostrando lisina 
positiva. 
Resultado das provas para a 
colônia preta. 
Resultado das provas para a 
colônia verde. 
 O tubo de ureia foi positivo para a colônia preta, adquirindo coloração rosa. Já 
para a colônia verde, foi negativo, visto que o meio continuou amarelo. 
 Não foi encontrada bactéria com características da colônia preta. 
 Como havia sugestão de Escherichia coli na bactéria verde, mesmo com o citrato 
positivo, realizou-se o teste de sorotipagem, para verificar se a bactéria era 
enteropatogênica ou de flora normal. 
 Introduziu-se a bactéria na solução salina até a solução ficar turva. 
Posteriormente, a uma lâmina, adicionou-se 20 microlitros desta suspensão 
bacteriana + 1 gota do reagente. 
 Não houve reação de aglutinação. 
 Optou-se por não repetir a prova do Citrato, tendo em vista que a bactéria 
identificada fazia parte da microbiota intestinal. 
 Resultado: Não houve crescimento de bactérias enteropatogênicas.