Princípio do teste glicose oxidase

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Princípio do teste glicose oxidase/peroxidase:
· Um dos métodos mais utilizados para a dosagem da glicose sanguínea é o enzimático;
· Método enzimático-colorimétrico (TRINDER)
· A glisose é a principal fonte energética do organismo humano, e pode ser proveniente da dieta ou produzida através de vias metabólicas a partir das gorduras ou outros componentes extremos;
TESTE:
· Glicose liquiform 133
· Reagente de trabalho (nº1) glicose, peroxidase, 4-aminoantipirina e fenol;
· Tubos: Branco, padrão e teste (amostra do paciente)
· Frasco tampa verde, calibração, concentração de glicose conhecida – contém: glicose 100 mg/dl
ROTULAR 3 OU 4 TUBOS:
· B: branco
· P: padrão
· T1: teste 1
· T2: teste 2
PROCEDIMENTO:
· Homogeneizar o reagente de trabalho (RT)
· Etapa 1: Nos tubos B, T1, T2 e P, adicionar 1ml (1000ul) do reagente de trabalho (RT);
· Etapa 2: adicionar o padrão no tubo P e as amostras 1 e 2 nos tubos T1 e T2
· No tubo P adicionar 0,01 ml do padrão (reagente 2)
· Homogeneizar de 3 a 4 vezes
· Cuidado para não formar bolha*
· Homogeneizar a amostra (soro ou plasma do paciente)
· No tubo T1 (amostra teste 1), adicionar 0,01 ml da amostra de soro ou plasma do paciente 1
· Homogeneizar de 3 a 4 vezes
· Cuidado para não formar bolha*
· Homogeneizar a amostra (soro ou plasma do paciente)
· No tubo T2 (amostra teste 2) adicionar 0,01 ml da amostra de soro ou plasma do paciente 2.
· Homogeneizar de 3 a 4 vezes
· Cuidado para não formar bolha*
· Homogeneizar a amostra (soro ou plasma do paciente)
· Misturar cada um dos tubos e incubar por 10 minutos em banho-maria (37º)
· OBS: o nível da agua no banho deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio
· Podemos visualizar a cor vermelha do cromógeno após a reação enzimática
· O complexo corado vermelho (cromógeno) apresenta absorbância proporcional à concentração de glicose na amostra analisada, medida a 505 nm (filtro verde 500-520 nm),
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