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UNIVERSIDADE DA AMAZÔNIA CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE MEDICINA VETERINÁRIA DISCIPLINA MICROBIOLOGIA BÁSICA PROFA. BIANCA AMORIM Fabíola Luiza Ramos Raiol Iris Isabel Rodrigues Nunes André Victor Oliveira Nunes da Silva Ana Teresa Macedo Alves dos Santos Relatório de aula prática Nº 02 Meios de Cultura Belém 2021.2 2 1. INTRODUÇÃO O seguinte relatório da aula prática do curso de Medicina Veterinária da Universidade da Amazônia (UNAMA) foi produzido para descrever os meios de cultura observados durante a aula de Microbiologia que ocorreu no dia 10 de novembro de 2021 e abordou o assunto referente aos diferentes tipos de ágar e antibiograma. Os meios de cultura são preparações químicas, que possuem em sua formulação nutrientes necessários para que os microrganismos possam se multiplicar permitindo, entre outras funções, seu estudo e análise. Para o cultivo de bactérias. Podem ser utilizados meios líquidos, sólidos ou semi-sólidos. Os dois tipos de meios de cultura utilizados em microbiologia sã Crescimento em ágar; Crescimento em caldo 1.2. OBJETIVO Desenvolver habilidades para identificar as diferentes reações dos micro- organismos nas placas de Petri contendo ágar Cled, ágar Macconkey e ágar Sangue. 2. DESCRIÇÃO DOS ÁGAR APRESENTADOS 2.1. ÁGAR CLED Meio de cultura nutritivo,não seletivo e diferencial, destinado a cultura de urina. Este meio de cultura promove o crescimento de agentes patogênicos e contaminantes urinários e reduz a formação de swarming (véu) de espécies de Proteus spp., devido a baixa concentração de eletrólitos. 3 2.2. ÁGAR MACCONKEY O ágar Macconkey é um meio diferencial seletivo utilizado para o isolamento e diferenciação de enterobactérias e uma variedade de outros bastonetes gram-negativos provenientes de amostras clínicas. Neste meio se pode diferenciar bactérias fermentadoras da lactose, através de formação de colônias róseas, as bactérias não fermentadoras da lactose, com formação de colônias incolores. 2.3. ÁGAR SANGUE Meio enriquecido, não seletivo e diferencia, pela caracterização de hemólise e prova do satelitismo, para cultivo de bactérias em materiais clínicos e não clínicos. O meio de cultura ágar sangue de carneiro proporciona o crescimento da grande maioria das bactérias gram-positivas e gram-negativas bem como de fungos (bolores e leveduras), a partir de uma base rica e suplementada. 4 2.4. ÁGAR MUELLER MINTON O Agar Mueller Hinton (MH) é um meio de cultura utilizado para realizar Testes de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA). Esse teste também é conhecido como Antibiograma, difusão em disco ou ainda teste de suscetibilidade Kirby-Bauer. A finalidade do método consiste em testar se a bactéria em análise é sensível a determinados antibiótico. 3. CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS 3.1. PSEUDOMONAS Pseudomonas é um gênero de bactérias gram-negativas, bacilares, ubíquas (amplamente encontradas em diversos ambiente) da Família Pseudomonadaceae. A espécie mais patógena é a Pseudomonas aeruginosa que causa infecções respiratórias e urinárias. Foi apresentado em meio de cultura ágar Cled e ágar Macconke, não obtendo reação no ágar Cled que permaneceu verde, já no ágar Macconkey a placa tornou-se amarelada, demostrando reação uma vez que a cor original do ágar Macconkey é rosa. Tal coloração demonstra que houve fermentação desse microorganismo e confirma o fato de se tratar de uma bactéria gram-negativa. Demonstrou aparência aquosa e escorrendo pela placa de Petri. 3.2. ESCHERICHIA COLI Escherichia coli é o nome de uma bactéria que habita o intestino de animais endotérmicos, cuja presença pode indicar aspectos relativos à qualidade da água e de alimentos. A E. coli também pode provocar doenças, como infecções urinárias, diarreia e a colite hemorrágica e síndrome hemolítico-urêmica. A bactéria foi apresentada em placa de Petri em ágar Cled e Macconkey, não apresentando mudanças de coloração no ágar Macconkey,o mente crescimento de 5 colônia, outrossim no ágar Cled apresentou reação que tornou a aparência do ágar amarelado, esse que é originalmente verde. Indicando assim que se trata de um agente patogênico. A colônia apresentou aparência cremosa, semelhante a um molho. 3.3. ENTEROBACTÉRIA As enterobactérias são uma família de bacilos gram-negativos responsáveis por uma ampla gama de infecções em humanos e animais. Elas podem ser móveis ou sem motilidade, dependendo da espécie, e aeróbias ou anaeróbias em crescimento, e têm uma preferência por habitar o trato gastrintestinal. Crescem em uma variedade de meios sólidos. Foi depositado em placa de Petri sobre ágar Cled e ágar Macconkey, apresentou mudança de coloração na placa contendo o ágar Macconkey, indicando fermentação da enterobactéria. A colônia ficou com aparência de um creme, sem escorrer pela placa. 3.4. PROTEUS Proteus mirabilis é uma bactéria gram-negativos, anaeróbia facultativa, em forma de bastonete, com motilidade e capaz de produzir grandes quantidades de urease. P. mirabilis é responsável por 90% de todas as infecções em humanos por bactérias Proteus. Está amplamente distribuída pelo meio ambiente, em matéria orgânica, no solo e na água. 6 Foi apresentado em ágar sangue e ágar Macconkey, apresentando reação em ambos, no ágar sangue apresentou hemolise e no Macconkey mudança na coloração. 3.5. STAPHYLOCOCCUS PSEUDINTERMEDIUS Staphylococcus pseudintermedius é uma bactéria coccus gram positiva do gênero Staphylococcus encontrada em todo o mundo. É principalmente um patógeno para animais domésticos, mas também é conhecido por afetar humanos. Foi apresentado em antibiograma em placa de Petri,om ágar Mueller Minton contendo os antibióticos: Gentamicina, Sulfamentoxazol+Trimetoprina, Eritromicina, Enrofloxacina, Cefoxitina, Novobiocina e Clindamicina. Demonstrando como reações nenhum crescimento ao redor do medicamento Cefocitina, significando que este é o antibiótico mais eficaz contra esse microorganismo. Ao redor do antibiótico Novobiocina apresentou crescimento mediano, mostrando que se trata de um antibiótico também eficaz, no entanto menos agressivo. O antibiótico Gentamicina se mostrou menos eficaz que os anteriores, mas ainda inibiu o crescimento da Staphylococcus pseudintermedius. O antibiótico Clendamicida apresentou pouca ação contra o patógeno, os demais antibióticos não se mostraram eficazes conta a bactéria, já que ocorreu crescimento de colônia ao redor desses medicamentos. https://en.m.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_pseudintermedius#cite_note-pmid21038805-3 Meio enriquecido, não seletivo e diferencia, pela caracterização de hemólise e prova do satelitismo, para cultivo de bactérias em materiais clínicos e não clínicos. O meio de cultura ágar sangue de carneiro proporciona o crescimento da grande maioria das bactérias gram-positivas e gram-negativas bem como de fungos (bolores e leveduras), a partir de uma base rica e suplementada. 2.4. ÁGAR MUELLER MINTON O Agar Mueller Hinton (MH) é um meio de cultura utilizado para realizar Testes de Sensibilidade aos Antimicrobianos (TSA). Esse teste também é conhecido como Antibiograma, difusão em disco ou ainda teste de suscetibilidade Kirby-Bauer. A finalidade do método consiste em testar se a bactéria em análise é sensível a determinados antibiótico. 3. CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS 3.1. PSEUDOMONAS Pseudomonas é um gênero de bactérias gram-negativas, bacilares, ubíquas (amplamente encontradas em diversos ambiente) da Família Pseudomonadaceae. A espécie mais patógena é a Pseudomonas aeruginosa que causa infecções respiratórias e urinárias. Foi apresentado em meio de cultura ágar Cled e ágar Macconke, não obtendo reação no ágar Cled que permaneceu verde, já no ágar Macconkeya placa tornou-se amarelada, demostrando reação uma vez que a cor original do ágar Macconkey é rosa. Tal coloração demonstra que houve fermentação desse microorganismo e confirma o fato de se tratar de uma bactéria gram-negativa. Demonstrou aparência aquosa e escorrendo pela placa de Petri. 3.2. ESCHERICHIA COLI Escherichia coli é o nome de uma bactéria que habita o intestino de animais endotérmicos, cuja presença pode indicar aspectos relativos à qualidade da água e de alimentos. A E. coli também pode provocar doenças, como infecções urinárias, diarreia e a colite hemorrágica e síndrome hemolítico-urêmica. A bactéria foi apresentada em placa de Petri em ágar Cled e Macconkey, não apresentando mudanças de coloração no ágar Macconkey,o mente crescimento de colônia, outrossim no ágar Cled apresentou reação que tornou a aparência do ágar amarelado, esse que é originalmente verde. Indicando assim que se trata de um agente patogênico. A colônia apresentou aparência cremosa, semelhante a um molho. 3.3. ENTEROBACTÉRIA As enterobactérias são uma família de bacilos gram-negativos responsáveis por uma ampla gama de infecções em humanos e animais. Elas podem ser móveis ou sem motilidade, dependendo da espécie, e aeróbias ou anaeróbias em crescimento, e têm uma preferência por habitar o trato gastrintestinal. Crescem em uma variedade de meios sólidos. Foi depositado em placa de Petri sobre ágar Cled e ágar Macconkey, apresentou mudança de coloração na placa contendo o ágar Macconkey, indicando fermentação da enterobactéria. A colônia ficou com aparência de um creme, sem escorrer pela placa. 3.4. PROTEUS Proteus mirabilis é uma bactéria gram-negativos, anaeróbia facultativa, em forma de bastonete, com motilidade e capaz de produzir grandes quantidades de urease. P. mirabilis é responsável por 90% de todas as infecções em humanos por bactérias Proteus. Está amplamente distribuída pelo meio ambiente, em matéria orgânica, no solo e na água. Foi apresentado em ágar sangue e ágar Macconkey, apresentando reação em ambos, no ágar sangue apresentou hemolise e no Macconkey mudança na coloração. 3.5. STAPHYLOCOCCUS PSEUDINTERMEDIUS Staphylococcus pseudintermedius é uma bactéria coccus gram positiva do gênero Staphylococcus encontrada em todo o mundo. É principalmente um patógeno para animais domésticos, mas também é conhecido por afetar humanos. Foi apresentado em antibiograma em placa de Petri,om ágar Mueller Minton contendo os antibióticos: Gentamicina, Sulfamentoxazol+Trimetoprina, Eritromicina, Enrofloxacina, Cefoxitina, Novobiocina e Clindamicina. Demonstrando como reações nenhum crescimento ao redor do medicamento Cefocitina, significando que este é o antibiótico mais eficaz contra esse microorganismo. Ao redor do antibiótico Novobiocina apresentou crescimento mediano, mostrando que se trata de um antibiótico também eficaz, no entanto menos agressivo. O antibiótico Gentamicina se mostrou menos eficaz que os anteriores, mas ainda inibiu o crescimento da Staphylococcus pseudintermedius. O antibiótico Clendamicida apresentou pouca ação contra o patógeno, os demais antibióticos não se mostraram eficazes conta a bactéria, já que ocorreu crescimento de colônia ao redor desses medicamentos.
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