Introdução ao Estudo de Patologia

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Patologia 
 
INTRODUÇÃO AO ESTUDO DA PATOLOGIA 
CONCEITO DE PATOLOGIA 
➢ ETIMOLOGIA: PATOLOGIA = ESTUDO DAS DOENÇAS 
• PATHOS = DOENÇA, SOFRIMENTO / LOGOS = 
ESTUDO, DOUTRINA 
➢ CONCEITO: 
• ESTUDO DAS DOENÇAS, SUAS CAUSAS, MECANISMOS 
DE AÇÃO, EFEITOS FUNCIONAIS, MORFOLÓGICOS E 
EVOLUÇÃO NO ORGANISMO 
• ESTUDO DAS ALTERAÇÕES ESTRUTURAIS, 
BIOQUIÍMICAS E FUNCIONAIS EM CÉLULAS, TECIDOS 
E ÓRGÃOS QUE CONSTITUEM A BASE DAS DOENÇAS 
SAÚDE 
➢ PARA A ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE, A SAÚDE 
NÃO É APENAS A AUSÊNCIA DE DOENÇA, MAS SIM UM 
COMPLETO BEM-ESTAR FÍSICO, MENTAL E SOCIAL DE 
UMA PESSOA 
➢ UM INDIVÍDUO SAUDÁVEL ESTÁ EM ESTADO DE 
ADAPTAÇÃO DO ORGANISMO AO SEU AMBIENTE, SEJA 
FÍSICO, PSÍQUICO OU SOCIAL 
➢ A PESSOA SE SENTE BEM (SAÚDE SUBJETIVA) E 
TAMBÉM NÃO APRESENTA ALTERAÇÕES ORGÂNICAS 
(SAÚDE OBJETIVA) 
DOENÇA 
➢ É UM ESTADO DE FALTA DE ADAPTAÇÃO AO AMBIENTE 
FÍSICO, PSÍQUICO OU SOCIAL 
➢ UM DESEQUILÍBRIO NO QUAL O INDÍVIDUO 
APRESENTA SINTOMAS (ALTERAÇÕES SUBJETIVAS), OU 
SEJA, SE SENTE MAL E/OU APRESENTA SINAIS CLÍNICOS 
QUE SÃO ALTERAÇÕES ORGÂNICAS OBJETIVAS 
 
➢ A PATOLOGIA CUIDA: 
• DO ESTUDO DAS CAUSAS DAS DOENÇAS 
(ETIOLOGIA) – ESSAS CAUSAS PODEM SER GENÉTICAS 
(COMO MUTAÇÕES HEREDITÁRIAS), ADIQUIRIDAS 
(COMO DOENÇAS INFECCIOSAS)... 
• TAMBÉM INCLUI O ESTUDO DOS MECANISMOS 
PATOGENÉTICOS, MECANISMOS BIOQUÍMICOS E 
MOLECULARES DO DESENVOLVIMENTO DAS 
DOENÇAS CONHECIDO COMO PATOGENIA 
• CUIDA TAMBÉM DA FISIOPATOLOGIA QUE É O 
ESTUDO DAS ALTERAÇÕES FUNCIONAIS DE ÓRGÃOS 
E SISTEMAS AFETADOS 
• E TAMBÉM DA ANATOMIA PATOLÓGICA QUE É O 
ESTUDO DAS ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS DOS 
TECIDOS, OU SEJA, DAS LESÕES TECIDUAIS 
 
➢ A PATOLOGIA É 
A BASE DO 
CONHECIMENTO E 
DAS PRÁTICAS 
MÉDICAS E DAS 
DEMAIS ÁREAS DA 
SAÚDE E É UMA 
PONTE ENTRE AS 
CIÊNCIAS BÁSICAS E 
A MEDICINA 
CLÍNICA 
 
 
 
 
UTILIDADE PRÁTICA DA PATOLOGIA 
➢ A PATOLOGIA POSSIBILITA UMA COMPREENSÃO 
GLOBAL DAS DOENÇAS PORQUE FORNECE AS BASES 
DO CONHECIMENTO DE ELEMENTOS COMO 
PREVENÇÃO, MANIFESTAÇÕES CLÍNICAS, 
DIAGNÓSTICOS, TRATAMENTO, EVOLUÇÃO E 
PROGNÓSTICO 
➢ QUANDO SE ESTUDA AS CAUSAS DAS DOENÇAS E 
QUANDO SE COMPREENDE OS MECANISMOS DE 
DESENVOLVIMENTO DAS DOENÇAS PODE SER 
POSSÍVEL PREVENIR A DOENÇA ATRAVÉS DA REDUÇÃO 
DE CONTATO COM O AGENTE CAUSADOR OU DA NÃO 
EXPOSIÇÃO AO AGENTE CAUSADOR (Ex.: EVITAR O 
FUMO OU A EXPOSIÇÃO PASSIVA A FUMAÇA DO 
CIGARRO QUE SÃO FATORES DE RISCO CONHECIDOS 
DO CÂNCER DE PULMÃO) E ATRAVÉS DA ETIOLOGIA E 
PATOGENIA PODE SE CHEGAR AO TRATAMENTO DA 
DOENÇA 
Ex.: ABORDAGENS TERAPÊUTICAS EXPECÍFICAS PARA 
DETERMINADAS ANORMALIDADES MOLECULARES/ 
USO DE ANTIBIÓTICOS PARA TRATAR INFECÇÕES 
BACTERIANAS/ USO DE ANTIFÚNGICOS PARA TRATAR 
INFECÇÕES FUNGÍCAS/ USO DE DROGAS INIBIDORAS 
DO SISTEMA IMUNOLÓGICO 
➢ ATRAVÉS DO ESTUDO DA FISIOPATOLOGIA E 
ANATOMIA PATOLÓGICA É POSSÍVEL O 
ESTABELECIMENTO DE CRITÉRIOS OBJETIVOS PARA 
Mariana Machado 
Patologia 
 
QUE SE POSSA FAZER O DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL 
ENTRE AS DOENÇAS, PERMITINDO ASSIM QUE SE 
REALIZE O DIAGNÓSTICO DEFINITIVO DE 
DETERMINADA ENFERMIDADE, COM ANÁLISE DESSAS 
ALTERAÇÕES É POSSÍVEL TAMBÉM AVALIAR 
RESPOSTAS PARA TRATAMENTOS PRÉVIOS, 
VERIFICANDO A EFICÁCIA DOS MESMOS (Ex.: ALGUNS 
CASOS DE CÂNCER DE MAMA, EM QUE ATRAVÉS DO 
EXAME DA MAMA RETIRADA CIRUGICAMENTE, HA 
ANÁLISE DE RESPOSTA A QUIMIOTERAPIA 
NEOADJUVANTE, OU SEJA, QUIMIOTERAPIA QUE FOI 
FEITA ANTES DE UM PROCEDIMENTO CIRÚRGICO PARA 
REDUZIR O TAMANHO DE UM TUMOR), PODE SER 
TAMBÉM ACOMPANHAR A EVOLUÇÃO CLÍNICA DE UM 
PACIENTE (Ex.: VERIFICAR O SURGIMENTO DE 
REINCIDIVA TUMORAL QUANDO HÁ O RETORNO DO 
CÂNCER) E TAMBÉM, ATRAVÉS DOS CONHECIMENTOS 
DA PATOLOGIA, PODE SE REALIZAR REABILITAÇÃO DO 
PACIENTE COM PLANEJAMENTO E 
ACOMPANHAMENTO FUNCIONAL 
DIVISÕES DA PATOLOGIA 
➢ PODE SER DIVIDIDA QUANTO A SUA ABRANGÊNCIA E 
QUANTO AO SEU OBJETIVO 
QUANTO À ABRANGÊNCIA 
PATOLOGIA GERAL 
➢ ESTUDA OS MECANISMOS GERAIS DAS DOENÇAS 
➢ DANDO ENFOQUE NAS RESPOSTAS, NAS REAÇÕES DAS 
CÉLULAS E DOS TECIDOS AOS ESTÍMULOS 
PATOLÓGICOS 
PATOLOGIA ESPECIAL OU SISTÊMICA 
➢ ESTUDA AS CARACTERÍSTICAS DE CADA DOENÇA DE 
ACORDO COM O ÓRGÃO E O SISTEMA ACOMETIDO 
➢ COMO OS PROCESSOS DE DOENÇAS ESPECÍFICOS 
AFETAM OS ÓRGÃOS OU SISTEMAS EM PARTICULAR 
Ex.: DERMOPATOLOGIA, NEFROPATOLOGIA, 
NEUROPATOLOGIA, ETC... 
QUANTO AO OBJETIVO 
ESTUDO CIENTÍFICO 
➢ ENTENDER O PROCESSO DA “DOENÇA” 
ESTUDO EXPERIMENTAL 
➢ PESQUISA BIOMÉDICA 
DIAGNÓSTICO 
➢ LABORATÓRIO DE ANATOMIA PATOLÓGICA 
PATOLOGIA DIAGNÓSTICA 
POST MORTEM 
➢ APÓS UM ÓBITO DE UM INDIVÍDUO 
➢ PATOLOGIA DE NECROPSIA: ESTUDO MÉDICO-
CIENTÍFICO SISTEMÁTICO E DETALHADO DO CADÁVER 
➢ QUANDO A MORTE É POR CAUSAS NATURAIS, A 
NECROPSIA PODE SER REALIZADA NO AMBIENTE 
HOSPITALAR 
➢ QUANDO O ÓBITO SE DA POR CAUSAS NÃO-NATURAIS, 
VIOLENTA, SUSPEITA, SEM ASSISTÊNCIA MÉDICA, 
ENCONTRO DE CADÁVER, SUSPEITA DE ERRO MÉDICO 
DEVE OCORRER EM AMBIENTE MÉDICO-LEGAL 
NO PACIENTE VIVO 
➢ ATRAVÉS DE ANÁLISE DE PEÇAS CIRÚGICAS OU DE 
AMOSTRAS, FRAGMENTOS QUE FORAM OBTIDOS 
PARA A REALIZAÇÃO DE BIÓBSIAS DE DETERMINADAS 
LESÕES 
➢ EXISTEM EXAMES QUE PODEM SER FEITOS DURANTE O 
ATO CIRÚRGICO (EXAME PRÉ-OPERATÓRIO) EM QUE O 
CIRURGIÃO ENVIA UMA AMOSTRA OU O PRÓPRIO 
ÓRGÃO PARA O PATOLOGISTA PARA QUE ELE POSSA 
FAZER UMA ANÁLISE RÁPIDA E DAR UMA POSIÇÃO 
PARA O CIRURGIÃO, PARA QUE ELE POSSA DECIDIR 
QUAL PROCEDIMENTO ELE DARÁ NO ATO CIRÚRGICO 
➢ CITOPATOLOGIA: 
• ESTUDAR AS CÉLULAS E ALTERAÇÕES 
MORFOLÓGICAS DE CASOS PATOLÓGICOS 
Ex.: EXAME PREVENTIVO OU CORPO OCITOLÓGICO 
ONDE HÁ ANÁLISE DAS CÉLULAS DO COLO UTERINO 
PARA A PREVENÇÃO DO CÂNCER DE COLO DE ÚTERO 
 
AGENTES PATOGÊNICOS 
➢ AS AGRESSÕES PODEM SE ORIGINAR DO AMBIENTE 
EXTERNO OU NO PRÓPRIO ORGANSIMO 
FATORES ADQUIRIDOS 
AGENTES FÍSICOS 
➢ RADIAÇÕES 
Ex.: RADIAÇÃO UV QUE PODE LEVAR AO SURGIMENTO 
DE CÂNCER DE PELE 
 
Patologia 
 
 
 
 
 
 
➢ VARIAÇÕES DE TEMPERATURA E ALTERAÇÕES DA 
PRESSÃO ATMOSFÉRICA 
➢ CALOR EXTREMO – QUEIMADURAS 
 
 
 
 
 
 
➢ FRIO INTENSO TAMBÉM É A GENTE PATOGÊNICO 
LEVANDO A QUADROS DE HIPOTERMIA E ATÉ A ÓBITO 
 
AGENTES MECÂNICOS 
➢ ACIDENTES/TRAUMAS 
 
 
 
 
 
 
AGENTES QUÍMICOS 
➢ REPRESENTADO POR INÚMERAS SUBSTÂNCIAS 
TÓXICAS (Ex.: AGROTÓXICOS, AGENTES POLUENTES 
AMBIENTAIS, MEDICAMENTOS, DROGAS ILÍCITAS...) 
➢ ATÉ MESMO SUBSTÂNCIAS QUE NÃO SÃO NOCIVAS, 
COMO A GLICOSE E O SAL, PODEM LEVAR A 
DESEQUILÍBRIOS DEPENDENDO DA SUA 
CONCENTRAÇÃO 
 
 
 
 
 
AGENTES BIOLÓGICOS (AGENTES INFECCIOSOS) 
➢ VÍRUS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
➢ BACTÉRIAS 
 
• DIFERENTES CLASSES DE BACTÉRIAS SÃO 
RESPONSÁVEIS POR DIVERSAS INFECÇÕES 
➢ FUNGOS 
• PODEM CAUSAR DESDE CASOS SUPERFFICIAIS NA 
PELE ATÉ CASOS GRAVES COM 
COMPROMETIMENTOS DA IMUNIDADE COMO 
INFECÇÕES PULMONARES GRAVES 
FATORES GENÉTICOS 
➢ PODEM SER TANTO POR MUTAÇÕES DE UM ÚNICO 
GENE (Ex.: ANEMIA FALSIFORME EM QUE A 
Patologia 
 
SUBSTITUIÇÃO DE UM ÚNICO AMINOÁCIDO ALTERA AS 
PROPRIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DA HEMOGLOBINA) 
➢ PODEM OCORRER TAMBÉM DOENÇAS 
CROMOSSÔMICAS, ONDE HÁ ALTERAÇÕES 
ESTRUTURAIS OU NÚMERICAS NOS CROMOSSOMOS 
(Ex.: SÍNDROME DE DOWN) 
DOENÇAS GENÉTICAS 
➢ AS ALTERAÇÕES GENÉTICAS MAIS COMUNS SÃO AS 
DOENÇAS MULTIGÊNICAS COMPLEXAS QUE SÃO 
CAUSADAS POR INTERAÇÕES ENTRE MULTIPLAS 
FORMAS VARIANTES DE GENES, POLIMORFISMOS E 
FATORES AMBIENTAIS 
➢ A DOENÇA OCORRE SOMENTE QUANDO MUITO 
DESSES POLIMORFISMOS ESTÃO PRESENTES NO 
INDIVÍDUO E DEPENDE DE INTERAÇÕES AMBIENTAIS 
Ex.: DIABETES, HIPERTENSÃO E AS DOENÇAS AUTO-
IMUNES 
OBS.: É COMUM QUE AS DOENÇAS SEJAM MULTIFATORIAIS 
MÉTODOS DE ESTUDO 
HISTOPATOLOGIA 
➢ O LABORATÓRIO VAI RECEBER A PEÇA CIRÚRGICA OU 
O MATERIAL PROVENIENTE DE BIÓPSIA 
➢ ESSA PEÇA VAI SER INICIALMENTE ANALISADA A OLHO 
NU, REALIZANDO A MACROSCOPIA DESSE MATERIAL 
RECEBIDO ONDE AS CARACTERISTICAS SERÃO 
DESCRITAS E DETALHADAS 
➢ O PATOLOGISTA VAI REALIZAR A CLIVAGEMDO 
TECIDO, ONDE ELE SELECIONA MELHORES ÁREAS PARA 
REPRESENTAÇÃO DESSE MATERIAL E ESSES 
FRAGMENTOS QUE SÃO SELECIONADOS VÃO VIRAR 
POSTERIORMENTE UMA LÂMINA PARA A ANÁLISE 
DIAGNÓSTICA NO MICROSCÓPIO ÓPTICO 
 
 
➢ O MATERIAL RECEBIDO PARA EXAME 
HISTOPATOLÓGICO DEVE: 
1. FIXADO EM SOLUÇÃO AQUOSA DE FORMOL A 10% 
OU OUTRA SOLUÇÃO FIXADORA (20x O VOLUME DO 
MATERIAL A SER FIXADO) 
2. ACOMPANHADO DE FICHA COM DADOS DO 
PACIENTE 
3. REGISTRADO COM NÚMERO ÚNICO/PACIENTE 
4. DESCRITO MACROSCOPICAMENTE 
5. CLIVADO (X BLOCOS, X FRAGMENTOS) 
6. ENVIADO PARA O HISTOTECNOLÓGO 
7. PROCESSAMENTO 
8. EMBLOCAMENTO 
9. CORTES E BANHO HISTOLÓGICO 
10. COLORAÇÃO EM H&E 
11. O PATOLOGISTA VAI RECEBER A LÂMINA CORADA EM 
H&E E VAI ANALISAR NO MICROSCÓPIO ÓPTICO AS 
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS, DESCREVENDO 
AS CARACTERÍSTICAS E FAZENDO DIAGNÓSTICO 
MICROSCÓPICO (VAI DEPENDER DA RELAÇÃO COM A 
MACROSCOPIA FEITA ANTERIORMENTE E COM OS 
DADOS CLÍNICOS RECEBIDOS DO PACIENTE) 
 
 
Patologia 
 
MICROSCOPIA 
MICROSCÓPIO ÓPTICO COMUM 
➢ A MAIS UTILIZADA PARA ANÁLISE DOS CORTES 
HISTOLÓGICOS E DAS PREPARAÇÕES CITOLÓGICAS 
➢ POSSIBILITA AUMENTO DE CERCA DE 1000x 
➢ PERMITE A CONTINUAÇÃO DA ANÁLISE MORFOLÓGICA 
 
 
 
 
 
 
 
MICROSCÓPIO DE FLUORESCÊNCIA 
➢ EQUIPADO COM FONTES DE LUZ ULTRA-VIOLETA 
➢ FREQUENTEMENTE UTILIZADO EM REAÇÕES DE 
IMUNOFLUORESCÊNCIA 
➢ POSSIBILITA AUMENTO DE CERCA DE 1000x 
MICROSCÓPIO CONFOCAL POR VARREDURA À LASER 
➢ TEM A VANTAGEM DE PERMITIR A ANÁLISE 
MORFOLÓGICA EM PLANOS E DIVERSAS 
PROFUNDIDADES 
➢ EXISTE UM COMPUTADOR ACOPLADO AO 
MICROSCÓPIO QUE PERMITE A CONSTRUÇÃO DE UMA 
IMAGEM TRIDIMENSIONAL 
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO 
➢ FORNECE AUMENTO DE ATÉ 1 MILHÃO DE VEZES 
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE VARREDURA 
➢ FORNECE AUMENTO DE ATÉ 1 MILHÃO DE VEZES 
➢ TEM A VANTAGEM ADICIONAL DE MOSTRAR DETALHES 
NA SUPERFÍCIE NATURAL DE DIVERSAS ESTRUTURAS 
 
CITOPATOLOGIA 
➢ A MICROSCOPIA ÓPTICA PODE PERMITIR TAMBÉM A 
ANÁLISE DE EXAMES CITOPATOLÓGICOS QUE 
RESULTAM DE ABORDAGENS, EM GERAL, MENOS 
INVASIVAS E PODEM PERMITIR COM QUE SEJAM 
REALIZADOS DIAGNÓSTICOS ESPECÍFICOS COMO 
INFECÇÕES E ATÉ NEOPLASIAS 
➢ SÃO MUITO ÚTEIS PARA EXAMES PREVENTIVOS (Ex.: 
DETECÇÃO PRECOCE DE CÂNCER DE COLO UTERINO) 
➢ REALIZAR O EXAME MICROSCÓPICO DE CÉLULAS 
ISOLADAS OU EM GRUPAMENTOS QUE PODEM SER 
PROVENIENTES DE LÍQUIDOS, SECREÇÕES, RASPADAS 
ESCOVADOS, PUNSÕES, LAVADOS, ETC. 
➢ EM ALGUNS CASOS, O PATOLOGISTA PODE TER A 
NECESSIDADE DE AMPLIAR O ESTUDO E SOLICITAR 
NOVOS MÉTODOS DE ESTUDO PARA UMA MAIOR 
ANÁLISE/MAIOR DEFINIÇÃO DIAGNÓSTICA 
IMUNO-HISTOLOGIA 
➢ EM ALGUNS CASOS O PATOLOGISTA PODE TER A 
NECEESSIDADE DE AMPLIAR O ESTUDO E SOLICITAR 
Patologia 
 
NOVOS MÉTODOS DE ESTUDO PARA UMA MAIOR 
ANÁLISE/DEFINIÇÃO DIAGNÓSTICA 
➢ DENTRE ESSES MÉTODOS ESTÁ A IMUNO-HISTOLOGIA, 
COMO POR EXEMPLO A IMUNO-HISTOQUÍMICA 
• SE UTILIZA ANTICORPOS COMO REAGENTES 
ESPECÍFICOS PARA DETECTAR ANTÍGENOS PRESENTES 
EM CÉLULAS OU TECIDOS 
• O PRODUTO DESSA REAÇÃO ANTÍGENO-ANTICORPO 
É EXAMINADO NO MICROSCÓPIO EM PREPARADOS 
HISTOPATOLÓGICOS OU CITOLÓGICOS 
• ALÉM DE ANTÍGENOS CELULARES E TECIDUAIS 
PRESENTES EM CONDIÇÕES NORMAIS OU 
PATOLÓGICAS, A IMUNO-HISTOQUÍMICA TAMBÉM 
PODE SER UTILIZADA PARA IDENTIFICAR ALGUNS 
MICRORGANISMOS 
• UM ANTÍGENO PODE SER RECONHECIDO PELA SUA 
LIGAÇÃO AO ANTICORPO SEGUIDA DA APLICAÇÃO DE 
UM SISTEMA DE DETECÇÃO COMO O SISTEMA 
IMUNO-ENZIMÁTICO NA IMUNO-HISTOQUÍMICA E A 
IMUNOFLUORESCÊNCIA QUE SERÁ ANALISADO AO 
MICROSCÓPIO DE FLUORESCÊNCIA 
• O MÉTODO PODE SER DIRETO, NO QUAL É 
UTILIZADO SOMENTO O ANTICORPO PRIMÁRIO, 
SENDO ELE OU DO ANTÍGENO QUE SE QUER 
DETECTAR (ESSE ANTICORPO PRIMÁRIO POSSUI UM 
MARCADOR) 
• MÉTODO INDIRETO – SE USA UM ANTICORPO 
SECUNDÁRIO QUE É DIRIGIDO CONTRA AS 
IMUNOGLOBULINAS DO ANTICORPO PRIMÁRIO E 
ESTE ANTICORPO SECUNDÁRIO ESTÁ MARCADO COM 
A SUBSTÂNCIA QUE PERMITE A VISUALIZAÇÃO DO 
COMPLEXO 
• O MÉTODO INDIRETO É MAIS SENSÍVEL QUE O 
MÉTODO DIRETO PORQUE HÁ MAIOR NÚMERO DE 
MOLÉCULAS DE MARCADOR POR CADA MOLÉCULA 
DE ANTÍGENO 
 
CULTURA CELULAR 
➢ MANUNTENÇÃO E MULTIPLICAÇÃO IN VITRO DE 
CÉLULAS VIVAS 
➢ CÉLULAS OBTIDAS DE DIFERENTES MANEIRAS SÃO 
MANTIDAS NO INTERIOR DE RECIPIENTES 
APROPRIADOS EM SUSPENSÃO OU ADERIDAS EM UMA 
SUPERFÍCIE SÓLIDA, FICANDO BANHADAS EM UM 
MEIO DE CULTURA 
➢ A PRINCIPAL UTILIDADE DOS ESTUDOS IN VITRO É A 
ANÁLISE DO METABOLISMO E DO COMPORTAMENTO 
CELULAR 
➢ UTILIZADA PRINCIPALMENTE PARA INVESTIGAÇÃO, 
MAS TAMBÉM PODE CONTRIBUIR NA ÁREA 
DIAGNÓSTICA E NA ÁREA CITOGENÉTICA 
CITOMETRIA DE FLUXO 
➢ É A MEDIDA DE UM COMPONENTE FÍSICO OU 
QUÍMICO DE UMA CÉLULA OU PARTÍCULA 
➢ O MÉTODO SE BASEIA NA LIGAÇÃO ESPECÍFICA DE 
UMA SUBSTÂNCIA A DETERMINADO COMPONENTE 
CELULAR O QUAL É POSTERIORMENTE CONHECIDO 
➢ AS PRINCIPAIS APLICAÇÕES DA CITOMETRIA DE FLUXO 
SÃO: IDENTIFICAÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE 
POPULAÇÕES CELULARES ESPECÍFICAS E FORNECER O 
CONTEÚDO DE VÁRIAS MOLÉCCULAS 
➢ É UMA IMPORTANTE FERRAMENTA E TEM APLICAÇÕES 
EM IMUNOLOGIA, BIOLOGIA MOLECULAR, 
BACTERIOLOGIA, VIROLOGIA E BIOLOGIA DO CÂNCER 
 
Patologia 
 
BIOLOGIA MOLECULAR 
➢ EMPREGA UM CONJUNTO CADA VEZ MAIOR DE 
TÉCNICAS ESPECIAIS PARA REALIZAR ANÁLISES 
GENÉTICAS, PARA ESTUDAR ÁCIDOS NUCLEICOS, 
GENES, PRODUTOS DE GENES, RECEPTORES, VIAS DE 
SINALIZAÇÃO, CICLO CELULAR E MUTAÇÕES 
➢ TENDO EM VISTA QUE ALGUMAS ALTERAÇÕES 
GENÉTICAS PODEM AUXILIAR NA DEFINIÇÃO 
DIAGNÓSTICA OU PODEM ESTAR ASSOCIADAS AO 
COMPORTAMENTO BIOLÓGICO DE DOENÇAS QUE 
ESTÁ RELACIONADA AO PROGNÓSTICO, OU AINDA SER 
IMPREDITORES DE RESPOSTAS OU RESISTÊNCIAS A 
TERAPIAS ESPECÍFICAS 
➢ A BIOLOGIA MOLECULAR TEM SE MOSTRADO 
FUNDAMENTAL PARA AO LADO DE MÉTODOS PARA 
ESTUDO DE ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS 
➢ DIFERENTES TÉCNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR: 
• HIBRIDIZAÇÃO MOLECULAR (SONDAS DE ÁCIDOS 
NUCLÉICOS) 
o NESSA TÉCNICA, A DUPLA HÉLICE DE DNA É 
DESFEITA PELO CALOR OU POR AGENTES QUÍMICOS 
(PROCESSO CHAMADO DESNATURAÇÃO) 
o PORÉM QUANDO O AGENTE DESNATURANTE É 
REMOVIDO OCORRE RENATURAÇÃO QUE É MUITO 
ESPECÍFICA, ASSIM, SOMENTE SEQUÊNCIAS 
EXAMENTE COMPLEMENTARES PODEM FORMAR 
HÉLICES DUPLAS LONGAS E ESTÁVEIS 
o UMA FITA SIMPLES DE DNA DESNATURADO PODE 
SE ASSOCIAR COM A FITA DA QUAL SE SEPAROU OU 
COM OUTRA DE SEQUÊNCIA COMPLEMENTAR 
PRODUZIDA NO MEIO, ESSA ÚLTIMA FORMA DE 
RENATURAÇÃO É CHAMADA DE HIBRIDIZAÇÃO E A 
SEQUÊNCIA IMPREGADA PRA RECONHECER O 
SEGMENTO PROCURADO É DENOMINADA SONDA 
• SEQUENCIAMENTO 
o CONHECER A SEQUÊNCIA DE NUCLEOTÍDEOS DA 
MOLÉCULA 
• ANÁLISE DE MICROARRANJOS DE DNA: 
NEOPLASIAS, DOENÇAS INFECCIOSAS E GENÉTICAS 
o EXISTEM SONDAS COMPLEMENTARES A TODAS AS 
REGIÕES CROMOSSÔMICAS SEJAM ELAS PARTE OU 
NÃO DE GENES COM FUNÇÕES CONHECIDAS 
o EXISTEM EQUIPAMENTOS QUE SÃO CAPAZES DE 
CRIAR SUPORTES SÓLIDOS COM MILHARES DE 
SONDAS E IMOBILIZADAS EM LOCAIS PRÉ 
DEFINIDOS 
o O PROCEDIMENTO CONSISTE EM APLICAR EM CADA 
UM DESSES PONTOS UMA PEQUENA LÍQUOTA DE 
ÁCIDO NUCLÉICO EXTRAÍDO DE UMA AMOSTRA 
QUE SE QUER ESTUDAR 
o HAVENDO HIBRIDIZAÇÃO, A SONDA EMITE LUZ 
FLUORESCENTE E ISSO É DETECTADO ATRAVÉS DE 
UM SCANNER QUE PERMITE COM QUE HAJA 
COMPARAÇÕES OU ANÁLISES ESTATÍSTICAS 
o É MUITO ÚTIL COMO MÉTODO DE RATREAMENTO 
EM AMOSTRAS SEMELHANTES 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
• REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE (PCR) 
o SE BASEIA NA REAÇÃO DE AMPLIFICAÇÃO IN VITRO 
DE SEQUÊNCIAS ESPECÍFICAS DE DNA 
o É UTILIZADA PARA DEMONSTRAR A PRESENÇA OU 
AUSÊNCIA DE DADO GENE PARA DETERMINAR 
MUTAÇÕES, AMPLIFICAÇÃO OU REARRANJO DE UM 
GENE, ASSIM COMO DNA DE VÍRUS, BACTÉRIA, 
MICRORGANISMO... 
o PARA AMPLICAÇÃO DE SEQUÊNCIAS DE RNA, ESSE 
DEVE SER CONVERTIDO EM DNA COMPLEMENTAR 
POR AÇÃO DE UMA TRANSCRIPTASE REVERSA, ISSO 
É NECESSÁRIO PORQUE A ENZIMA UTILIZADA NA 
REAÇÃO NÃO É CAPAZ DE UTILIZAR O RNA COMO 
MOLDE