Apostila Microbiologia

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Microbiologia
APOSTILA DE
FEITA PELA GABRIELLY VETORE
SUMÁRIO
História da microbiologia
Microbiologista 
Micro-organismos 
Classificação dos micro-organismos
Taxonomia Bacteriana 
Anatomia da bactéria 
Estruturas das bactérias 
Coloração de gram
Micobactérias
Esporogênese 
Crescimento Bacteriano 
Meios de cultura - Introdução
Meios de cultura - Estado físico
Meios de cultura - Aplicação
Preparo de um meio de cultura
Técnicas de semeadura 
Curva de multiplicação bacteriana
Contagem de bactérias totais: Métodos turbidimétricos
Contagem de bactérias totais: Método de contagem microscópica 
Contagem de bactérias viáveis em placas 
Contagem de bactérias viáveis em membrana filtrante
Contagem de bactérias viáveis: Atividade metabólica
Contagem de bactérias viáveis: Número mais provável
Introdução
Recombinação genética bacteriana 
Processos de transferência 
Introdução
Termos utilizados
Métodos físicos (Temperatura, filtração, dessecação, pressão osmótica e
radiação)
Métodos químicos (Fenol e compostos fenólicos, biguanidas poliméricas,
halogênios, álcool, metais pesados, agentes de superfície, compostos derivados
do amônio quaternário, conservantes químicos de alimentos e aldeídos)
Provas para confirmar a esterilização 
Introdução a microbiologia.....................................................................................1
Bactérias...............................................................................................................4
Métodos de contagem de micro-organismos .........................................................19
Genética Bacteriana ............................................................................................25
Controle do crescimento microbiano.....................................................................27
Exercícios............................................................................................................38
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Introdução a microbiologia
Bactérias, fungos (Bolores, leveduras), vírus, algas e protozoários.
-Microbiologia é o estudo dos micro-organismos e suas atividades:
Observou pequenos seres, solo, saliva... e os nomeou de “Animálculos”
Hoje em dia sabemos que um local sujo atrai esse tipo de animal, mas antigamente
acreditavam que os animais surgiam de roupas e restos de comida.
Potes abertos = Surgiram organismos vivos
Potes tampados = Não surgiram nada
A teoria foi abalada, já que era impossível não ter nascido nada em um dos potes,
segundo a abiogênese.
Não houve crescimento de bactérias
Após cortar o gargalo, as larvas surgiram no cal nutritivo.
Desse modo, a teoria da abiogênese foi refutada.
Diminuição de mortes por infecção pós-operatória 
-Em 1674 o alemão Antony Van Leeuwenhoek criou o primeiro microscópio.
-Com a descoberta de Antony, duas teorias controversas surgiram na época. 
1) Teoria da Abiogênese: Também é conhecida como teoria da geração espontânea, pois
acreditavam que a vida surgia de matéria inanimada.
-Aristóteles defendia essa teoria.
-Naquele tempo, diziam que ratos poderiam ser criados através de roupas sujas, por
exemplo.
-Primeira ideia contra a teoria (Francisco Redi): Pedaços de carne foram colocados em
potes de vidro tampado, e outros ficavam abertos por um tempo.
-Segunda ideia contra a teoria (Lazzaro Spallanzani): O oxigênio fazia os micro-
organismos se multiplicarem e com o frasco fechado não há como.
2) Teoria da Biogênese: Surgiu no final do século XVII
-Teoria oposta à da Abiogênese: Organismos vivos surgem de outros organismos vivos
-Louis Pasteur: Colocou caldo nutritivo dentro de balões de vidro e entortou o gargalo,
para que ficassem em formato de pescoço de cisne.
-Joseph Lister (1865): Criou um método de desinfecção do campo operatório e que
durante a cirurgia fosse vaporizado ácido fênico. 
-Teoria de Kock (1876): Micro-organismos são capazes de causar doenças.
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 1
A distribuição natural do micro-organismo.
As relações com outros seres vivos que causam benefícios, se são indiferentes ou
prejudiciais ao homem, animais ou plantas.
Alterações químicas e físicas que provocam no meio ambiente.
Pesquisa a fisiologia dos micro-organismos
Pesquisa a interação dos micro-organismos com os seres humanos e outros animais
Atua no desenvolvimento de medicamentos e vacinas para combater os micro-
organismos 
Micro-organismos na produção e conservação de alimentos
Criação de métodos para identificá-los no corpo humano e outros animais.
Sistemas e métodos de biossegurança
Combate e controle de micro-organismos no tratamento de água.
-Cientista que estuda os micro-organismos na área da Microbiologia.
-O profissional precisa saber sobre:
-Principais atividades:
-Outras atividades:
-ZOONOSES: Doenças que atacam tanto os humanos quanto os animais
O estudo da morfologia
Seus arranjos e reações aos processos de coloração. (Importante para o
reconhecimento de um micro-organismo específico nos exames)
Fisiologia
Metabolismo
Genética
A caracterização e identificação dos micro-organismos.
Podem ser encontrados em diferentes locais: Oceanos, plantas, locais do corpo
humano (intestino, pele, boca)
Dietas, antibióticos e sabonetes antibacterianos alteram os microbiomas.
-Possuem algumas particularidades 
-Na microbiologia básica é importante:
-Só podem ser vistos pelo microscópio, por serem muito pequenos.
-Microbioma: Coleção de micro-organismos que habitam um ambiente particular, criando
um ecossistema microscópico. 
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 2
Organismos PROCARIOTOS (Sem carioteca, núcleo)
Ácido nucleico DNA de fita dupla circular
Possui parede com peptidioglicano (Açucares e aminoácidos)
Organismos PROCARIOTOS
Possuem parede celular sem peptidioglicano 
Metanogênicas: Produtoras de gás metano (Pântanos e tubo digestivo de cupins e
herbívoros)
Termoacidófilas: Vivem em altas temperaturas (Fendas vulcânicas e fontes termais
ácidas)
Halófilas: Vivem em altas concentrações de sal
Organismos EUCARIOTOS (Possuem carioteca) 
Unicelulares: Leveduras.
Multicelulares: Bolores (Aspecto filamentoso) hifas 
Organismos Eucariotos (Com núcleo)
Realizam fotossíntese
Unicelulares ou multicelulares
Parede celular de celulose
São seres simples
Possuem ácido nucleico (DNA ou RNA) fita simples ou dupla
Possuem um invólucro proteico (Capsídeo) que protege o material genético
Conjunto: Ácido nucleico + Capsídeo = Núcleo capsídeo 
Alguns vírus possuem uma membrana lipídica chamada de envelope
Parasita intracelular obrigatório (Reprodução dentro de uma célula hospedeira)
Alguns cientistas consideram organismo vivo e outros consideram não vivo.
-Bactérias:
-Archaea: 
-Eucarya (Fungos)
*Micélio: Massa semelhante ao algodão
-Algas
-Vírus
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 3
Morfologia
Coloração
Estrutura
Nutrição
Metabolismo
Sensibilidade a antibióticos 
Parentesco entre as moléculas de DNA das amostras
O nome indica alguma característica do organismo: Forma, onde é encontrado, quais
nutrientes usa, quem descobriu ou que doença causa. 
EXEMPLO: S. aureus
EXEMPLO: Staphylococcus sp. 
EXEMPLO: Staphylococcus spp.
-Taxonomia é a ciência que lida com a classificação, identificação e descrição dos micro-
organismos.
-Características usadas para classificá-las:
-Taxonomia Lineana
 
-Em textos e artigos é obrigatório escrever o nome inteiro da primeira vez e nas outras o
gênero pode ser abreviado.
-Quando não se sabe a espécie da bactéria, usa-se o gênero mais a sigla sp.
-Quando for se referir a todas as espécies, usa-se o gênero mais a sigla spp. 
-Bactérias são organismos unicelulares, sem núcleo (Procariontes) e que não possuem
organelas membranosas em seu interior. 
-São conhecidas por causarem doenças aos animais e por serem utilizadas na fabricação
de alguns alimentos.
Bactérias
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 4
Arranjo dos cocos: Diplococos (2), tétrades (4), Sarcina (8), Streptococcus (Unidos como
uma cadeia), Staphylococcus (Agrupados como um cacho de uva).
Arranjo dosbacilos: Diplobacilos (Bacilos aos pares) e Estreptobacilos (Cadeia de
bacilos)
Espiroquetas ("Leptospira spp.", "Borrelia spp." e "Treponema spp.")
-Tamanho: Unicelulares, microscópicas (0,2 nanômetro x 1 a 8 nanômetros)
-Cor: Transparentes
Forma de classificação
-Cocos: São bactérias com formato oval ou esférico, que podem estar separadas ou
juntas. (Exemplo: "Staphylococcus") 
-Bacilos: São bactérias com formato de bastão ou cilíndrico. (Exemplos: "Escherichia",
"Bacillus" e "Clostridium")
-Espiraladas: Bactérias com o formato espiral.
5MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Helicoidais ("Helicobacter spp.")
Algumas são Pleomórficas: Variam de forma durante a vida (EXEMPLO:
"Corynebacterium sp.") 
-Vibriões: Apresenta o corpo semelhante a uma vírgula
-As bactérias são Monomórficas: Mesmo padrão durante todas as gerações, não mudam
de formato.
6MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Glicocálice
-FUNÇÃO: Responsável pela proteção e adesão a superfícies
-Polímero viscoso e gelatinoso localizado acima da parede celular
Cápsula: Estrutura bem organizada, bem aderida a superfície bacteriana, forma bem
definida (Proteção contra FAGOCITOSE e é um fator de virulência)
Camada Viscosa: Estrutura não organizada, adere fracamente a superfície da bactéria
Polissacarídeo extra celular: Estrutura não organizada, adere FIRMEMENTE a
superfície bacteriana.
Quando é a favor: Positiva
Quando é contra: Negativa
Monotríquias: Um flagelo
Lofotríquias: Vários flagelos em uma extremidade
Anfitríquias: Um flagelo em cada extremidade
Peritríquias: Rodeada de flagelos
Atríquias: Sem nenhum flagelo
FUNÇÃO: São responsáveis pela ADESÃO a superfície celular.
FUNÇÃO: responsável pela troca de material genético entre bactérias.
-Camada de açúcar constituída por polissacarídeos e polipeptídios
-Dependendo da organização da estrutura, recebe diferentes nomes:
IMPORTANTE: Bactérias capsuladas são altamente resistentes e geralmente causam
doenças letais.
Flagelo
-Estrutura semelhante a um chicote
-FUNÇÃO: Apêndice filamentoso responsável pela locomoção das bactérias em meio
líquido. Não importa quantos flagelos possuir, esse será seu único objetivo.
-Nem todas as bactérias possuem flagelos, ou seja, nem todas se locomovem
-Flagelina: Proteína encontrada no flagelo
-O movimento de nadar contra ou a favor de algo se chama TAXIA.
-Classificação das bactérias quanto ao flagelo:
Fímbrias – Cílios e Pili 
-Fímbrias: Localizadas na parede celular das bactérias.
-Pili: Nem toda célula possui, mas as que possuem podem ter de 1 a 2 pilis.
7MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Formada por dois tipos de açúcares (dissacarídeo) e por cadeias polipeptídicas
(cadeias longas de aminoácidos)
Parede celular 
-Estrutura resistente e semi-rígida, formada por proteínas e açucares. 
-Confere formato a bactéria 
-FUNÇÃO: Responsável por evitar a morte das bactérias por entrada excessiva de água
(Protege da lise osmótica)
-É o ponto de ancoragem do flagelo 
-Peptidioglicano: Estrutura fundamental da sua constituição (Confere rigidez a parede
celular)
Membrana citoplasmática
-Localiza-se abaixo da parede celular, envolvendo o citoplasma.
-FUNÇÃO: Faz o controle da troca de substâncias entre o meio interno e externo.
Citoplasma
-80% do citoplasma da bactéria é constituído de água.
-Os outros 20% são compostos de lipídeos, carboidratos, minerais e vitaminas.
-FUNÇÃO: Responsável por armazenar as substâncias químicas necessárias para manter a
manutenção da vida.
Material genético
-DNA genômico (Fita dupla, circular)
-As células procariontes não possuem núcleo, ou seja, o material genético fica no
citoplasma da célula. 
-Não possui as histonas
Plasmídeo
-Molécula de DNA de fita dupla, circular, pequena e separada do genoma 
-Replicação independente 
-FUNÇÃO: Proporciona resistência a antibióticos e metais pesados, além de ser
responsável pela produção de toxinas e pela síntese de enzimas. 
Ribossomos
-FUNÇÃO: Organelas que fazem a síntese de proteínas e enzimas fundamentais ao
organismo.
-Não possuem membrana e são formados por ácidos ribonucleicos (RNA)
8MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Corante primário: Violeta de Genciana (roxo)
Mordente (fixador da cor): Lugol
Lavagem álcool + Acetona + Água destilada 
Corante secundário: Safranina, Fucsina (Vermelho)
Flambar a lâmina que será utilizada na chama do bico de Bunsen
Identificar em que lado será feito o esfregaço 
Flambar a alça bacteriológica e colocar uma gota de solução salina assim que esfriar 
Flambar a água bacteriológica e deixar esfriar próximo da chama
Abrir a placa com o meio de cultura e retirar a amostra.
Esfregar o material na lâmina com movimentos circulares.
Fixar o esfregaço passando a lâmina (lado oposto do esfregaço) 5 vezes rapidamente
na chama do bico de bunsen 
Cobrir a lâmina com o corante primário e esperar 1 minuto 
Lavar com água destilada ou escorrer o corante
Cobrir a lâmina com o fixador de cor (lugol) e esperar 1 minuto
Escorrer o lugol ou lavar com água destilada 
Inclinar a lâmina e cotejar com álcool-acetona ou álcool absoluto. Em cerca de 30
segundos escorrer o álcool.
Cobrir a lâmina com o corante secundário e esperar 30 segundos
Lavar a lâmina em água destilada e secar sem esfregar.
Visualizar no microscópio
-Método criado pelo Hans Christian Gram em 1884
-O objetivo da coloração é permitir a visualização das bactérias e suas estruturas pelo
microscópio óptico.
-Através da coloração é possível identificar se a bactéria é gram-positiva ou gram-negativa.
-Materiais utilizados:
-Preparo do esfregaço:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
-Etapas da coloração de gram:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
-Se a bactéria corar em roxo, ela é gram-positiva.
-Se a bactéria corar em vermelho/rosa, ela é gram-negativa.
9MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Encosta na membrana plasmática
Mais fina embora tenha uma constituição resistente.
Não encosta na membrana plasmática
Bactérias gram positivas
-Parede celular espessa, embora seja simples e menos resistente
-Lisozima: Enzima presente em meios biológicos (lágrima, saliva, muco nasal, clara do
ovo) e no citoplasma de células fagocitárias. Destrói a parede celular de células gram
positivas, pois hidrolisa o peptidioglicano. 
-Desprovida da parede ela se transforma em PROTOPLASTO.
-Extremamente vulneráveis a variações de pressão osmótica.
-Penicilina: Antibiótico que combate infecções com bactérias gram positivas. Inibe a
síntese do peptidioglicano durante o crescimento bacteriano.
Bactérias gram-negativas 
-A parede celular é muito mais complexa
-Os lipopolissacarídeos são endotoxinas, estão envolvidos com febre e choque séptico
(75% é causado por LPS)
-Alguns antibióticos são menos ativos contra gram-negativas, pois é difícil penetrar nessa
camada complexa que fica externamente.
-Lisozima: Não é capaz de atingir as bactérias gram-negativas. Ela apenas destrói o
peptidioglicano, mas a bactéria continua rodeada de membrana externa com proteínas e
lipídeos.
Método usado para coloração é o de Ziehl-Neelsen.
Corar o esfregaço por fucsina a quente, para derreter a camada de lipídio da parede
celular.
Descorar com mistura de álcool (97%) e ácido clorídrico (3%)
Lavar com água e corar com azul de metileno
Bactérias que retêm a fucsina (BAAR) ficam vermelhas.
-Micobactérias são bactérias gram-positivas pertencentes ao gênero actinobactérias
bacilares, consideradas altamente patogênicas.
-São aeróbicas obrigatórias
-Não possuem membrana externa
-Possuem resistência a antibióticos típicos 
-São bactérias ácido-álcool resistentes (BAAR) por possuírem ácidos graxos no envelope.
-Método de Ziehl-Neelsen
10MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
São corpos metabolicamente ativos, resistentes ao calor e á oxidação, formados
dentro das células vegetativas de bactérias dos gêneros "Bacillus spp." e "Clostridium
spp.", quando o ambiente se torna desfavorável para sua sobrevivência.
O esporo se solta da bactéria, após perder água aos poucos.
Falta de nutrientes
Calor excessivo
Frio excessivoExposição à radiação UV
Antrax (Problema sério pulmonar)
Edema maligno, Carbúnculo sintomático, Grangrena gasosa, Hemoglobinúria bacilar,
Tétano e Botulismo.
-Formação de uma resistência denominada esporo ou endosporo
-Para que ocorra a esporogênese, é necessário:
-Doença causada pelos "Bacillus sp.":
-Doenças causadas por "Clostridium sp.":
Prevenir a transmissão de doenças e infecções.
Prevenir a contaminação e putrefação de alimentos.
Físicos: Temperatura, PH e pressão osmótica
Químicos: Nitrogênio, enxofre, fosforo e oxigênio.
Psicrófilas: Sobrevivem em temperaturas de -10ºC a 20ºC. 
Psicrotrófilas: Sobrevivem em temperaturas de 0ºC a 45ºC. Porém, 37ºC é a
temperatura ideal para sua multiplicação.
Mesófilas: Sobrevivem em temperaturas de 10ºC a 50ºC, mas o ideal é 37º para sua
multiplicação. Responsáveis pela deteriorização de alimentos e causam doenças.
-Multiplicação de micro-organismos
-O objetivo prático da microbiologia é controlar os micro-organismos, para utilizar ou
estimular aqueles com atividades úteis ou destruir os que são nocivos para a saúde.
-O conhecimento e a aplicação dos métodos utilizados são fundamentais para:
-Vários fatores podem tanto inibir quanto favorecer o crescimento microbiano:
Fatores físicos
-Temperatura: De 0ºC até 70ºC é o ideal para se multiplicarem e acima de 80ºC as
bactérias são inativadas.
EXEMPLO: Pseudomonas
EXEMPLO: Listeria monocytogenes
11MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Termófilas: Se multiplicam em 40ºC a 70ºC.
Hipertemófilas: Se multiplicam em temperaturas de 65ºC a 110ºC. Encontradas em
fendas vulcânicas.
Podemos conservar alimentos em PH ácido: Pepino, cebolinha, azeitona...
A perda de água por osmose causa a PLASMÓLISE ou diminuição da membrana
plasmática da célula.
Inibição do crescimento quando a membrana se separa da parede.
Sendo assim, a adição de sais em uma solução, pode ser utilizada na preservação de
alimentos. A adição de açúcar em alimentos também.
Heterotróficas: Precisam de nutrientes para seu crescimento, pois não produzem seu
próprio alimento. Retiram de outros seres, causando doenças, ou retiram através de
mutualismo.
Autotróficas: Fabricam seu próprio alimento pela fotossíntese ou quimiossíntese. 
-PH: O PH ácido inibe o crescimento bacteriano, as bactérias gostam de PH neutro para se
multiplicarem.
-Pressão osmótica: Os micro-organismos retiram da água a maioria dos seus nutrientes
solúveis.
-Micro-organismos Halófilos: Necessitam de sal em uma concentração moderada para
seu crescimento. (Organismos nos mares)
-Micro-organismos halófilos extremos: Necessitam de sal em altas concentrações para
se desenvolverem. Encontrados no Mar morto e nas salinas.
-Micro-organismos halotolerantes: Não necessitam do sal, mas toleram uma baixa
quantidade de sal no meio.
-Micro-organismos não halófilos: Não toleram o sal, portanto não se multiplicam.
Fatores químicos
-Bactérias podem ser heterotróficas ou autotróficas:
-Todos os organismos precisam de nutrientes para o seu crescimento e para a sua
reprodução, e compartilham de algumas necessidades em comum.
-Carbono: Componente estrutural de todos os seres vivos, aproximadamente 50% do peso
seco. 
-Nitrogênio: 14% do peso seco da bactéria, fundamental para a síntese de aminoácidos,
proteínas e nucleotídeos.
-Enxofre: Mais ou menos 4% do peso seco da bactéria, também importante para a síntese
de aminoácidos, proteínas e vitaminas. 
-Fósforo: Mais ou menos 4% do peso seco, importante para a síntese de ácidos nucleicos e
fosfolipídeos de membranas.
-Oxigênio: Importante para o processo de respiração celular, aeróbica. 
12MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Durante a respiração são gerados radicais tóxicos, como radicais livres derivados do
oxigênio: Ânions, superóxidos, íons hidroxila e peróxido de hidrogênio. 
As bactérias que sobrevivem na presença de 02 possuem enzimas que inativam os
radicais livres liberados do oxigênio.
EXEMPLO: Escherichia coli
Oxigênio
-Porque existe essa divisão entre bactérias anaeróbicas e aeróbicas:
-Bactérias aeróbicas estritas: Sem oxigênio elas não se multiplicam.
-Bactérias anaeróbicas facultativas: Sobrevivem tanto na presença como na ausência de
oxigênio. 
-Bactérias anaeróbicas estritas: Só sobrevive na ausência de oxigênio
-Bactérias anaeróbicas aerotolerantes: Necessitam de baixa taxa de oxigênio
-Bactérias microaerófilas: Necessitam de muito pouco oxigênio para sobreviverem
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
São meios sintéticos de uso laboratorial
Meios com crescimento de micro-organismos são denominados de culturas 
Possui condições ideais para o crescimento microbiano (Nutrientes, PH, água e
oxigênio)
Placas de pétri
Tubos de vidro com tampa de rosca
Polissacarídeo complexo
Provém de algas marinhas ("Gelidium sp.")
Gel = Sólido (abaixo de 40ºC)
Líquido (Acima de 40ºC)
Material altamente resistente (Suporta altas temperaturas = Fervura e autoclavação)
-Material nutritivo cujo objetivo é possibilitar o crescimento microbiano
-Bactérias podem ser cultivadas em: 
-Ocorre o aumento do número de bactérias, jamais o aumento do tamanho da bactéria 
-Bactérias podem se multiplicar em substratos líquidos e sólidos
-Utiliza-se em alguns meios de cultura o AGAR: 
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-Meios de cultura classificados pelo seu estado físico:
1) Sólido
-Quando contêm agentes solidificantes como o AGAR
-Utilizados para visualização de colônias 
-Concentração maior que 15mg/1000ml 
2) Semi sólido 
-Quantidade de AGAR é pequena, dando uma consistência intermediária de modo a
permitir o crescimento microbiano em concentrações variáveis de oxigênio.
-Também usado para a verificação de motilidade (Presença de flagelos)
-Concentração menor que 15mg/1000ml 
3) Líquidos (Caldos)
-Quando não possuem agentes solidificantes, apresentando-se de forma líquida 
-Utilizados para o enriquecimento das culturas 
-Repiques de micro-organismos 
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 14
Glicose – 5g
Cloreto de sódio – 0,05g 
Fosfato monobásico – 1,0g 
Sulfato de magnésio – 2,0g
H2O – 1L
Organismos exigentes
Dependem de nutrientes específicos 
EXEMPLO: "Lactobacillus spp"
Bactérias aeróbicas 
Bactérias anaeróbicas
-Meios de cultura em relação a sua aplicação:
1) Meio quimicamente definido 
-Aquele em que a procedência dos constituintes é conhecida e a composição química
exata é conhecida.
-EXEMPLO: 
2) Meio complexo
-Meio cuja composição química não é definida, compostos de nutrientes com extratos de
leveduras, de carne, de vegetais, produtos de digestão proteica, sangue e outros.
-A composição química exata pode conter pequenas variações em diferentes culturas no
produto.
-Bactérias fastidiosas: Não crescem em caldo simples, apenas em caldos complexos
-EXEMPLOS: Meio cérebro infusão, meio extrato de levedura e meio fígado coração
-Todo meio complexo líquido é denominado: CALDO NUTRIENTE 
-Todo meio complexo sólido é denominado: ÁGAR NUTRIENTE 
-O meio complexo pode ser utilizado para cultivar:
-Para bactérias anaeróbicas estritas usamos a jarra de anaerobiose: Substâncias
químicas consomem todo o oxigênio de dentro da jarra, para que as bactérias possam
crescer dentro da estufa.
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 15
3) Meio seletivo
-Contêm substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de micro-
organismos, permitindo o crescimento de outros.
-Seleciona o crescimento da bactéria de interesse 
-EXEMPLO: "Escherichia coli"
-Ágar MacConkey inibe o crescimento de bactérias gram positivas.
Staphylococcus aureus cultivado neste meio apresente colônias lisas, brilhantes e
negras
4) Meio diferencial
-Contêm substâncias que permitem estabelecer diferenças entre bactérias parecidas
-Utilizado para a fácil identificação da colônia da bactéria de interesse quando existem
outras bactérias crescendo na mesma placa de meio de cultura.
-Identifica a bactéria através da forma da colônia ou da cor da colônia em crescimento 
-EXEMPLO: Meio de Baird Parker 
5) Meio de enriquecimento
-Crescimento de bactériasem número muito pequeno em uma amostra. É suplementado
com nutrientes específicos para o micro-organismo que se deseja pesquisar. Geralmente
é um meio líquido.
-EXEMPLO: Caldo Fraser de enriquecimento para Listeria
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 16
Calcular numa balança a quantidade de pó de ágar indicado pelo fabricante.
Calcular a quantidade de água destilada que vai ser utilizada.
Juntar a água destilada com o ágar.
Ajustar o PH da cultura 
Aquecer o meio até que todo o ágar se dissolva.
Esterilizar o meio de cultura na autoclave e deixar que esfrie.
Colocar nas placas de pétri e deixar que solidifique 
-Etapas do preparo:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Transferir uma alçada da cultura para o meio sólido em placa e estriar com a alça
bacteriológica sobre o meio.
Dividir a placa em 4 quadrantes 
Estriar em metade da placa, com movimentos de zig-zag
Quando atingir a metade, girar a placa 90º e estriar até a metade (1/4 da placa), girar
mais 90º e estriar o meio restante.
-São métodos pelos quais se transfere inóculos bacterianos de um meio de cultura ou
material a ser analisado (secreções, alimentos) para um outro meio de cultura.
-Para garantir que apenas o micro-organismo desejado seja semeado, são utilizadas
técnicas assépticas 
1) Semeaduras em meios sólidos em placas de pétri 
-Esgotamento em estrias ou estrias múltiplas 
2) Semeadura em meios líquidos 
-Uma alçada da colônia (Agar em placa) ou da cultura (De outro meio ou líquido) é
introduzida no meio líquido, com agitação da alça, para maior difusão dos micro-
organismos (Da alça para o meio e homogeneização no meio)
-Objetivo: É um repique genérico para crescimento bacteriano em meio líquido
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 17
Taxa de crescimento = Zero
Acúmulo de metabólicos tóxicos, falta de substrato ou falta de espaço
Produção de esporos
Taxa de nascimento é igual a taxa de morte, o que estaciona o gráfico.
Zero nutrientes, PH muito ácido
Morte da forma vegetativa bactéria, mas sobrevivem os esporos
O número de células morrendo é maior do que a de células nascendo
As células que formam esporos sobreviverão mais tempo do que aquelas que não
formam
3- Estacionária: Param de se multiplicar
4- Declínio: Começam a morrer
18MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES
Não há divisão celular
Período de incubação – Doenças
Alta taxa de atividade metabólica
Velocidade de duplicação característica para cada espécie
Taxa de crescimento populacional constante
-O crescimento é representado por uma curva: Realiza a contagem da população em
intervalos após números pequenos em meio líquido.
-É a representação gráfica do crescimento de uma determinada bactéria em um
determinado meio de cultura 
1- Fase lag/latente: fase na qual as bactérias estão se adaptando ao meio.
2- Fase log: Fase na qual elas se multiplicam
Colocar numa série de 10 tubos de diâmetro uniforme quantidades crescentes (0,1ml;
0,2ml; 0,3ml) de uma solução a 1% de cloreto de bário.
Completar os volumes para 10ml com uma solução a 1% de ácido sulfúrico
Obtendo assim uma turvação crescente devido a diferentes concentrações de sulfato
de bário. Desse modo, estão prontos para o uso.
Medida da turvação por comparação com escala padrão - Método de contagem
indireto.
-A turvação da amostra bacteriana é comparada visualmente com padrões.
-Os tubos podem ser preparados ou comprados (mais comum na rotina)
-Como preparar os tubos no laboratório:
1.
2.
3.
-Técnicas usadas para análises de endotoxinas.
Medida direta da turvação - Método de contagem indireto.
-A turvação da amostra bacteriana é determinada espectrofotometricamente 
-Avaliação rápida da concentração celular.
-É utilizado um feixe de luz em uma suspensão microbiana, sendo uma parte da luz
desviada (Dispersão/absorbância) e uma parte não desviada (Transmitância).
-A luz que atravessa depende da quantidade e tamanho das células presentes na
suspensão, do comprimento da onda e da intensidade da luz.
-Quanto maior a quantidade de bactérias: Maior a dispersão e menor a transmitância.
Métodos de contagem
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 19
DE MICRO-ORGANISMOS
EXEMPLO: Se a turvação for parecida com o tubo de número 5, tem-se a estimativa de
1500 (1,5 x 10^9) de bactérias por ml na sua amostra, de acordo com a tabela.
Métodos de contagem indireto
Contam células vivas e mortas
Mais adequado para amostras líquidas 
Resultado impreciso 
População deve ser elevada
Rápidos resultados
Resultado depende do operador (Método por comparação)
População deve ser elevada = >10^4 - 10^5 bactérias/ml (Medida direta da turvação)
-São usados como parâmetros, para ver o número de bactérias no seu tubo.
-Como comparar: Observar sua amostra e comparar o nível de turvação em relação aos
tubos que estão na imagem abaixo.
-Principais características desses métodos:
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 20
Contagem de células vivas e células mortas, sem diferenciação.
Resultados podem ser influenciados pelo executor.
Contagem direta ou microscópica - Avaliação direta
-Método de contagem direto.
-Mais adequado para amostras líquidas e para bactérias que não possuem flagelo.
-Células isoladas são observadas com mais facilidade.
-Vantagem desse método: Rapidez 
-Desvantagens: 
-Observação em microscópio: O número de células é determinado matematicamente
(Fazendo uma média) de acordo com as bactérias observadas em um quadrado grande.
 9ml de salina é colocado em uma série de tubos (9ml cada um)
 1ml da amostra é colocada no primeiro tubo (Diluição em 10 vezes)
 1ml do primeiro tubo é colocada no segundo tubo (Diluição em 100 vezes)
 E assim por diante...
 Cada tubo deve ser semeada em uma placa e encubada em 37ºC
 Observar quantas colônias cresceram em cada placa
 A partir da quarta placa já é possível ser realizada a contagem
-Método de contagem direto.
-Contagem de bactérias por ml 
-Deve ser realizada uma diluição seriada da amostra para que possa ser feita a contagem
-EXEMPLO: É permitido X bactérias por ml de leite. Uma amostra é coletada e diluída.
-Etapas da diluição seriada:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Utiliza-se câmaras de contagem especiais (EXEMPLO: Petroff-Hauser)
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 21
Adição do inóculo a superfície do meio de cultura sólido. 
Espalhamento do inóculo na superfície com uma alça de Drigalsky e após a incubação
observar as colônias crescidas.
Inóculo de 0,1 a 0,5 ml
Possibilita o uso de “Meios opacos”
Não existe choque térmico devido ao meio de cultura
-Métodos de espalhar as diluições nas placas de petri:
-Técnica de espalhamento na superfície: 
1.
2.
Adição do inóculo ao fundo da placa vazia estéril. 
Adição do meio de cultura fundido, líquido. 
Homogeneização do inóculo com o meio através de movimentos suaves. 
Após incubação, observa-se colônias crescidas tanto na superfície como no interior do
ágar solidificado.
-Técnica de Espalhamento em profundidade: 
1.
2.
3.
4.
-Método de contagem direto.
-Permite análise de grandes volumes
-O frasco de amostra é despejado em um filtro de membrana e o filtrado estéril cai em um
tubo a vácuo, o que não passar é depositado na placa de pétri para observar as colônias
depois de 24 horas encubado na estufa.
-Baseia-se na filtração de volumes adequados da amostra diluída
-Membrana com porosidade 0,45 nanômetro 
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 22
Reagentes + Cultura (ATP) = Bioluminescência (Dosagem de luz emitida proporcional ao
número de bactérias)
Vitamina + Cultura = Crescimento (Biomassa)
Carboidrato + Cultura = Fermentação (Dosagem de ácidos)
-Método de contagem indireto.
-Considera que a quantidade de um produto metabólico (Exemplo: CO2 e ácidos) pode ser
uma relação direta com o número de células.
-Contam somente células vivas metabolicamente 
-Aplicações bastante específicas
Tubo roxo = Positivo para crescimento microbiano
Tubo amarelo = Negativo para crescimento microbiano
Coletar a amostra 
Preparar os tubos para a diluição (3 séries de 5 tubos com solução nutriente em
quantidades diferentes = Uma com 10ml,outra com 1ml e outra com o,1ml)
-Método de contagem direto.
-Técnica utilizada para estimar a população total ou de um grupo específico de micro-
organismos.
-Conjunto de respostas positivas e negativas, para o cálculo final.
-Etapas a serem seguidas:
 -As bactérias maiores ficarão retidas na membrana sendo transferida para a placa de pétri
em meio seletivo ou diferencial
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 23
Inocular o meio (10ml de amostra em cada tubo, para a diluição)
Colocar na incubadora 
Contar os resultados positivos e negativos de acordo com a cor final dos tubos (No início
possuem a mesma cor)
Observar os números positivos de cada série de tubos e comparar com os números da
tabela específica.
Contam células vivas
É um método de contagem estatístico 
É um método TRABALHOSO
É um método DISPENDIOSO
É um método muito útil para bactérias
estressadas (Alimentos: Refrigerados,
congelados, com alta acidez...)
-Principais características desse método:
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 24
Replicação conservativa: As duas cadeias da molécula separam-se e cada uma serve
de molde para a síntese de uma nova cadeia. Cada célula filha na divisão binária
recebe um novo DNA.
Replicam-se automaticamente, menores que o DNA cromossômico.
-Cromossomo: é organela celular presente no citoplasma, única, circular, composta de
DNA de cadeia dupla, forma enovelada e compacta.
-Plasmídeo: Moléculas de DNA extra cromossômica, circulares fechadas, fita dupla,
altamente compacta.
Genética bacteriana
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 25
Podem ser causadas por: Erros de cópia durante a divisão e exposição a radiação
ultravioleta ou ionizante, mutagênicos químicos. 
Se integrar ao cromossomo da bactéria 
Persistir como um elemento citoplasmático autônomo
-Mutação: Qualquer alteração brusca que ocorre ao acaso na sequência de nucleotídeos
da molécula do DNA cromossômico e pode ser transmitida aos seus descendentes.
-Transferência de material genético: Os genes podem ser transferidos e podem:
Algumas bactérias são capazes de incorporar esse material genético para o seu
genoma e passam a exibir o fenótipo (Características) da “Doadora”
Essas bactérias são chamadas de transformadas, pois ficam com a constituição
genética modificada.
-Os processos de transferência são responsáveis pela variabilidade genética.
a) Transformação: Lise de determinado micro-organismo com liberação de seu material
genético para o meio.
Ocorre através de microscópicos tubos proteicos, chamados pontes citoplasmáticas, o
pili sexual. 
O fragmento de DNA transferido se recombina com o cromossomo da bactéria
receptora, produzindo novas misturas genéticas, que serão transmitidas às células
filhas na próxima divisão celular.
Resumindo: Através do pili sexual ela passa uma fita do material genético do
plasmídeo para a outra bactéria, e ambas ficam iguais. 
b) Conjugação: Pedaços de DNA passam diretamente de uma bactéria doadora para uma
receptora.
Ao infectar outra bactéria, o vírus que leva DNA bacteriano o transfere junto ao seu.
Se a bactéria sobreviver a infecção viral, pode passar a incluir os genes de outra
bactéria em seu genoma.
c) Transdução (Bacteriófago – Um vírus que só parasita bactérias): Moléculas de DNA
transferidas entre bactérias usando vírus como vetores. 
Cientistas usam a transformação como técnica de Engenharia Genética, para
introduzir genes de diferentes espécies em células bacterianas. EXEMPLO: Insulina
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 26
Controle do crescimento
MICROBIANO
Manter o bem-estar da humanidade
Prevenir a transmissão de doenças 
Evitar a decomposição de alimentos 
Evitar a contaminação da água e do ambiente.
-Por que controlar o crescimento microbiano?
-Esse controle só é possível através de dois métodos: Físicos e Químicos, que possuem
propriedades de inativar a célula microbiana ou de impedir a sua reprodução.
Antissépticos: Menos tóxicos que os desinfetantes.
Passar o algodão com álcool na pele antes de uma injeção.
-Alguns termos são utilizados para descrever os processos físicos e agentes químicos
destinados ao controle de micro-organismos:
-Esterilização: Destruição de todas as formas de vida microbiana, incluindo os
endosporos.
-Esterilização comercial: Tratamento de calor suficiente para matar os endosporos
Clostridium botulinum nos alimentos enlatados.
-Desinfecção: Destruição dos patógenos vegetativos (Não elimina formas de resistência –
endosporos) em objetos inanimados.
-Antissepsia: É a destruição dos patógenos vegetativos na superfície de tecidos vivos.
-Degerminação: É a remoção mecânica de patógenos de área limitada.
-Sanitização: Tratamento destinado a reduzir as contagens microbianas nos utensílios
alimentares até níveis seguros a saúde pública. Elimina formas vegetativa
-Métodos físicos: Temperatura (Calor seco, calor úmido e frio), radiação, filtração.
Dessecação, remoção de oxigênio e Vibração ultrassônica.
Forno Pasteur, Incineração e Flambagem
-Menor poder de penetração que o calor úmido, utilizando tempo e temperatura maiores.
a) Forno de Pasteur: Utiliza o calor seco a 180ºC/60min ou 160ºC/2hrs 
-Muito utilizado em vidrarias.
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 27
b) Incineração: Combustão completa para descontaminação de material hospitalar de
uso descartável (Luvas, material plástico) além de lixo contaminado (>1000ºC)
c) Flambagem: Combustão completa dos micro-organismos em alças e agulhas
microbiológicas, esterilizando-as 
-Aquecimento ao rubro na chama do bico de Bunsen (30 a 600ºC)
-Fervura, autoclavação, tindalização, pasteurização.
a) Fervura: Colocar o material dentro da água e promover a fervura a 100ºC durante um
certo tempo. 
-Utiliza do calor na forma de vapor
-Destrói apenas formas vegetativas (Não destrói esporos)
-Exemplo: 100ºC/20min (material cirúrgico)
b) Autoclavação: Sistema fechado no qual ocorre o aquecimento da água de evaporação,
por meio de uma serpentina.
-A 121ºC cria-se uma pressão de 15 libras (1 atm)
-Morte de toda forma de vida existente no material.
-Calor na forma de vapor de água sob pressão.
-Destrói formas vegetativas e esporuladas de procariotos e fungos, promovendo a
esterilização.
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 28
c) Tindalização: Denominada esterilização fracionada ou intermitente
-Utiliza o calor na forma de vapor d’água livre.
-Destrói formas vegetativas e esporuladas.
-O método utiliza água de 60ºC a 90ºC, durante 30 a 60 minutos, por repetidas vezes
resfriando-se entre cada aquecimento.
-Geralmente é aquecido de 3 a 12 vezes.
-Usa-se na esterilização de meios de cultura que, por exemplo, contenham açúcares ou
gelatina.
-Este método permite que os esporos germinem entre duas exposições, morrendo no
aquecimento seguinte.
-Vantagem: Podem ser mantidos praticamente todos os nutrientes e as qualidades
sensoriais do produto, em proporções maiores do que quando se utilizam outros
tratamentos térmicos.
d) Pasteurização: Método muito utilizado nas indústrias de alimentos no preparo do leite,
cremes etc. Só podem ser submetidos ao calor em condições controladas para não
desnaturar os nutrientes.
-Preparo de meios para cultivo de micro-organismos, vidrarias.
-134ºC/4-5 min. 2 atm
-Autoclavação destrói todos os esporos e toda forma vegetativa.
-Não pode abrir a autoclave enquanto ela estiver quente, deve esperar esfriar
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 29
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 30
Destrói todas as bactérias patogênicas e reduz a contagem de bactérias não
patogênicas.
Por exemplo, a bactéria que transmite a tuberculose é inativada.
Utilizado na esterilização do leite de caixinha 
Não fica nenhum micro-organismo vivo 
-Ocorre uma redução no número de populações microbianas pela exposição breve a uma
temperatura relativamente alta.
-Nem todas as formas vegetativas são destruídas.
-Existem dois tipos de pasteurização de leite:
1) Alta temperatura (HTST) – 72ºC a 75ºC por 15 a 20 segundos. 
2) Baixa temperatura (LTLT) – 62ºC a 65ºC por 30 minutos
3) Ultra temperatura(UHT) – 140C a 150ºC por 2 a 4 segundos.
Bacteriostático: Promove a interrupção da divisão microbiana 
Bactericida: Promove “Morte” das bactérias
a) Refrigeração (2,3 a 8ºC)
-Diminui a velocidade de multiplicação bacteriana 
-Não impede a divisão, somente inibe
-Principalmente das mesófilas 
-Não inibe a divisão de bactérias Psicrófilas e psicrotróficas 
-Utilizamos a refrigeração para conservar alimentos, medicamentos, vacinas e meios de
cultura 
-Refrigeração não impede proliferação de fungos 
b) Congelamento (-10ºC a -20ºC)
-Inibe/interrompe o crescimento bacteriano
-Não pode ser considerado um bom método de inativação de bactérias, mas sim um bom
método bacteriostático.
c) Congelamento a -80ºC
-Se for bem-feito, pode manter o micro-organismo por mais de 30 anos e garantir que
permaneçam inalterados e sem contaminação.
d) Congelamento a -145ºC (Nitrogênio líquido) 
-Guardamos células tronco, sêmen, células em geral, óvulos fecundados.
-Normalmente ficam em meios de cultura que são ricos em nutrientes
-Com a possibilidade de o congelamento prejudicar as células, produtos químicos devem
ser empregados para diminuir os possíveis danos. (Cristais de água que furam a
membrana plasmática)
-Agentes crio protetores: Dimetil sulfóxido (DMSO) ou glicerol que evitam a formação de
cristais na água congelada.
-É uma separação mecânica de partículas de um fluido devido sua passagem através de
um material poroso/fibroso ou granular (Um filtro)
-As partículas são separadas em base de seu tamanho e forma, utilizando pressão e
membranas especialmente desenhadas para o processo. (Filtros diferentes)
1) Filtros: Acetato de celulose ou nitrocelulose 
2) Tela: Diâmetro dos poros (o,22 micra para retenção de bactérias e 0,01 micra para
proteínas grandes e alguns vírus)
-Utilizado também para filtrar soluções, medicamentos e vacinas 
-Não é considerado um método de esterilização, pois não inativa microorganismos,
apenas os retém. 
Etapas da liofinilização:
-A dessecação é a remoção da água
-A liofilização deve ser realizada a vácuo, pois as bactérias são facilmente lesionadas pela
dessecação.
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 31
-Congelamento e submissão a alto vácuo = A água passa do estado sólido para o vapor
(Sublimação)
-Micro-organismos são estocados em ampolas escuras e lacradas.
-Adição de solutos (Sal e açúcar) em determinado solvente 
-Com a saída de água a membrana plasmática irá murchar – Plasmólise 
-A perda total da água inibe a atividade metabólica
Feixes de elétrons com alto poder de penetração. Exemplo: Raio X ou radiação gama.
Causa destruição total do material genético das bactérias
O material que se esteriliza não sofre danos físicos ou outro
1) Força ionizante
-Método de esterilização que utiliza baixa temperatura, podendo ser utilizados em
materiais termo sensíveis.
-Os alimentos que foram irradiados duram muito mais do que os que não foram.
-Vantagens: Alto poder de penetração, atravessa embalagens de papelão, plástico ou
papel.
-Desvantagens: Maior custo e necessidade de pessoal especializado
2) Força não ionizante 
-Tem feixes de eletros com baixo poder de penetração. Exemplo: Radiação Ultravioleta
-Causa mutação no DNA das bactérias 
-Utilizadas para esterilização de superfícies e ambientes assépticos 
Tecidos vivos
Objetos inanimados (São bactericidas)
Bactérias, fungos, vírus, protozoários e esporos
Período mínimo de 30 minutos
1) Utilizados em superfícies de: 
2) Utilizados contra todas as formas de vida:
-São substâncias químicas de origem natural ou sintética usadas para eliminar ou inibir o
crescimento dos microrganismos.
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 32
A retirada prévia de sujidades melhora a ação dos desinfetantes 
-A resposta dos microrganismos aos agentes químicos varia em relação a fatores tais
como pH, temperatura, presença de matéria orgânica, fase de multiplicação e mesmo
presença de outros agente químicos.
Fatores que dificultam a atuação dos agentes químicos:
1) Natureza dos microorganismos a serem desinfetados (Presença de endosporos são
mais resistentes)
2) Número da população alvo: Quanto maior o número de microorganismos maior o tempo
necessário.
3) Espécies bacterianas resistentes (Exemplo: Pseudomonas aeruginosa)
4) Temperatura de exposição: Altas temperaturas resultam em maior eficiência.
5) Presença de matéria orgânica: Sangue, pus, saliva, urina, fezes...
-Compostos fenólicos: Derivados do fenol 
Menor poder de irritação da pele e menor odor desagradável.
Cresol (creolina): Usada para desinfecção de superfícies 
Hexaclorofeno (Sabões, sabonetes, xampus): Utilizados nos ambientes hospitalares,
escovação das mãos antes de procedimentos cirúrgicos.
Eficaz contra bactérias gram positivas
-É um ácido carbólico
-É obtido através da hulha (Carvão mineral)
-Por possuir propriedades fungicidas e bactericidas, foi muito utilizado como antisséptico
durante o século XIX.
-Efeitos irritantes na pele e odor desagradável
-Hoje encontramos fenol na composição de algumas pastilhas para garganta (Efeito
microbiocida e anestésico)
-Clorexidina: Sabonete, xampu
-Antisséptico químico com ação antifúngica e bactericida 
-Elimina bactérias gram positivas e gram negativas.
• Possui também ação bacteriostática inibindo proliferação bacteriana
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 33
Iodo ou tintura de iodo etílico
A utilização era limitada, porque o antisséptico não possuía estabilidade, manchava,
além de causar irritações na pele e mucosas.
Toxidade aos tecidos humanos diminuiu
Substância eficiente para matar qualquer tipo de micro-organismo 
Utilizado na escovação de mãos (Pré-cirurgia)
Ação pouco irritante e não mancha 
Inativa esporos, microbicida de amplo espectro para bactérias gram-positivas e gram-
negativas, fungos, micobacterias, clamídias, vírus e protozoários.
Efeito bactericida, viricida e fungicida 
Encontrado nas formas de: Hipoclorito de cálcio e de sódio.
Hipoclorito de cálcio: Lavagens de equipamentos de laticínios
Hipoclorito de sódio: Desinfetante doméstico, alvejante, equipamentos de
hemodiálise 
-Iodo (Bactericida, viricida, fungicida, esporicida.): Age contra bactérias Gram positivas e
Gram negativas 
-Tintura de iodo (Iodo + Álcool): Utilizado como antisséptico de superfícies e
degerminante. 
-A aplicação clínica era sob a forma de:
-Foi após o desenvolvimento dos iodóforos, iodo ligado a macromoléculas, que seu uso
começou em larga escala.
-Iodofor (Solubilizante + Iodo) POVENIDE (PVP12)
-Cloro (Ácido hipocloroso)
 
Álcool absoluto é 98%
Álcool mais eficiente é o 70% (Poder de desnaturação proteica e solubilização de lipídeos
– Inclusive de vírus envelopado) – Volátil e barato
O gel retém moléculas de álcool, com a volatidade reduzida, possibilita maior tempo de
ação
Adesão do gel nas mãos, prolonga ação do álcool
-Substância bactericida, viricida (Mata vírus envelopado), fungicida e não esporicida.
-Isopropanol (C3H8O) utilizado para limpeza de computadores 
-Etanol (CH3CH2OH). Álcool etílico ou álcool
-Como antisséptico das mãos o álcool em gel apresenta determinadas vantagens sobre o
líquido:
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 34
O gel protege a pele do ressecamento promovido pelo álcool líquido 
O gel é menos inflamável, evitando acidentes com queimaduras 
Mais fácil no acondicionamento, na medida que o gel vaza facilmente 
Os íons do metal se combinam com os grupos sulfidrila (SH) das proteínas celulares e
ocorre a desnaturação.
Na forma de colírio ou pomada oftálmica (1%) (Pomadas: Nitrato de prata +
Sulfadiazina usado em queimaduras profundas – Antibiótico bacteriostático)
Curativos impregnados com prata demonstram serem úteis quando há problemas com
bactérias resistentes a antibióticos. 
Tem a história mais longa de uso como desinfetantes 
Efeito bacteriostático 
Seu uso é limitado devido sua toxicidade, poder irritante da pele e ineficácia em
contato com a matéria orgânica.
Usado domesticamente
Timerosal (Merthiolate): Contém 49% de mercúrio 
Hoje a nova fórmulado Merthiolate apresenta: Digluconato de clorexidina 
Mercúrio cromo: Faltam algumas enzimas para seu fígado metabolizar e neutralizar
os efeitos tóxicos deste medicamento.
Aspirina e voltarem: São muito sensíveis a anti-inflamatórios, podendo leva-los a
morte por destruição dos glóbulos vermelhos, em especial o paracetamol.
Tratamento da água: Efeito algicida e fungicida
Sulfato de cobre: Usado para inibir algas verdes (Algicida)
Hidroxiquinolina de cobre: Utilizado em tintas para prevenir mofo
Cloreto de zinco: Soluções de bochecho (Listerine)
Sulfeto de zinco: Colocado em tintas de portas e paredes para matar fungos
Óxido de zinco: Ação antisséptica, secativa e anti-inflamatória. (Minâncora)
-Prata, mercúrio, cobre e zinco
-Normalmente são bactericidas, viricidas e fungicidas
-Não são esporicidas 
-Estes metais pesados possuem efeito oligodinâmico: Liberam lentamente moléculas de
seus componentes em quantidades muito pequenas e exercem atividade antimicrobiana
 
-Prata:
-Mercúrio: Cloreto de mercúrio a 5% (Mercurocromo)
-Gatos não podem ter contato com:
-Cobre: Sulfato de cobre a 2%
-Zinco: 
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 35
Ânions reagem com membrana plasmática (Amplo espectro de ação) promovem a
desinfecção de utensílios domésticos e equipamentos industriais (Laticínios)
-Tensoativos e surfactantes – Substância para limpeza em geral, pois envolve a sujeira e
retira coma ajuda da água
-Incluem: Sabões, detergentes, xampus e sabonetes 
-Pouco valor antisséptico 
-Degerminante (Remoção mecânica dos micro-organismos)
-Triclocarban e triclosan – Inibem gram positivos 
1) Sabões e Sabonetes (Antissépticos: Remoção de camada oleosa sobre a pele)
2) Detergentes aniônicos (Desinfetantes de superfície)
-Afetam a permeabilidade da membrana plasmática 
-Não age sobre "Pseudomonas aeruginosa" (Gram negativa) 
-Bactericidas (Gram positivos e negativos)
-Fungicidas e viricidas, agem sobre alguns protozoários amebicidas.
-Não inativam esporos bacterianos, micobactérias e vírus sem envelope.
-Nitrato de sódio e nitrito de sódio (Salame e salsicha) 
-Utilizados em produtos cárneos embutidos 
-Evitam a formação de esporos do "Cl. Botulinum"
-Evitam o crescimento de fungos e bactérias gram negativas 
-Produzem cor avermelhada nos produtos
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 36
Usado como desinfetante 
Tóxico, causa irritação na pele e mucosas 
Odor desagradável
Usado por agentes funerários para embalsamar 
-Realizam desnaturação proteica 
-Formaldeido 37%: utilizados na conservação de amostras biológicas 
-Formaldeído 10%: utilizados na conservação de tecidos para histopatologia 
-Gluteraldeido 2%: Bactericida, fungicida (10min) e esporocida (1 a 3 horas) 
Geobacillus Stearothermophilus (Esporos) (Indicador biológico que possibilita a
verificação rotineira da eficiência dos processos de esterilização pelo vapor sob
pressão)
O frasco-ampola contendo o indicador biológico quando for submetido a autoclavação
é aquecido e sofre a mesma temperatura e pressão da autoclavação.
Se a esterilização for inadequada, alguns esporos sobrevivem e quando for para a
estufa os esporos passam para a forma vegetativa, multiplicando-se.
A formação de bioprodutos ácidos ocasiona uma alteração no PH e a coloração vai de
violeta para amarelo. (Caso a coloração ocorra, a esterilização não foi completa, foi
inadequada)
-Indicador químico de esterilização
-Fitas reativas (Embrulha o material e coloca uma fita para fechar. Ela muda de cor, fica
escura, caso esteja mesmo ocorrendo a esterilização)
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 37
Exercícios
1. QUAIS SÃO OS FATORES QUE DIFICULTAM A
ATUAÇÃO DOS AGENTES QUÍMICOS SOBRE OS
MICROORGANISMOS 
2. QUAIS AS PROPRIEDADES DOS COMPOSTOS
FENÓLICOS SOBRE OS MICROORGANISMOS E
QUAIS AS SUAS DESVANTAGENS DE USO.
3. DÊ DOIS EXEMPLOS E A ATUAÇÃO DE
DERIVADOS DO FENOL UTILIZADOS ATUALMENTE
4. QUAL A AÇÃO DA CLOREXIDINA SOBRE OS
MICROORGANISMOS
5. EXPLIQUE A AÇÃO DOS COMPOSTOS
HALOGÊNICOS SOBRE OS MICROORGANISMOS 
6. COMO AGEM OS COMPOSTOS DERIVADOS DO
AMÔNIO QUATERNÁRIO
7. O QUE É MUTAÇÃO BACTERIANA?
8. QUAIS SÃO OS TIPOS DE REPRODUÇÃO
GENÉTICA BACTERIANA. EXPLIQUE CADA UM
DELES
9. QUAIS SÃO OS FATORES QUE INTERFEREM NO
CRESCIMENTO BACTERIANO?
10. QUAL É A IMPORTÂNCIA DA PLASMÓLISE NO
CRESCIMENTO BACTERIANO?
11. EXPLIQUE O QUE É ATIVIDADE DE ÁGUA
12. COMO É FEITA A CLASSIFICAÇÃO DAS
BACTÉRIAS COM RELAÇÃO A NECESSIDADE DE
OXIGÊNIO PARA O SEU DESENVOLVIMENTO?
MATERIAL FEITO PELA @BICHOSTUDIES 38
13. O QUE ACONTECE COM A CÉLULA
BACTERIANA SE A PRESSÃO OSMÓTICA ESTIVER
BAIXA?
14. QUAIS OS TIPOS DE MEIO DE CULTURA
USADOS NOS LABORATÓRIOS?
15. COMO PODEM SER DISTRIBUÍDOS OS MEIOS
SÓLIDOS? E POR QUE SÃO SÓLIDOS?
16. COMO E POR QUE DEVEMOS SEMEAR AS
BACTÉRIAS NAS PLACAS?
17. DESCREVA A FORMA CORRETA DA
COLORAÇÃO DE GRAM
18. DESCREVA COMO FUNCIONA UMA
AUTOCLAVE E QUAL É A SUA FUNÇÃO
19. DESCREVA COMO FUNCIONA UM FORNO DE
PASTEUR E QUAL É A SUA FUNÇÃO
20. CONSTRUA UMA CURVA DE MULTIPLICAÇÃO
BACTERIANA E DESCREVA TODAS AS FASES DO
CRESCIMENTO 
21. QUAIS AS DUAS PRINCIPAIS REGIÕES DA
CÉLULA 
22. COMO ESSAS REGIÕES SE DISPÕEM NA
CÉLULA E QUAL A FUNÇÃO DE CADA UMA DELAS
23. COMO SE CHAMAM OS MICRO-ORGANISMOS
CUJAS CÉLULAS NÃO POSSUEM CARIOTECA 
24. QUAL É O PAPEL DA COLORAÇÃO DE GRAM?
EM QUE A PAREDE CELULAR INFLUENCIA?