14 de fevereiro de 2013. Espermograma estocagem do sêmen sêmen sexado

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14 de fevereiro de 2013
2ª aula Biotecnologia da Reprodução (aula pós carnaval)
Profª Bruna
ESPERMOGRAMA
Vigor
Motilidade
Concentração (os sptz não podem estar vivos, devendo-se acrescentar um espermicida como formol, por exemplo, para que não fiquemos confusos na contagem, devido a movimentação destes quando vivos):
- Nº de SPTZ/mm³
- Avaliação:
	- Câmara de Neubauer, Espermicida
- Fórmula:
	X= 	A
	 ____________
	 1/10 x B/25 x 1/C
Onde:
A – nº de SPTZ contados
B – nº de quadrados grandes contados
C – fator de diluição do sêmen
- Mínimo 6-7 x 10⁹
Morfologia espermática:
- Presença e incidência de formas...
-
- Classificação (decorar para prova!!!):
	Defeitos maiores (piores)				Defeitotos menores 
	Patologia de acrossoma,
	Gota citoplasmática proximal,
	Defeitos peça intermediária,
	Cauda fortimente enrolada
	
	- Classificação:
		- Considerados normais:
			# 15% defeitos maiores
			# 24% defeitos menores
			# 30% total
			# Defeito maior específico – 5% e menor 10%, ou seja, não pode-se ter 5% dos sptz com o mesmo defeito maior, ou seja, não poderá haver, por exemplo, 5% de sptz com cauda fortemente enrolada.
Obs.: clonagem não é melhoramento genético!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
ESTOCAGEM DO SÊMEN
Avanço da IA
Fatores que interferem na qualidade do sêmen estocado:
+ Temperatura de conservação;
+ Curva de congelamento;
+ Composição química dos diluidores;
+ Concentração dos crioprotetores (no caso do congelamento apenas, pois é tóxico em temperaturas inferiores a 0º).
Diluidor: a maioria do diluidor, também são conservadores. O diluidor (soro fisiológico) aumenta o volume do sêmen. Será mais utilizado em IA de cadelas.
Conservador : quando o líquido diluidor oferece ambiente favorável a manutenção da vitalidade do sptz.
- Características dos bons diluidores/conservadores:
	- Fonte de energia;
	- Proteção ao congelamento rápido;
	- Tampão para prevenir mudanças de pH;
	- Manutenção da pressão osmótica;
	- Aumento do volume do sêmen;
	- Proteção das céls. Espermáticas durante congelação e descongelação;
	- Não pode ser tóxico
- Diluidores químicos: função de aumentar o volume do ejaculado (sol. Isotônica de cloreto de sódio);
- Diluidores a base de ovo: ex.: diluidor ...
Glicerol promove desidratação do sptz, para que não ocorra a formação de cristais dentro da célula, o que iria inviabilizar a mesma.
Etilenoglicol é mais raro, caro e mais usado para congelamento de embriões.
SÊMEN SEXADO
Descobriu-se que o sptz de cromossomo X, tem 3,8% a mais de DNA quando comparado ao Y, portanto o sptz X é mais pesado e ficará mais corado. A máquina(citômetro de fluxo) separa sptz X e sptz Y, mortos e defeituosos para o outro, portanto, o sêmen sexado de Y não terá boa qualidade, pois virá acompanhado de sptz mortos e defeituosos. A taxa de gestação do sêmen sexado é inferior, pois fica mais fraco (devido tb ao corante), menos concentrado, etc. Uma forma de aumentar a taxa de gestação, é palpar qual ovário está ovulando e inseminar diretamente no corno que dará acesso ao óvulo. Outra forma, é associar essa técnica a inseminação atrasada, ou seja, ao invés de 12 h, faz-se com 15 horas após a visualização do cio.
A vantagem é que consegue-se obter a cria do sexo desejado. Como desvantagem tem um custo bem mais elevado que o sêmen convencional, e menor taxa de gestação, porém ainda é valido, pois o proprietário não estará tendo maiores despesas com um bezerro macho.
MANEJO COM O BOTIJÃO
	A “vida” do botijão está na válvula de vácuo.
	O nitrogênio deverá ser reposto constantemente.
	O nitrogênio deverá sempre evaporar constantemente.
	Ao comprar o botijão, deve-se a bastecê-lo com0,5 a 1,0 L de nitrogênio com auxílio de um funil, aguarda meia hora, completa o nível de forma lenta, aguarda 24 h para ver a taxa de resfriamento (observar se o botijão não está suando, etc).
	Para medir o nível de nitrogênio líquido, deve-se inserir uma régua preta até o fundo do botijão, aguarda um breve instante, retira-se a régua e abana. A porção que molhou irá ficar branca por alguns intantes.
	O transporte ideal é feito no banco do carro, preso pelo cinto de segurança, e janelas abertas para poder ventilar. Obs.: lembrar que o nitrogênio queima, usando se possível uma pinça para puxar a racks. O transporte poderá ser feito na carroceria, se bem acondicionado com espumas para evitar que batam.
	Se as racks estiverem vazias, deve-se jogá-las fora (são descartáveis), e se o caneco estiver vazio, é melhor retirá-lo tb, para economizar nitrogênio.
e-mail para mandar matéria de hj (14/02/13) : olle_philippe@yahoo.fr