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Data: 07/05/2021 No:RP-XXXXX Revisão: Folha:1/3 Conjunto: Roteiros de Aulas Práticas Curso: Biomedicina Disciplina / Código: Imunologia Clínica / BME 031 Título: Hemaglutinacão indireta Prática Nº: 04 Laboratório de preferência: Controle de Revisões Elaborado por: Luana Gois Consensuado por: Aprovado por: Liberado por: Rev. Data Folha(s)/Descrição 1. INTRODUÇÃO A doença de Chagas é uma infecção parasitária causada pelo Trypanosoma cruzi. Na maioria dos casos a doença evolui até a fase crônica. O diagnóstico de laboratório depende do estágio no qual se encontra a doença. Durante a fase aguda, o diagnóstico é realizado mediante a comprovação da presença dos protozoários no sangue. Durante a fase crônica, utilizam-se métodos sorológicos como teste de triagem. A hemaglutinação indireta baseia-se na propriedade dos anticorpos (anti-T. cruzi) de produzir aglutinação específica na presença de eritrócitos sensibilizados com antígenos citoplasmáticos e de membrana do Trypanosoma cruzi. Chagatest HAI screening A-V utiliza glóbulos vermelhos de ave, que aceleram a visualização da reação por ser de maior tamanho que os de carneiro. 2 OBJETIVO ● Compreender a técnica de hemaglutinação; ● Identificar a aplicabilidade desta técnica. Cópia não Controlada 3 QUESTÕES Pesquise e responda: 1. Como é realizada a reação de hemaglutinação indireta para diagnóstico de Chagas? As hemácias são revestidas com Ag do T. cruzi e então distribuídas nos poços da placa de microtitulação, o soro teste e os controles positivos e negativos diluídos é então adicionado na placa, havendo anticorpos anti-antígenos de T. cruzi, os mesmos formarão ligações entre as hemácias, interagindo com os antígenos na sua superfície, a reação Ag-Ac é visualizada pela aglutinação das hemácias. 2. Explique com suas palavras como ocorre a reação de hemaglutinação indireta. Ocorre a aglutinação de hemácias pela administração de anticorpos específicos aos antígenos que se pretende estudar. São utilizadas as hemácias pois possuem uma grande variedade de moléculas onde vários antígenos podem se fixar, e as partículas que são utilizadas são geralmente poliestireno, bentonita ou látex. O complexo célula-antígeno ou célula-anticorpo é adicionado para poder reagir com os anticorpos ou antígenos, respectivamente. Se tiver especificidade entre Ag-Ac haverá aglutinação. 3. Descreva como os resultados podem ser interpretados. Amostra reagente → as hemácias estão distribuídas de maneira homogênea, ocupando quase toda a placa. Amostra não reagente → é quando as hemácias estão acumuladas em forma de botão compacto no fundo do poço da placa. Amostra inconclusiva → é quando não há a formação nem dos botões nem da hemaglutinação completa, sendo observado um misto dos dois, dessa forma, deve-se repetir o teste. 4. Cite aplicações mais frequentes desta técnica, além do diagnóstico de chagas. RP-XXXXX Rev. 00 2/3 Cópia não Controlada É aplicado para detectar anticorpos contra vários microrganismos, como a sífilis, toxoplasma gondii e treponema pallidum. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ABBAS, A. Imunologia celular e molecular. Porto Alegre: Artmed, 2008. VAZ, A. J.; TAKEI, K.; BUENO, E. C. Imunoensaios: fundamentos e aplicações. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007. RP-XXXXX Rev. 00 3/3 Cópia não Controlada
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