prova AV2 BIOTECNOLOGIA

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3 O entendimento do dogma central da biologia molecular é essencial para a produção de proteínas recombinantes, uma vez que este compreende os três processos principais que a célula utiliza para que a informação genética seja expressa. Considere essa sequencia de uma fita de DNA: AACTTGCAC. Marque a alternativa que indica corretamente a sequência complementar dessa fita: (1,0)Requer resposta. Opção única. 
(1 Ponto)
AACTTGCAC
UUGAACGUG
TTGAACGTG
TTGAACGUC
UUCTTGCAG
44,
4 Em que fase do desenvolvimento embrionário é permitido coletar células tronco para fins de pesquisa e terapia?Requer resposta. Opção única. 
(1 Ponto)
Mórula
Blastocisto
Trofoblasto
Zigoto
Gástrula
55,
5 A clonagem de um gene é somente o primeiro passo na tecnologia de DNA recombinante. A produção em ampla escala de uma proteína recombinante é o objetivo principal dos pesquisadores que utilizam essa técnica. A respeito dos termos utilizados na tecnologia do DNA recombinante, marque a alternativa incorreta :Requer resposta. Opção única. 
(1 Ponto)
Enzima de restrição são endonucleases clivam o DNA em qualquer ponto para liberação de um fragmento que será substituído por um gene de interesse. CERTO
As enzimas de restrição (ou endonucleases de restrição) são enzimas que cortam o DNA em locais específicos. As enzimas reconhecem determinadas sequencias nucleotídicas do DNA e fragmentam a molécula sempre que identificam essa sequência, produzindo extremidades coesivas. Enzima de Restrição – EcoRI
A ligase une fragmentos de DNA para formar uma molécula única e contínua CERTO
 DNA ligase é uma enzima de adesão de DNA. Se dois pedaços de DNA tiverem terminações complementares, a ligase pode ligá-las para formar uma molécula de DNA única e contínua.
Transgene é o termo que se dá ao fragmento de DNA que foi transportado artificialmente de um organismo doador para um organismo receptor criando o OGM. CERTO
Um transgene é uma seção de material genético de um organismo que aparece no DNA de outro organismo. Dependendo de vários fatores, o transgene pode falhar na expressão, pode se expressar de maneira diferente daquela observada no organismo original ou pode se expressar no novo organismo exatamente da mesma maneira que no original.
Promotor tem afinidade com a RNA polimerase. VETOR DE CLONAGEM NÃO TEM PROMOTOR
Plasmídeo é um fragmento de DNA circular utilizados em engenharia genética para transporte de genes tais como de resistência aos antibióticos, de produção de toxina e de hormônios.CERTO
Na Engenharia Genética, os plasmídeos são utilizados como vetores de clonagem, transportando genes, ou fragmentos de um DNA a ser clonado para dentro da célula hospedeira. Os plasmídeos podem ser modificados para carregar novos genes. O plasmídeo bacteriano possui a capacidade de inserir um fragmento de DNA externo ao seu próprio genoma.
66,
6 Sobre a Lei 11.105, de 24 e março de 2005, que trata da Biossegurança e organismos geneticamente modificados (OGMs), assinale a alternativa incorreta:Requer resposta. Opção única. 
(1 Ponto)
A tecnologia do DNA recombinante compreende uma série de técnicas de manipulação genética com o objetivo de obter organismos capazes sintetizar um produto de interesse para a saúde e meio ambiente a partir da introdução de genes oriundos de outros organismos.
Entende-se por engenharia genética o conjunto de tecnologias que permitem a manipulação (modificação) de material genético in vitro, envolvendo técnicas que permitem o transplante de genes do DNA de uma espécie para o DNA de outra espécie.
Toda instituição que utilizar técnicas e métodos de engenharia genética ou realizar pesquisas com OGM e seus derivados deverá criar uma Comissão Interna de Biossegurança.
Para a construção de uma bactéria recombinante, é necessário o isolamento do DNA doador e a inserção do mesmo em um vetor de clonagem apropriado. O tratamento com endonucleases de restrição é desnecessário.
77,
7 A respeito do plasmídeo pBR322 cujo mapa está demonstrado a seguir, marque a alternativa que apresenta uma maneira de deletar totalmente o gene tet. Requer resposta. Opção única. 
(1 Ponto)
Utilizando a enzima XmaIII NAO
Utilizando as enzimas XmaIII e BamHI NAO
Utilizando as enzimas HindIII e XmaIII NAO
Utilizando as enzimas EcoRI e PvuII SIM
Utilizando as enzimas PstI e XmaIII NAO
88,
8 Em um laboratório, foi feita a coleta de sangue de quatro pacientes com suspeita de Leishmaniose Visceral, cujo agente etiológico é Leshmania chagasi. Após a extração e amplificação do DNA das amostras utilizando primers específicos, foi feita a análise por eletroforese em gel. Considere que nestas condições, a presença do protozoário resultará fragmentos de DNA com 200bp. Portanto, assinale a alternativa que indica o(s) paciente(s) diagnosticado(s) com Leishmaniose Visceral:Requer resposta. Opção única. 
(1 Ponto)
1
2
2 e 3
1, 3 e 4
3
99,
9 A figura abaixo ilustra o resultado de um experimento cujo objetivo foi avaliar o crescimento de uma bactéria a 37°C em relação a produção de uma determinada enzima ao longo do tempo. Com base nisso e nos resultados demonstrados nela, responda:
a) Com quanto tempo de experimento você interromperia o bioprocesso levando em consideração a produção máxima da enzima em estudo?
 8 HORAS
 b) Em que fase do crescimento ocorreu a maior produção da enzima? 
 LOG, até 8 horas
c) Após quanto tempo de experimento a população de bactérias começa a morrer? 
 6 HORAS
d)Levando em consideração a temperatura de crescimento da bactéria no experimento, que tipo de microrganismo é este?
BACTERIAS E LEVEDURAS CRESCEM EM TEMPERATURA DE 37º, MESOFILO
Requer resposta. Texto Multilinha. 
(2 Pontos)
1010,
10 Leve em consideração que você é um pesquisador na área de biotecnologia e está elaborando um projeto de iniciação científica. Elabore o desenho experimental de um processo fermentativo e indique os componentes do seu sistema produtivo que serão utilizados no seu estudo. Utilize um substrato da região Amazônica e informe qual produto (biomolécula) você pretende produzir.Requer resposta. Texto de linha única. 
Para o desenvolvimento de um "iogurte" de soja suplementado com oligofrutose e inulina.
Misturar o extrato de soja (10%) com água, homogeneizado em liquidificador por 5 minutos.
Adição de oligofrutose e inulina, misturar com bastão de vidro. 
Tratamento térmico (autoclave vapor fluente 20 minutos).
Resfriamento até 42º C. 
Inoculação (0,16% fermento lácteo).
Colocar na estufa 42º C. Aproximadamente 4horas.
O "iogurte" de soja foi suplementado com os prebióticos oligofrutose (Raftilose P95) e inulina (Raftiline GR) fornecidos pela ORAFTI -Bélgica.
Matéria prima: extrato de soja em pó
Para obtenção do "iogurte" foi utilizado o fermento lácteo Rich®, constituído de culturas superconcentradas de Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus e Streptococcus thermophilus,
Preparo do substrato para o "iogurte" de soja suplementado com oligofrutose e inulina
(2 Pontos)
Lipases são enzimas que têm como função catalisar a hidrólise de triglicerídeos gerando glicerol e ácidos graxos livres e, sob certas condições, catalisar a reação reversa de síntese de ésteres por processos tais como esterificação e transesterificação. O objetivo deste trabalho foi estudar a influência de diferentes variáveis de processo na produção de lipase por linhagem fúngica em fermentação semi-sólida. Os experimentos foram realizados segundo planejamento experimental Plackett & Burman. Os meios de cultivo continham farelo de trigo, sulfato de amônio e fontes lipídicas. A fermentação em colunas aeradas foi conduzida a 32°C por 48 horas e as variáveis estudadas foram concentração de inóculo e de fontes lipídicas (óleo de oliva ou borra), umidade e aeração. As variáveis aeração e concentração da fonte lipídica foram estatisticamente significativas (p < 0.10) para a produção de lipase em meio contendo borra, enquanto a umidade foi significativa em meio contendo óleo.
Meios contendo sabugos de milho foram preparados e inoculados com a cultura fúngica e incubados por 5 dias a 32° C. Após esteperíodo, foram adicionados 20 ml de solução 0,1% de Tween 80 para o desprendimento dos conídios, formando assim uma suspensão (COURI e FARIAS, 1995). O número de conídios/ml da suspensão foi determinado através de contagem em câmara de Neubauer.
Foram utilizadas duas fontes lipídicas distintas para a produção de lipases: óleo de oliva extra virgem da marca Borges® e borra do refino do óleo de milho proveniente da Indústria Granfino S/A, Nova Iguaçu, RJ, Brasil.
Após a fermentação, foram adicionados 2,5 mL de tampão fosfato de sódio pH 7,0 por grama de meio fermentado, que permaneceu por uma hora em Shaker sob agitação a temperatura de 35ºC. O extrato enzimático obtido e filtrado em papel de filtro foi centrifugado por 10 min. a 6.000 rpm. e em seguida, filtrado em membrana de microfiltração para posterior determinação da atividade enzimática.
A atividade lipásica foi determinada por método titulométrico, utilizando-se como titulante NaOH 0,05 M (PEREIRA et al. 2001, com modificações.) no equipamento Metrohm Titrino 794®, até pH final de 11,0. A unidade de atividade lipásica foi definida como a quantidade de enzima que produz 1 µmol de ácidos graxos por minuto sob condições de ensaio padrão.