microbiologia 09.09.11

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Tuberculose
Faz parte do programa nacional de controle e erradicação.
A tuberculose é facilmente diagnosticado. Pra isso, vc vai ter que ter métodos diretos e indiretos, sendo que os métodos diretos, onde vc tem a identificação e detecção do MO são menos usados.
Pq não usa método direto no plantel: se vc pegar o material e fizer a microscopia não demora muito tempo. Vc tem que entubar o animal, fazer lavado de arvore brônquica, levar para o lab, fazer o método de zeel neilsen para vc procurar um BAAR. Só que nocardia também tem (BAAR), ai vc tem que mandar pra cultivo. Pra cultivo vc tem que ter laboratório controlado, ela faz o crescimento dela lentamente, vc tem uma cultura em 2 meses, sendo que essa cultura é altamente contagiosa, pois ela libera unidades cocoides que vc acaba fazendo granuloma.
Não fecha diagnostico.
Segundo, não é pratico fazer um lavado. Pra humano é fácil, mas pra animal não é.
Parto entao pro método indireto que me dá uma resposta imunológica, uma resposta imunológica indireta. 
Humoral ou celular? Porque?
Humoral avalio a quantidade de Ac circulando.
O que agente faz é um método indireto celular, ou seja. Vc pega um antígeno ch tuberculina e inocula intradermico, por isso eu tenho uma resposta intradermica ou intradermoreacao do tipo 4. Vou ter uma resposta imunológica celular mediada por macrófagos, que é ch hipersensibilidade tipo 4 ou retardada. 
O método indireto é vc aplicar uma PTN que é o antígeno (e um antígeno é protéico) que vai estimular no tecido uma reação celular, que vem macrófago, que faz uma reação tecidual (ou tissular) local.
Vou avaliar a resposta do tecido.
Todos os estudos foram feitos numa determinada área do pescoço do gado, por isso se faz no pescoço. O pescoço tem uma linha imaginaria onde vamos fazer.
Temos que ter cuidado porque estamos condenando um ser animal.
Tuberculinacao é uma resposta de hipersensibilidade retardada.
Meio direto – cultivo em Agar Lowenstein – Jensen
Método indireto
- Tuberculinização
	Primeiro: temos que trabalhar deste modo: 
Como agente fez na brucellose, vamos ter triagem, se for positivo na triagem, vai pro confirmatório. 
Triagem: avaliação do meu plantel, eu inoculo a tuberculina para ter reação do meu tecido. Essa inoculação pode ser em 2 posicoes: na tabua do pescoço ou na prega ano-caudal.
Tabua do pescoço: vou inocular a tuberculina e vai ocorrer uma reação, todos vão ocorrer uma reação, mesmo que não seja um animal que tenha entrado em contato. Então vai ocorrer uma reação e muitas vezes vai estragar o couro. O bov de leite é para leite. então na tabua do pescoço agente usa pra gado de leite.
Pra prega caudal utilizamos pro gado de corte para não danificar o couro.
O preconizado pelo ministério são essas 2 localizações.
Se deu positivo, ele agora vai ser confirmado de 60-90 dias depois. Ai ele faz o teste confirmatório. O exame confirmatório é obrigatoriamente na tabua do pescoço. 
Essa reação que vamos ver, a introdermoreacao ocorre em 72 horas, ou seja, vou na fazenda hoje, inoculo o antígeno, em 3 dias eu vou lá e meço a reação. 
Como vou fazer na tábua do pescoço:
Na triagem eu vou inocular 0,1ml de tuberculina bovina. 
Gado de leite: tabua do pescoço
Gado de corte: ano-caudal
Vamos riscar uma linha entre o dorso e o ventre, uma linha media.
E na linha da escapula vamos traçar uma linha media. O ponto de encontro delas é onde vc vai fazer um campo de tricotomia 4 x 4 (4cm por 4cm) dessa área.
Procurar não cortar, porque senão vc tem uma reação tecidual normal, vc tem um edema e aumenta a espessura da pele e muda o seu padrão.
Vc vai colocar na pele um cutímetro.
Espessura da pele inicial, ch B0. Ex, 2mm. Ai eu anoto da minha tabela B0 = 2mm
Gado de corte não precisa medir a espessura, porque a pele é muito fina.
Vou pegar, preparar a minha pistola de aplicação.
A nota fiscal do seu instrumento tem que estar no seu nome.
Se vc fizer o curso, aprender a fazer numa pistola, mas se vc continuar na sua agulha de insulina vc vai continuar fora de padrão.
Essa pistola vem sempre 2, uma com botão azul e a outra com vermelho. 
A do botão vermelho eles preconizam que tenha que ser vermelho para tuberculina bovina
O azul para a tuberculina aviaria.
A pistola está carregada com 10 amostras, vc consegue fazer 10 bovinos. Vc tem que fazer a aplicação de cima pra baixo, se for ao contrario, a forca de gravidade faz com que esse volume seja escoado, com isso é como se vc tivesse inoculado menos, vai ter resultado alterado.
Vc enterra a agulha, aplica o conteúdo, aciona o gatilho, solta e retira. Porque: primeiro vc enterra, o bovino movimenta, ai vc ...
Vc cobra 2 visitas, porque vc vai um dia, e volta 3 dias depois. Vc cobra a kilometragem 2 vezes. 
A brucellose não, mas a tuberculose são necessariamente 2 visitas.
Eu medi, inoculei. Ai 72 horas depois (3 dias) eu volto e meço a espessura novamente. Essa espessura é ch de Bf. Ex. deu Bf=4mm
Vou fazer: ΔB = Bf – B0 = Bf = 4mm - B0 = 2mm = 2mm.
Vc tem que aplicar sempre num mesmo lado (ex. sempre esquerdo ou sempre direito)
O teste de triagem é chamado: Teste cervical simples (TCS)
O teste cervical simples é feito com a tuberculina bovina, 0,1ml de aplicação.
Bov de corte: ano-caudal
Bov de leite: tabua do pescoço 
Se der positivo, o que vou fazer: confirmar, de 60-90 dias depois esse teste confirmatório. Esse teste confirmatório é ch teste cervical. Esse teste obrigatoriamente tem que ser na tabua do pescoço. Esse teste é comparativo, com isso vou ter que usar as 2 ptns. Então vou usar a tuberculina bovina, e tuberculina aviária.
Tabua do pescoço 
O animal positivo pode ter tido uma reação imuno inespecífica na primeira vez que vc tem que confirmar depois
Vamos esperar 60-90dias depois para confirmar.
Se vc fez na ano caudal, e deu positivo, pode ser uma reação imunoespecifica. Vc vai confirmar na tabua do pescoço 60-90 dias depois.
Teste confirmatório
Vamos aplicar a tuberculina bovina 0,1ml
Vamos aplicar a tuberculina aviaria 0,1ml
Agora são 2 aplicações pra confirmar. Vc pega uma linha media dorsal ventral ao invés de vc dividir uma linha media entre a ganasha e a escapula, vc divide 2 linhas, entao vc vai dividir em 3 porções: terço anterior, terço médio e terço posterior.
No final do 1/3 anterior e inicio do terço médio vc tira um quadrante de tricotomia 4x4. 
No final do 1/3 medio, com inicio do posterior, um outro 4x4, ou seja, vamos ter 2 quadrantes na tabua do pescoço. 
Quando fizemos só o teste cervical simples, era apenas um.
Agora no teste confirmatório tenho 2.
Vamos ter 2 quadradinhos sem pelo.
O que vc vai aplicar cranial é sempre a PPD aviaria. O que vc vai aplicar caudal é a PPD bovina. Portanto, quando colocar no bolso, coloca a pistola azul no lado esquerdo e no lado direito vc coloca a pistola vermelha. Na pistola azul, vc coloca a aviaria e no esquerdo vc coloca o bovino.
Antes de aplicar eu tenho:
A medida da aviaria: 0
A medida da bovina: 0
Ex. A0: 2mm
Bo: 3mm
Depois que mediu, vc aplica a aviaria e bovina, sempre a aplicação é de cima pra baixo. 72 horas depois vc volta.
Todo teste cervical comparativo é realizado pelo medico veterinário credenciado e com alguém do ministério presente para supervisionar vc. 
Ai deu Af: 3mm
Bf: 5mm
 ΔB = Bf – B0
ΔB = 5 – 3
ΔB = 2mm
ΔA = Af – A0
ΔA = 3 – 2
ΔA = 1mm
ΔF = ΔB – ΔA
ΔF = 1mm
Lembrar que o bovino tem reação maior que a aviaria.
Analisar os resultados pela tabela do programa.
Ex. fiz na tabua do pescoço, vou ter um resultado.
Na ano-caudal qualquer aumento é positivo.
Ou ele vai ser inconclusivo ou ele vai ser positivo.
Vc toca no aumento, se o animal tiver pouca dor, vai pra 
Consistência: se estiver endurecido, continua no inconclusivo. Se estiver macia vai pra positivo.
Se vc der um inconclusivo, necessariamente ele vai ter que confirmar. Se de novo no confirmatório ele der outro inconclusivo, 2 inconclusivos, já é positivo.
Quando vc está na duvida, vc dá como positivo, porque o inconclusivo vai ser confirmado depois.
Teste cervical comparativo: 60-90 dias depoisda triagem.
Se vc já tem um paciente que o ΔB for menor que 2mm, é negativo. Ele foi positivo anteriormente, mas negativo agora, vc devolve ele pro pasto. 
Se o ΔB for menor que o ΔA, ele é negativo, porque vai ser um valor menor que 0, então é negativo.
Pra eu considerar uma comparação, o ΔB ser de 0 – 1.9 = negativo.
O oficial do ministério só acompanha o teste confirmatório (é obrigatório), desde o momento do teste até o resultado.
Se for de 2 – 3.9 é inconclusivo. 
Se vc tiver positivo e inconclusivo vc poderia confirmar mais uma vez, mas geralmente não se confirma, já faz o descarte. 
Se o ΔA – ΔB = maior que 4, é positivo.
Inconclusivo + inconclusivo = descarte.