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Ecologia Microbiana de Alimentos 1 Ecologia Microbiana de Alimentos Fatores intrínsecos Fatores Extrínsecos Fatores Implícitos FATORES INTRÍNSECOS São relativos às características do próprio alimento FATORES EXTRÍNSECOS Estão relacionados ao ambiente onde o alimento se encontra FATORES IMPLÍCITOS São decorrentes da presença ou atividade de outros microorganismos FATORES INTRÍNSECOS - Atividade de água (Aw) e Pressão osmótica - pH - Potencial de Oxirredução - Nutrientes - Inibidores - Estruturas Biológicas 1. Atividade de água → Índice de disponibilidade de água para que o crescimento microbiano e para reações químicas é necessário que haja água disponível no alimento Aw = P / Po → Pressão de vapor da solução / pressão de vapor da água pura Ecologia Microbiana de Alimentos 2 Água no alimento: Livre → Atividade de água Adsorvida Ligada Isotermas de Sorção Como a Atividade de Água afeta o crescimento microbiano? → Água disponível interfere na velocidade de reações vitais para microorganismos Valores mínimos de Aw para crescimento de alguns grupos de microorganismos Ecologia Microbiana de Alimentos 3 → Alimentos com atividade de água abaixo de 0,60, não possuem crescimento de microorganismos (estáveis do ponto de vista microbiológico) Efeito da diminuição da Aw sobre o crescimento microbiano → Prolongamento da fase lag, redução da velocidade de crescimento e redução do tamanho da população final 1.1 Pressão osmótica → Efeito da concentração de solutos → Força exercida pelas moléculas de soluto que tentam atingir o equilíbrio osmótico Condição Osmótica Ideal para célula microbiana → Ligeiramente hipotônico Estresse osmótico → Meio hipertônico = saída de água da célula Resposta microbiana ao estresse osmótico Acúmulo de solutos compatíveis Íons K+ Aminoácidos (glutamato, prolina, alanina, glutamina) y-aminobutirato, glicina betaína, sacarose, trealose, glicerol, etc. Classificação de microorganismos quanto à necessidade de sal Não Halofílicas (crescem melhor na ausência de sal) Halotolerantes (crescem bem na presença e na ausência de sal) Halofílicas (exigem sal pra crescer) Halófilos Extremos (exigem elevadas concentrações de sal) Levedura Osmofílica: As leveduras osmofílicas são aquelas que dependem de altas concentrações de açúcar para se desenvolver. 2. pH → Concentração de H+ Ecologia Microbiana de Alimentos 4 → Serve para medir o grau de acidez, neutralidade e alcalinidade de determinada solução pH = -log [h+] (ácidos inorgânicos fortes) pH = pKa + log10 [A-] / [HA] (ácidos orgânicos fracos) Efeito do ácido na célula microbiana Ácido ionizado → Prótons praticamente não entram na célula, pois a superfície externa da célula microbiana possui carga positiva Ácido não-ionizado → Ausência de carga não causa repulsão, podendo permear a célula. Quando o ácido não dissociado entra no citosol da célula, encontra um ambiente e favorece sua dissociação, tendo a se ionizar, liberando prótons H+ no citoplasma, acidificando o meio intracelular. Classificação dos microorganismos quanto ao PH Acidófilos: pH ótimo se encontra abaixo de 7 Neutrófilos: pH ótimo se encontra próximo de 7 Alcalifílicos: pH ótimo se encontra acima de 7 → A maioria dos microorganismos crescem melhor em pH próximo a neutralidade Adaptação microbiana à presença de ácidos fracos Em meio ácido: Descarboxilação de aminoácidos com liberação de aminas Em meio alcalino: Desaminação do aminoácido em liberação dos ácidos orgânicos 3. Potencial de Oxirredução (Eh) → Facilidade com a qual o substrato ganha ou perde elétrons Ecologia Microbiana de Alimentos 5 Microorganismos aeróbicos necessitam de valores de Eh positivos (oxidantes) enquanto microorganismos anaeróbios requerem valores de Eh negativos (redutores) O potencial redox de um alimento depende: Da composição (agentes redutores e oxidantes presentes) Da capacidade de balanceamento, isto é, da resistência do alimento em modificar seu Eh Da tensão de oxigênio da atmosfera em contato com o alimento Do acesso que a atmosfera tem ao alimentos (embalagens com diferentes permeabilidades ao oxigênio, embalagem a vácuo, atmosfera modificada) Substâncias dos alimentos que ajudam a manter condições redutoras: Os grupamentos - SH em produtos de origem animal O ácido ascórbico e açúcares redutores em frutas e vegetais A oxidação de lipídeos interfere com o Eh em produtos lácteos Fracionamento de alimentos (pedações maiores comparados à carne moída, p ex.) interferem com o potencial redox Microorganismos aeróbios diminuem a concentração de O2 no meio, reduzindo o Eh O Eh do meio pode ser reduzido pela produção de substâncias redutoras como o H2S. 4. Nutrientes Nutrientes Complexos ex. Polissacarídeos, proteínas e lipídeos Nutrientes não disponíveis ex. Vitaminas, minerais como ferro Nutrientes Escassos ex. Água 5. Inibidores Ácidos orgânicos: Acético, lático e cítrico Compostos fenólicos: Derivados do ácido hidroxicinâmico (ác. p-coumárico, ferúlico, caféico e clorogênico), taninos. Sistemas Antimicrobianos: Lisozima (clara de ovo), lactoperioxidase (leite) Óleos essenciais: Eugenol (cravo), timol (tomilho), carvracol (orégano), alicina (alho), aldeído cinâmico (canela) Outros: Lactoferrina, ovotransferrina 6. Estruturas Biológicas → Barreiras mecânicas para a penetração de microorganismos Exemplos: Cascas, películas, pele Ecologia Microbiana de Alimentos 6 FATORES EXTRÍNSECOS 1. Temperatura Microorganismos 1. Psicrófilos → Microorganismo mesófilo que consegue crescer em temperaturas de refrigeração. 2. Mesófilos 3. Termófilos O que ocorre com o microorganismo abaixo da temperatura mínima? O microorganismo paralisa suas reações, pois as enzimas não se encontram na temperatura ótima de ação Paralisa o transporte transmembrana Diminui a fluidez da membrana, dificultando a entrada de nutrientes na célula e a remoção de subprodutos tóxicos A célula não morre O que ocorre com os microorganismos em temperaturas superiores à temperatura máxima? Desnaturação proteica irreversível Lise térmica Morte celular → perda da viabilidade Adaptações microbianas ao choque frio Aumento de ácidos graxos insaturados nos fosfolipídeos de membrana e síntese de proteínas do Choque Frio Adaptações microbianas ao choque térmico Aumento do ácidos graxos saturados nos fosfolipídeos de membrana Síntese de proteínas do Choque Térmico 2. Umidade Relativa do ambiente A umidade do ambiente de estocagem dos alimentos interfere com a Atividade de Água dos mesmos Ecologia Microbiana de Alimentos 7 URE = Aw x 100 Alimentos com Aw baixa podem absorver umidade do ambiente → Aumento do risco de crescimento microbiano Alimentos com Aw alta podem perder água para o ambiente → Alterações sensoriais 3. Atmosfera Gasosa A atmosfera do ambiente de estocagem dos alimentos interfere com o Eh dos mesmos Embalagem a vácuo CO2 Ozônio FATORES IMPLÍCITOS Dizem respeito à presença ou atividade de microorganismos nos alimentos que interferem no desenvolvimento de outros microorganismos 1. Estimulação do crescimento Produção de metabólitos (vitaminas, hidrólise de polissacarídeos, proteínas e lipídeos) Mudança no pH, Eh e Aw Degradação de substâncias inibidoras 2. Inibição do crescimento - Antagonismo Competição por nutrientes Produção de substâncias inibidoras (ácidos orgânicos, antibióticos, peróxido de hidrogênio, bacteriocinas ) Mudanças de pH e Eh Teoria de Barreiras → Somatório de condições estressantes ao microorganismo, que juntos inibem o crescimento dos mesmos Ecologia Microbiana de Alimentos 8
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