Slides de Introdução à Bioquímica Clínica

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BIOQUÍMICA 
CLÍNICA
Prof. Weder Naiman
Bioquímica Clínica
 Química Patológica;
 Química Clínica;
Ramo do laboratório clínico
no qual os métodos químicos
e bioquímicos são aplicados
para pesquisa de uma
doença.
Bioquímica Clínica
Fornece uma 
Interface entre a 
química e a 
patologia.
Útil para investigar 
e concluir no 
âmbito hospitalar 
ou clínico.
Suporte para 
confirmar ou 
descartar 
determinado 
diagnóstico.
Bioquímica Clínica
1/3 das investigações 
laboratoriais.
Envolvida em todos 
os ramos da clínica.
Busca de uma 
patologia.
Avaliação do 
prognóstico a partir 
do diagnóstico.
Conceitos da Bioquímica Clínica
 Analito: aquele elemento ou substância que será dosado
na amostra.
 Amostra: porção representativa da espécie ou
composto a ser analisado. Material biológico retirado do
paciente.
Para quê servem os exames?
 Diagnóstico (momentâneo);
 Avaliar a função de um órgão;
 Avaliar um estado metabólico
 Estabelecer a presença de enfermidade;
 Acompanhar a evolução de enfermidades;
 Fazer controle da cura
 Estabelecer uma identidade

Diagrama de 
Processos da 
Bioquímica 
Clínica
Análises Bioquímicas
• Testes que são muito
solicitados.
• Úteis para muitos
pacientes e que são
pedidos com
frequência.
• Ex.: glicose e
colesterol.
Básica ou 
Rotina
• Nem toda clínica está
equipada para
realizar todos os
pedidos;
• Centros de
referência.
• Ex.: Teste do pezinho
e hormônios.
Especializada
• Todos os laboratórios
de bioquímica devem
possuir recursos para
estes testes;
• São Processados
rapidamente;
• Ex.: gasometria e
eletrólitos.
Emergência 
ou Urgência
O que é uma análise urgênte?
 Ocorre quando o profissional da saúde necessita do
resultado de uma análise para tomar alguma ação
imediata.
 Se faz necessário um bioquímico de prontidão para
atender esses pedidos, inclusive fora do horário de
trabalho.
 Através da automatização e informatização o resultado
é entregue em tempo recorde.
Repertório de Análises
• Feito por máquinas
automatizadas.
Alta 
Demanda
• Reagentes
comerciais
empacotados sob a
forma de kits.
Menos 
Frequentes
• Pouca demanda;
• Única técnica
disponível.
Manuais 
Valores de Referência
 O Instituto de Padronização Clínica e Laboratorial (CLSI,
na sigla em inglês) define valor de referência como um
valor, ou um resultado, obtido pela observação ou pela
mensuração quantitativa de um analito. Isso é feito
numa polupação selecionada com base em critérios bem
definidos.
Valores de Referência
 Supondo média de 100 µg/dL e desvio padrão de ± 20 µg/dL.
 O valor de referência seria dado pelo intervalo -2dp e +2dp, neste caso de
60 µg/dL a 140 µg/dL.
Tipos de Amostras
AMOSTRA = MATERIAL BIOLÓGICO
90% das 
amostras são 
sangue e 
urina.
Tipos de Amostras
 Sangue total venoso: Hemoglonina, HbA1c;
 Sangue total arterial: Gases sanguíneos, pH.
 Soro (Sobrenandante do ST sem os fatores de coagulação);
 Plasma (Sobrenadante do ST com adição de anticoagulantes).
 Urina: 1ª da manhã para análises qualitativas, 24 horas;
 Outros materiais biológicos: Líquor, Líquido amniótico,
Fezes, Líquidos Cavitários, Sêmen…
Tubos Adequados para Exames
Os tubos
 Os tubos de coleta de sangue são divididos em três
grupos principais: tubos de soro, tubos de plasma e
tubos de sangue total.
 Tubos de soro: Tubo tampa vermelha e Tubo tampa
amarela com gel separador;
 Tubos de plasma: Tubo azul com citrato de sódio, Tubo
tampa verde com heparina e Tubo tampa cinza com NaF;
 Tubos de sangue total: Tubo tampa lilás e Tubo tampa
preta.
Os tubos de Soro
 Os tubos a vácuo seco da tampa vermelha são
sem aditivos e usados na coleta e
armazenamento de sangue para bioquímica,
imunologia, sorologia e testes de vários tipos de
vírus.
 Facilitam a atividade normal dos trombócitos e
coagulação desimpedida, evitando hemólise ou
adesão do corpúsculo sanguíneo à superfície
interna.
 Ele pode fornecer amostras de soro livres de
contaminação e manter sua composição normal
por um longo tempo. Além disso, é útil para a
reinspeção do soro com boa repetibilidade.
Os tubos de Soro
 O tubo a vácuo de gel da tampa amarela é usado
em testes que requerem soro separado,
incluindo bioquímica, imunologia, microbiologia
e toxicologia, etc. O tubo contém dois aditivos:
 1. Um coagulante na superfície interna do tubo,
o que irá encurtar muito o tempo de coagulação
 2. Um gel de separação que solidifica após a
centrifugação e separa completamente o soro e
plasma como uma barreira. Esta barreira
impede efetivamente a troca de substâncias
entre o soro sanguíneo e as células.
Os tubos de Plasma
 O tubo a vácuo com citrato de sódio é
utilizado para testes de coagulação do
sangue e aplica-se ao sistema de coagulação
(PT, TT, APTT e fibrinogênio).
 O tubo contém um citrato de sódio, que atua
como um anticoagulante reversível ligando-
se aos íons de cálcio no sangue e,
subsequentemente, interrompendo a
cascata de coagulação.
Os tubos de Plasma
 Tubo com Heparina da tampa verde é usado na
coleta de sangue para testes clínicos de plasma,
bioquímica de emergência e reologia do sangue.
 É semelhante em uso aos tubos ativadores de
coágulo de soro, mas adequado para testar
plasma em vez de soro.
 Muito utilizado na Gasometria arterial.
Os tubos de Plasma / Sangue Total
 O tubo de glicose é usado na coleta de sangue
para testes como açúcar no sangue, tolerância
ao açúcar e lactato.
 O fluoreto de sódio adicionado previne
efetivamente o metabolismo do açúcar no
sangue, e a heparina sódica resolve com
sucesso a hemólise. Portanto, o sangue
permanecerá em seu estado original por um
longo tempo e é garantido que seja estável para
testes de açúcar no sangue por 72 horas.
Os tubos de Sangue Total
 O tubo EDTA é o tubo padrão usado em
hematologia clínica, teste cruzado, grupo
sanguíneo e vários instrumentos de análise de
células sanguíneas.
 O aditivo EDTA atua como um poderoso
anticoagulante ligando-se ao cálcio no sangue.
O tubo oferece proteção abrangente para as
células sanguíneas.
 Muito utilizado para hemogramas.
Preparação das Amostras
 Obteção do Soro e do Plasma
Plasma ou Soro?
 A diferença entre soro e plasma é simplesmente a
presença ou não de anticoagulantes. Enquanto o plasma
sanguíneo apresenta fibrinogênio, que está relacionado
com o processo de coagulação, no soro, essa proteína
está ausente. O plasma é obtido por tubos que contém
anticoagulantes.
 Para obtenção do soro utiliza-se tubo vermelho;
 Para obtenção do plasma utiliza-se tubo azul, verde ou
Lilás (mais comum).
Plasma ou Soro?
Importância dos Laboratórios Clínicos
 Possuem grande papel quando o assunto é serviço de
saúde, pois fornece evidências para a tomada de
decisão clínica;
 Importante que os resultados sejam confiáveis, precisos
e controlados, garantindo a qualidade dos serviço
prestado.
Controle de Qualidade
Deve ser assegurado que os resultados reflitam de forma 
fidedigna e consistente a situação clínica apresentada 
pelos pacientes.
INFORMAÇÃO
 Deve satisfazer os clientes;
 Possibilitar a determinação
e realização correta do
diagnóstico, tratamento e
prognóstico.
Controle de Qualidade
Em um laboratório de análises clínicas a garantia de
qualidade é alcançada quando tem-se total e absoluto
controle de sobre todas as fases do processo.
 Fase Pré-analítica;
 Fase Analítica;
 Fase Pós-analítica;
Controle de Qualidade
Controle de Qualidade
Todas as etapas precisar ser controladas a risca, porém
existe etapas que precisam de atenção especial.
 A Fase Pré-analítica é responsável por cerca de 65% dos
erros laboratoriais, pois depende de fatores externos ao
próprio laboratório;
Controle de Qualidade
Variáveis da Fase Pré-analítica
Horário da Coleta
 Ritmo Circadiano;
 Sazonalidade;
 Atividade Física
Horário da Coleta
Exercícios Físicos
 Mobilização da água (equilíbrio hidro-eletrolítico);
 Aumento do Metabolismo;
Aumento da atividade enzimática;
Exercícios Físicos Intensos
 Hipoglicemia;
 Lactato – aumento em até 10x;
 Alteração do cortisol;
 Parâmetros urinários alterados;
 Creatinofosfoquinase (CK) – aumento em até 10x;
 Evitar exercícios intensos em no mínimo 24h antes do
exame.
Posição de Coleta
 Substâncias não filtráveis terão sua concentração
relativa elevada devido a alteração na mobilização dos
líquidos. Albumina, colesterol, triglicerídeos,
hematócrito, gemoglobina, drogas que se ligam às
proteínas e o número de leucócitos podem ser
aumentado de 8 a 10% da concentração inicial
Aplicação do Torniquete
 Aumenta a pressão intravascular;
 Hemoconcentração relativa;
 Glicólise anaeróbica;
 Aumento do Lactato;
 Redução do pH.
Hemólise
 É a presença anormal de hemoglobina no soro.
 Diferenciação – in vivo x in vitro
Hemólise in vivo
 Condição Clínica (doenças)
Hemólise in vitro
 Observar outro tubos para diferenciar;
 Interfere em diversos exames.
Hemólise
A desidrogenase Láctica é ummarcador de Hemólise.
Interferências da Hemólise
 Liberação de constituintes intracelulares
 Interferência óptica
 Hemoglobina: Variável, dependendo da concentração,
do tempo de armazenamento, do comprimento de onda
utilizado, do uso de “branco” etc.
Posso medir glicose mesmo em hemólise?
 A aferição da glicose sanguínea é feita por uma reação
enzimática que após uma reação gera uma cor
avermelhada.
 Ao colocar a amostra no espectrofotômetro, o mesmo
não conseguirá definir se quem absorveu foi a glicose
ou a hemoglobina, pois ambos apresenta coloração com
tamanho de ondas muito semelhantes.
Lipemia
 É a presença anormal de lipídios no soro.
 Culpado: Os triglicérides!
Intensidade
 Ligeiramente turvo
 Turvo
 Leitoso
Lipemia
 VLDL – lipoproteína de densidade muito baixa, uma
partícula muito grande que impede a passagem da luz
causando a turbidez.
 Qm – Quilomícron, outra lipoproteína que também
causa o efeito de turbação.
Diferenciação
 Repouso e refrigeração. Sou houver formação de nata a
lepemia foi causada por Qm, se a amostra continuar
totalmente turva a causa foi VLDL.
Interferências da Lipemia
Tipos de Interferência
 Interfere na homogeineidade
da amostra (fase lipídica e
fase aquosa).
 Pode ser resolvido aspirando
a camada lipêmica.
Óptica (turbidez)
 Interfere na leitura da
absorbância.
 Impedimento da ligação
antígeno-anticorpo.
Lipemia
 A lipemia pode ser causada pelo fato de o paciente não
ter feito o jejum, nestes casos faz-se um nova coleta em
outro dia mediante o jejum do paciente.
 Se o motivo não for o jejum não feito, dilui-se a amostra
com soro fisiológico, faz-se o teste e multiplica o
resultado pelo fato de diluição (1:20, 1:50 etc.).
 ATENÇÃO: LIPEMIA SEMPRE DEVE SER INDICADA NO 
LAUDO
Lipemia
Icterícia
 Aumento da bilirrubina (metabólito da filtragem dos
glóbulos vermlhos no fígado) no soro;
 Bilirrubina interfere linear e negativamente com a
dosagem de creatinina;
 Dificultam técnicas ópticas.
Autoanticorpos
 Todo ser humano tem uma fração mínima de
autoanticorpos que podem ser ativos contra suas
próprias proteínas;
 A presença desses autoanticorpos podem interferir em
exames que envolvem avaliar a ligação antígeno-
anticorpo, como o ELISA (ensaio imunoenzimático).
Autoanticorpos
 Pessoas com doenças autoimunes precisam ter seus
exames feitos por outr técnica que não os
imunoensaios.
 Para esses casos utiliza-se outras técnicas mais caras
como o HPLC (High-Performance Liquid
Chromatography).
Uso de Medicamentos e Suplementos
 Com o crescente aumento no uso de medicamentos,
suplementos e vitaminas, tais subtâncias podem causar
reações no corpo que podem gerar um falso
positivo/negativo ou influencias nos valores obtidos nos
exames.
 Exemplo: ácido ascórbico (vitamina C) é um potente
oxidante. Algumas reações bioquímicas utilizam o
princípio redox e a alta [ ] desse ácido pode influenciar
nas análises.
Revisão Rápida
A cor da tampa do tubo de escolha para os exames:
gasometria arterial, hemograma, glicose e tempo de
tromboplastina parcial, são, respectivamente:
 A) Lilás, cinza, verde e azul.
 B) Azul, cinca, vermelho e lilás.
 C) Verde, lilás, cinza, e azul.
 D) Lilás, vermelho, verde e azul.
Revisão Rápida
Qual do seguintes analitos sofre mais interferência pela
Hemólise?
 A) DHL.
 B) Potássio.
 C) TGO.
 D) TGP.
 E) Cálcio.
Revisão Rápida
A aplicação prolongada do tornique causa, exceto:
 A) Hemodiluição.
 B) Diminuição do pH.
 C) Aumento do Lactato.
 D) Hiperpotassemia.
 E) Todas as anteriores.
Revisão Rápida
Qual destes não é um fator pré-analítico a ser observado
no controle de qualidade?
 A) Jejum.
 B) Requisição.
 C) Transporte.
 D) Interpretação.
 E) Centrifugação.