Analises clinicas 2

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ANÁLISES CLÍNICAS II
Profa. Dra Anna Léa Barreto
IDENTIFICAÇÃO 
LABORATORIAL DE 
COCOS
TÍTULO TÍTULO TÍTULO TÍTULO 
COCOS GRAM POSITIVOS
¾ Staphylococcus
¾ Streptococcus
¾ Enterococcus
Staphylococcus
¾ Cocos gram positivos, aeróbios ou anaeróbios 
facultativos, catalase positivos, halotolerantes
¾ Presentes na pele e mucosas de seres humanos, 
outros mamíferos e aves
¾ Causadores de doenças sistêmicas potencialmente 
fatais, infecções cutâneas, vias urinárias e infecções 
oportunistas
¾ Espécies mais associadas a doença humana: 
Staphylococcus aureus (principal), S. epidermidis, S. 
saprophyticus, S. haemolyticus.
TESTES DIAGNÓSTICOS PARA Staphylococcus aureus
� Coloração de Gram - CGP
� Prova da catalase - positivo
� Prova da coagulase - positivo
� Teste da DNAse - positivo
http://www.interlabdist.com.br/internews/news_htm/in
ternews_142_4.htm
Staphylococcus
aureus
A catalase é uma enzima intracelular, encontrada na
maioria dos organismos, que decompõe o peróxido
de hidrogênio (H2O2) segundo a reação química:
2 H2O2 ĺ 2 H2O + O2.
9 97% das amostras de Staphylococcus aureus são coagulase-
positivas.
9 Para realização da prova usa-se plasma de coelho ou humano,
estéreis, frescos, congelados ou liofilizados e diluídos 1:5 em
solução fisiológica estéril.
9 Existe dois tipos de coagulase: livre e ligada. A mais aconselhada é a
prova de coagulase livre.
Staphylococcus
aureus
http://www.interlabdist.com.br/internews/news_htm/in
ternews_142_4.htm
Prova da coagulase
Staphylococcus
aureus
9 Acompanha a prova da coagulase para determinação
das espécies de Staphylococcus.
9 Verificar se o microrganismo possui a enzima
desoxiribonuclease, a qual degrada o ácido nucléico
(DNA).
9 Staphylococcus coagulase negativo são DNAse
negativo.
Prova da DNAse
T EST ES DI AGNÓST I COS PARA Staphylococcus COAGUL ASE 
NEGAT I VOS
¾ Prova da catalase - Positivo;
¾ Prova da coagulase - Negativo;
¾ Resistência a novobiocina - sensível
¾ Produção da enzima uréase - positivo
¾ Fermentação de açúcares - negativo
I D E N T I F I C Ad­O D O S P R O VÈV E I S P A TÏG E N O S
S t a p h y l o c o c c u s c o a gu l a se n e ga t i v a
- Pr o v a d a c a t a l a se P o si t i v o ;
- Pr o v a d a c o a gu l a se N e ga t i v o ;
- R e si strn c i a j n o v o bi o c i n a ;
- Pr o d uomo d a e n z i m a f o sf a t a se a l c a l i n a ;
- Pr o d uomo d a e n z i m a u r e a se ;
- D e sc a r b o x i l aomo d a o r n i t i n a ;
- F e r m e n t aomo d e ao~c a r e s M a n o se , m a n i t o l e t r e a l o se FermentaĕĆo
I D E N T I F I C Ad­O D O S P R O VÈV E I S P A TÏG E N O S
S t a p h y l o c o c c u s c o a gu l a se n e ga t i v a
- Pr o v a d a c a t a l a se P o si t i v o ;
- Pr o v a d a c o a gu l a se N e ga t i v o ;
- R e si strn c i a j n o v o bi o c i n a ;
- Pr o d uomo d a e n z i m a f o sf a t a se a l c a l i n a ;
- Pr o d uomo d a e n z i m a u r e a se ;
- D e sc a r b o x i l aomo d a o r n i t i n a ;
- F e r m e n t aomo d e ao~c a r e s M a n o se , m a n i t o l e t r e a l o se FermentaĕĆo
S. epidermidis
T EST ES DI AGNÓST I COS PARA Staphylococcus COAGUL ASE 
NEGAT I VOS
Streptococcus
¾ Cocos gram positivos, catalase negativo, anaeróbios 
facultativos, alguns crescem apenas em atmosfera rica 
capnofílica
¾ Diferenciação das espécies por: Propriedades 
sorológicas (Grupos de Lancefield) : A a H, K a M e O a V 
¾ Streptococcus pyogenes, S. agalactie e S. pneumoniae
� Observação de padrões de hemólise em ágar-sangue
E-hemolítico ʹ hemólise total 
D-hemolítico ʹ hemólise parcial
J- hemolítico ʹ ausência de hemólise
TESTES DIAGNÓSTICOS PARA Streptococcus
TESTES DIAGNÓSTICOS PARA Streptococcus pyogenes
%DFWHULRVFRSLD�GLUHWD�ĺ�&RFRV�*�
Cadeia longa 
7HVWH�GD�&DWDODVH��-)
7HVWH�GD�%DFLWUDFLQD��6�
7HVWH�GR�3<5�ĺ����Presença da ȕ-
hemólise
estafilococos
TESTES DIAGNÓSTICOS PARA Streptococcus pyogenes
Detecção direta de antígenos de 
S. pyogenes a partir de swab de orofaringe
TESTES DIAGNÓSTICOS PARA Streptococcus pyogenes
TESTES DIAGNÓSTICOS PARA Streptococcus agalact ie
%DFWHULRVFRSLD�GLUHWD�ĺ�&RFRV�*�
Cadeia longa 
7HVWH�GD�&DWDODVH��-)
Teste GH�&$03���
Presença da ȕ-
hemólise
estafilococos
TESTES DIAGNÓSTICOS PARA Streptococcus pneumoniae
%DFWHULRVFRSLD�GLUHWD�ĺ�&RFRV�*�
Cadeia longa 
7HVWH�GD�&DWDODVH��-)
Prova da optoquinaĺ�
sensível
Presença da D-
hemólise
estafilococos Bile solubilidade ± (+)
IDENTIFICAÇÃO 
LABORATORIAL DE 
BACILOS GRAM 
NEGATIVOS
¾ Identificação de bacilos gram negativos
¾Enterobacteriaceae
Características gerais da família
� Fermentadores de glicose
�Catalase positivo
�Oxidase negativo
�Anaeróbios facultativos
�Reduzem nitrato a nitrito
Características gerais da família
� Fermentadores
�Oxidase positivo
�Anaeróbios facultativos
¾Vibrionaceae
¾ Identificação de bacilos gram negativos
Não-Fermentadores
¾Pseudomonadaceae
Características gerais da família
� Aeróbios não-fermentadores
�Utillizadores da via Entner-Doudoroff
Não-Fermentadores
¾Moraxellaceae
¾Xanthomonadaceae
Família 
Enterobacteriaceae e 
BGNNF
Meios de semeadura primária
https://www.biomedicinapadrao.com.br/2013/02/agar-emb-eosin-methylene-blue.html
Ágar 
MacConkey
Ágar EMB
XLD (XILOSE LISINA DESOXICOLATO)
Meios de semeadura primária
Hektoen Entérico (HE)
Família 
Enterobacteriaceae e 
BGNNF
 Procedimento laboratorial 
EspĠcime Clşnico 
Mac-Conkey Agar SS Tetrationato ou 
Selenito 
Protocolos 
especiais 
Vibrio 
Campylobacter 
Yersinia 
S. aureus 
IdentificaĕĆo + Sorologia + TSA 
Família Enterobacteriaceae
Meios de identificação
TSI ;͞dƌŝƉůĞ Sugar /ƌŽŶ͟Ϳ
9 Produção de gás a partir da glicose;
9 Fermentação de glicose, lactose e sacarose;
9 Produção de H2S.
https://www.laborclin.com.br/wp-content/uploads/2021/01/172412-%C3%81GAR-TSI.pdf
Família 
Enterobacteriaceae e 
BGNNF
^/D�;͞^ƵůĨĞƚŽ͕�indol͕�ŵŽƚŝůŝĚĂĚĞ͟Ϳ
9 Produção de indol - Presença da enzima tripofanase
quebrando o triptofano com producão de gás indol. 
Motilidade;
9 Produção de H2S à partir da quebra do tiossulfato de 
sódio
Meios de identificação
https://www.metaquimica.com/meio-sim-500g-himedia-m181.html
Família 
Enterobacteriaceae e 
BGNNF
 PROCEDIMENTO LABORATORIAL 
 IdentificaĕĆo dos principais patſgenos: 
1- Famşlia Enterobacteriacea 
1.2- SIM 
- ProduĕĆo de indol Presenĕa da enzima triptofanase quebrando o triptofano com 
produĕĆo de gĄs indol. Esse reage com o reagente p-dimetil-amino-benzaldeşdo dando 
uma coloraĕĆo rosa 
- Motilidade; 
- ProduĕĆo de H2S ă partir da quebra do tiossulfato de sſdio. 
Indol (+) 
H2S (+) 
Citrato de Simmons
9 Veriricar a utilização do citrato como única fonte de 
carbono pelo microrganismo;
9 A viragem do meio para azul se deve à sua alcalinização 
devido à liberação de grupo amina pela utilização do 
citrato.
Meios de identificação
https://www.renylab.ind.br/wp-content/uploads/2018/05/%C3%81GAR-CITRATO.pdf
Família 
Enterobacteriaceae e 
BGNNF
Degradação da uréia
9 Verificar a presença da enzima urease, a qual degrada a
uréia levando a uma alcalinização do meio de cultura;
9 O meio de cultura utilizado é o Rustigianii & Stuart (Caldo)
ou Meio de Christensen (ágar)
Família 
Enterobacteriaceae e 
BGNNF
Meios de identificação
condalab.com/int/en/dehydrated-culture-media/1353-14957-urea-agar-base-
christensen-iso.html
Sistema de identificação miniaturizado
API
Outras provas de identificação
Prova da oxidase
9 Teste-chave para diferenciar entre as famílias de
Pseudomonadaceae (Oxidase positiva) e Enterobacteriaceae
(Oxidase negativa)
9 Identificação de muitas outras bactérias, aquelas que têm de
usar o oxigênio como o aceitador de elétrons final em
respiração aeróbica.
Família 
Enterobacteriaceae e 
BGNNF
https://telelab.aids.gov.br/moodle/pluginfile.php/22086/mod_resource/content/1/manualNeisseria.pdf
OUTROS BACILOS GRAM 
NEGATIVOS
� BGN, curvos com um flagelo polar;
� Gastrenterite,septicemia, meningite;
� Difícil isolamento ± Meios seletivos com sangue ou carvão, em microaerofilia
(5-7% O2 ) e capnofílicos (5 ± 10% CO2), crescimento lento (48 a 72 horas)
� Meio de Skirrow, Caldo de Enriquecimento Campylobacter, 
www.cip.ukcentre.com
9Não fermentadores
9Oxidase positiva
9Catalase positivo
9Reduz nitrato
9Urease negativo
9 incubação 42º C
Campylobacter jejuni
https://www.eolabs.com/product/pp0110-campylobacter-
selective-skirrow-agar/
9 Oxidase negativo
9 Lisina descarboxilase positivo
9 DNAse positivo 
9 Oxidação de glicose e maltose - positivo