INTRODUÇÃO À PATOLOGIA CLÍNICA

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Patologia Clínica Veterinária
intrOdução à patologia clínica
· 
· Patologia (grego) => Pathos- doença; Logos- Estudo;
· Ciência que estuda as causas das doenças através de exames laboratoriais:
· Hematologia
· Bioquímico
· Urinálise
· Líquidos cavitários
· Patogenicidade: nível de danos
· Difusão do agente: transmissão 
Biossegurança
· Manipulação segura de microrganismos
· Técnicas e construção de laboratórios
· Proteção do homem, animais e meio ambiente
Classificação dos Agentes Biológicos (AB):
· Importância do risco de infecção ao homem
· Patogenicidade do agente
· Aspectos econômicos
· Difusão do agente patogênico
· Disponibilidade de profilaxia e tratamento
· Proteção ocupacional
Níveis de biossegurança (NBS) 
· Nível de contenção necessário para permitir o trabalho de forma segura e com risco mínimo para o operador e para o ambiente.
Nível 1 (NBS 1):
· AB classe 1. Baixo risco individual e para comunidade.
· Ex.: Hepatite infecciosa canina
· AB: Agentes Biológico
· Equipamento de proteção individual (EPI)
· Proteção da saúde e integridade física do trabalhador
Nível 2 (NBS 2):
· AB classe 2. Moderado risco individual e baixo risco para comunidade
· Tratamento e profilaxia disponíveis e o risco de difusão é limitado
· Ex. Salmoneloses, Candida albicans, Campylobacter spp., E. coli, leptospirose, listeria, Leishmanias
· Equipamento de segurança:
· Superfícies facilmente laváveis
· Bancadas impermeáveis
· Cabines de segurança biológica
· Iluminação adequada
· Descartes de resíduos adequadamente
· Boas práticas laboratoriais
· Portas trancáveis 
· Pias e lava-ólhos
· EPI guardados separadamente das roupas comuns
· Uso de calçados fechados
Nível 3 (NBS 3):
· AB classe 3. Alto risco individual e baixo risco para comunidade
· Tratamento e/ou medidas preventivas usualmente disponíveis
· Ex. Vírus rábico, brucelose, febre amarela, HIV, Mycobacterium tuberculosis, M. bovis, Mormo.
· Cabine de Segurança biológica
· Prédio separado ou local isolado 
· Porta dupla
· Fluxo de ar direcional para dentro do laboratório 
· Cabines de segurança para equipamentos geradores de acrosol
· Portas trancadas
· Parede, piso e teto impermeáveis e de fácil desinfecção
Nível 4 (NBS 4):
· AB classe 4. Alto risco individual e para comunidade
· Patógeno que causa sérias doenças, é facilmente transmissível
· Tratamento e medidas profiláticas não estão disponíveis
· Ex. Varíola, febres hemorrágicas (Ebola), Aftosa*
· Efluentes líquidos descontaminados por método eficaz e certificados antes do descarte
· Sistema de comunicação entre o interior e exterior do laboratório
· Princípio da “Célula isolada” ou “Isolamento completo”
Regras básicas para trabalho em laboratório (FIOCRUZ)
· Considerar todo material biológico como infeccioso
· Trabalhar com atenção e sem tensão
· Sinais de aviso de riscos
· Todo acidente deve ser relatado e os cuidados médicos providenciados
· Todo pessoal de laboratório deve:
· Conhecer as regras
· Conhecer os riscos
· Ser treinado
· Evitar trabalhar sozinho
· Manter o Laboratório limpo e arrumado
· Limitar o acesso
· USAR ROUPAS PROTETORAS E EPI
· Não aplicar cosméticos, comer, beber, fumar...
· Lavar as mãos e usar luvas
· Não utilizar vidrarias quebradas
· Não recapear agulhas
· Nunca pipetar com a boca
· Descontaminar a superfície de trabalho
Coleta de Sangue
· Sistemas de coleta
· Anticoagulantes
· Local de coleta
· Cuidados com o paciente
· Cuidados com a amostra
· Identificação e remessa
Sistemas de coleta
· Punção venosa
· Agulha e seringa
· Tubos capilares
· Vacutainer e Monovet
· Tubos de coleta:
· EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético): 1gota / 5 mL ou 1mg/mL
· Citrato de Na: utilizado em transfusão de sangue
· Contenção do animal
· Antissepsia do local – Álcool 70%
· Assepsia: superfícies inanimadas
· Antissepsia: superfícies corporais
· Tirar torniquete antes de tirar a agulha
· Locais de coleta de sangue:
· Caninos: venopunção cefálica, jugular, femoral e safena
· Felinos: femoral, jugular
· Coelhos: marginal da orelha, cardíaca.
· Grandes animais: coccígea, jugular, orelha
· Aves: veia braquial e jugular
· Suínos: veia mamária, jugular e marginal da orelha
· O sangue de algumas aves (avestruzes, emas, mutuns) e de alguns répteis (iguanas, jabutis) sofre hemólise intensa em contato com EDTA, nestes casos usar heparina (tubo de tampa verde) ou citrato (tubo de tampa azul). A heparina interfere no processo de coloração das células e gera artefatos, sendo imprescindível a confecção de esfregaço sanguíneo a fresco quando solicitado hemograma.
Cuidados com a amostra
· Correta relação anticoagulante /sangue
· Anticoagulante correto
· Evitar hemólise, lipemia
· Tubo com anticoagulante – Homogeneizar imediatamente após coleta – por Inversão
· Remeter o mais rápido possível ao laboratório – 1h
· Refrigerar a amostra
· Enviar em até 6 horas após a coleta
· Transferir o sangue pela lateral do tubo, para não gerar hemólise
· Identificação do Tubo
· Preencher até o limite indicado
· Manter sobre refrigeração de 2º-8ºC – NÃO CONGELAR
· Tubo sem anticoagulante – NÃO Homogeneizar
· Hemólise – Soro inviável para os testes bioquímicos e Imunodiagnósticos (sorológicos)
· Pode congelar: o soro e o plasma, não colocar muito porque quando congela aumenta
· Não pode congelar: o coágulo e as células
Composição sanguínea
· Parte Sólida: glóbulos vermelhos, glóbulos brancos e plaquetas
· Parte Líquida: água, sais minerais, vitaminas, proteínas, lipídeos e eletrólitos
· Plasma: é preparado para a coegulação do sangue e com função no sistema imunológico
· Soro: é o plasma sem fibrinogênio, liberado após a coagulação do sangue
· Fibrinogênio: é um fator da coagulação (fator I), uma proteína necessária para a formação do coágulo. É produzido no fígado e liberado na circulação junto com outros fatores. É desencadeado quando há lesão de um vaso sanguíneo, processo chamado hemostasia, que contém o sangramento.
Hematopoiese
· Leucopoiese: formação e desenvolvimento das células brancas do sangue, os leucócitos
· Eritropoiese: produção e maturação de hemácias
· Megacariocitopoiese: produção de plaquetas
· Animais jovens (medula de todos os ossos)
· Animais adultos (ossos longos, esterno, ossos chatos)
· Fígado e baço (Hematopoiese extra medular)
Sistema hematopoietico-lítico
· Hematopoiese X Hemocaterese: equilíbrio entre produção e destruição, mantém células sanguíneas dentro dos valores normais
· Estimulação da M.O.: aumento da demanda de leucócitos, diminuição do número de hemácias, número de plaquetas
Órgãos e tecidos do sistema hematopoietico-lítico e suas funções
· Medula óssea: hematopoiese, estoque de Fe
· Timo: diferenciação dos linfócitos T
· Baço: armazenamento de linfócitos B, síntese de anticorpos, reservatório de hemácias e plaquetas, destruição de hemácias, estoque de Fe
· Sistema mononuclear fagocítico: destrói células sanguíneas alteradas, degradação da hemoglobina, estoque de Fe
· Fígado: estoque de vit. B12 e Fe, produção de proteínas e fatores de coagulação, conversão de bilirrubina livre em bilirrubina conjugada
· Rins: produz eritropoetina (glicoproteína que atua na estimulação e no controle de produção das células vermelhas do sangue), elimina parte da bilirrubina
· Sistema mononuclear fagocitário (SMF) responsabiliza-se por grande parte da imunidade celular, atuando na defesa contra microorganismos, incluindo bactérias, fungos, vírus, parasitas e corpos estranhos, bem como na remoção de células mortas, partículas inaladas, entre outros (macrófagos e seus precursores, fagócitos, células de kupffer, histiócitos, células dendríticas, células de langerhans e microglia).
Glóbulos vermelhos
· Transporte de hemoglobina, proteína que carrega oxigênio e dióxido de carbono
Leucócitos
· Neutrófilos: responsáveis pela proteção contra infeções bacterianas. Quando ocorre uma infeção bacteriana a medula é estimulada, produzindo mais neutrófilos para eliminarem (fagocitarem) os agentes infeciosos.
· Eosinófilos: responsáveis pela defesa contra parasitas e pelo fenómeno da alergia.
· Basófilos: permitem a dilataçãodos vasos sanguíneos.
· Linfócitos: responsáveis pela produção de anticorpos. Mais envolvidos na resposta à infeção por vírus. Existem os linfócitos T e os linfócitos B.
· Monócitos: responsáveis pelo fenómeno de fagocitose de microrganismos e destruição de células mortas.