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Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _02_ DATA: __19__/_03__/__2022__ RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ANÁLISE AMBIENTAL DADOS DO (A) ALUNO (A): Nome:GUNAR VINGRE DA SILVA MOTA MATRÍCULA:01325855 Curso:BIOMEDICINA Polo:BELEM Professor (a) orientador (a):ANDREI SANTOS Orientações gerais: O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e concisa; O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema; Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado); Tamanho: 12; Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm; Espaçamento entre linhas: simples; Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). Tema de aula: TÉCNICA DOS TUBOS MÚLTIPLOS E CONTAGEM PADRÃO DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS Relatório: 1. TÉCNICO DOS TUBOS MÚLTIPLOS: COLIFORMES TERMOTOLERANTES A. Explicar qual a importância da pesquisa das bactérias termotolerantes e o que elas indicam numa análise microbiológica da água A técnica de tubos múltiplos é a mais tradicional para a análise de coliformes (totais ou termotolerantes) e E.coli. Esta metodologia permite a quantificação por “número mais provável” (NMP) de microorganismos e é dividida em duas fases sucessivas, uma presuntiva e outra confirmativa. E esta última somente é realizada se houver crescimento positivo na etapa presuntiva. Coliformes fecais, atualmente chamados de termotolerantes, segundo a resolução nº 375 de 17 de março de 2005, CONAMA, são: “Bactérias gram negativas, em forma de bacilos, oxidase negativas, caracterizadas pela atividade da enzima galactosidase. Podem crescer em meios contendo agentes tenso ativos e fermentar a lactose nas temperaturas de 44º - 45ºC, com produção de ácido, gás e aldeído. Além de estarem presentes em fezes humanas e de animais homeotérmicos, Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _02_ DATA: __19__/_03__/__2022__ ocorrem em solos, plantas ou outras matrizes ambientais que não tenham sido contaminados por material fecal.” Entre as bactérias desse grupo, podemos citar a Escherichia coli e algumas bactérias do gênero Klebsiela, Citrobacter e Enterobacter. A E. coli é a única que vive no intestino humano. Vale destacar que a E. coli não causa problemas à saúde quando está no intestino, pois é uma bactéria normal nesse local. Entretanto, algumas variantes podem desencadear distúrbios gastrointestinais caracterizados por diarreia aquosa. Além disso, essa bactéria está relacionada com infecções urinárias, pneumonias e meningites. Sendo assim, os coliformes termotolerantes, mais especificamente a E. coli, são usados frequentemente para avaliar a qualidade da água e indicar a contaminação por fezes. Essa avaliação é importante, pois permite a prevenção de doenças que são transmitidas pelas fezes, como algumas verminoses. B. Qual o meio de cultura é utilizado para a realização dessa técnica? Todos os tubos foram incubados a 37°C durante 24 a 48 horas e posterior identificação dos que tiverem crescimento (positivo) de coliformes totais, resultado identificado pela ocorrência de reação ácida (coloração amarelada) ou produção de gás (retida no tudo de Durhan). Os meios de culturas utilizados foram o Caldo E. Coli e o Caldo Lactosado. Figura 1. Caldos utilizados nos testes de tubos múltiplos. Sendo o Caldo EC utilizado para verificação de reação de coliformes (esquerda) e o caldo Lactosado para verificação de produção de gás (direita). C. Qual a principal bactéria representante desse grupo? A principal bactéria objetivada nestes testes foi verificar os coliformes total e a reação com diferentes meios devido à presença de Escherichia coli. Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _02_ DATA: __19__/_03__/__2022__ 2. CONTAGEM PADRÃO DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS A. Descrever as etapas para realização dessa prática Qual o meio de cultura é utilizado para a realização dessa técnica? • Primeiramente foram anotados nas placas de Petri os respectivos códigos das amostras. • Após, agitamos o frasco com a amostra de água 25 vezes para homogeneizar, como a amostra era proveniente de uma companhia de água local, o professor não achou necessário diluir o material coletado. • Em seguida, com a utilização da pipeta automática, inoculamos 1mL da amostra em uma das placas de Petri e despejamos uma parte do agar padrão para contagem na placa. • Homogeneizamos a amostra realizando movimentos suaves em “8” com a placa durante alguns minutos. • Inoculamos em forma de estrias a amostra dos tubos no Agar com uma alça de platina. • Esperamos o ágar solidificar, e foi levado a incubação por 48 h à 35ºC. • B. Explicar qual a importância da pesquisa das bactérias heterotróficas e o que elas indicam numa análise microbiológica da água. A contagem de bactérias heterotróficas, genericamente definidas como microrganismos que requerem carbono orgânico como fonte de nutrientes, fornece informações sobre a qualidade bacteriológica da água de uma forma ampla. O teste inclui a detecção, inespecífica, de bactérias ou esporos de bactérias, sejam de origem fecal, componentes da flora natural da água ou resultantes da formação de biofilmes no sistema de distribuição. Servindo, portanto, de indicador auxiliar da qualidade da água, ao fornecer informações adicionais sobre eventuais falhas na desinfecção, colonização e formação de biofilmes no sistema de distribuição. C. Qual seria a medida de tratamento para uma análise de água na qual essa contagem estaria acima do valor padrão? A portaria nº 2914/2011 do Ministério da Saúde recomenda que a contagem de bactérias heterotróficas não ultrapasse o limite de 500 UFC/mL em amostras de água. Caso os valores das amostras coletadas em diferentes regiões ou locais estejam acima do limite estipulado, concluiremos que os locais onde foram coletadas as amostras se caracterizam como impróprios para captar água destinada ao consumo humano, sendo necessária a construção de estações de tratamento de água para tratar a água que chega nesta região. Relatório de Aulas Práticas em EAD AULA _02_ DATA: __19__/_03__/__2022__ Referências CONSELHO NACIONAL DO MEIO AMBIENTE-CONAMA. RESOLUÇÃO CONAMA Nº 357, DE 17 DE MARÇO DE 2005. Retifica a Resolução CONAMA no 375/06 – Define critérios e procedimentos para o uso agrícola de lodos de esgoto gerados em estações de tratamento de esgoto sanitário e seus produtos derivados, e dá outras providências. Acessado em: 25 de março de 2022. Disponível em: <http://pnqa.ana.gov.br/Publicacao/RESOLUCAO_CONAMA_n_357.pdf> Brasil. Fundação Nacional de Saúde. Manual prático de análise de água / Fundação Nacional de Saúde – 4. ed. – Brasília: Funasa, 2013. 150 p. Acessado em: 25 de março de 2022. Disponível em: <http://www.funasa.gov.br/site/wp-content/files_mf/manual_pratico_de_analise_de_agua_2.p df> Domingues et al. CONTAGEM DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS NA ÁGUA PARA CONSUMO HUMANO: COMPARAÇÃO ENTRE DUAS METODOLOGIAS. Saúde, Santa Maria, vol 33, n 1: p 15-19, 2007. http://pnqa.ana.gov.br/Publicacao/RESOLUCAO_CONAMA_n_357.pdf http://www.funasa.gov.br/site/wp-content/files_mf/manual_pratico_de_analise_de_agua_2.pdf http://www.funasa.gov.br/site/wp-content/files_mf/manual_pratico_de_analise_de_agua_2.pdf Relatório de Aulas Práticas em EAD
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