Naftoquinonas - Apresentação de artigo

Prévia do material em texto

Discente: Daiana Mendes
INTRODUÇÃO
As naftoquinonas são compostos orgânicos utilizados como corantes 
cujas cores variam do amarelo ao vermelho. 
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Possuem estrutura cíclica derivada do naftaleno, 
com dois anéis aromáticos fundidos e dois 
grupos carbonila em um dos anéis. 
● 1,4-naftoquinona
● Atividades antibacteriana, 
antitumoral, antifúngica e 
antimalárica. 
● 1,2-naftoquinona
● É um poluente 
ambiental com 
potencial inflamatório 
e carcinogênico. 
2
INTRODUÇÃO
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Gênero Sinningia (Gesneriaceae) → + 70 espécies pela América do Sul, sendo 
75 nativas do Brasil. 
3
Principais constituintes químicos: glicosídeos-cafeoil, triterpenos, 
sesquiterpenos, flavonoides, antraquinonas, naftoquinonas e derivados.
S. reitzii
● Subarbusto perene com tubérculos, endêmico no Brasil; 
● Mede 30-120 cm de altura e tem folhas verde-escuras com 
nervuras vermelhas; 
● Produz flores magentas de janeiro a julho; 
● S. reitzii “SC” , ocorre em Santa Catarina, e S. reitzii “PR”, com 
alguns registros em São Paulo e outro no Paraná. 
INTRODUÇÃO
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
4
S. reitzii “PR” 
ATIVIDADES 
ANTIINFLAMATÓRIA E 
ANTINOCICEPTIVA
CITOTOXICIDADE CONTRA 
LINHAS TUMORAIS PC3 E 
HELA. 
8-hidroxidesidrodunniona
6,7-dimetoxidunniona
OBJETIVO
Estudar os constituintes químicos menos polares de tubérculos de S. reitzii “SC”, que ainda não 
foram investigados.
1
Densidade óptica foi medida usando um 
espectrofotômetro Synergy 2.
5
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
2
MATERIAIS E MÉTODOS
As rotações ópticas foram medidas 
em CHCl3 em um polarímetro JASCO 
PTC-203.
MATERIAIS E MÉTODOS
3
Os espectros de UV foram 
obtidos em CHCl3 em um 
espectrofotômetro UV-2401PC.
6
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
4
Espectros de dicroísmo circular (CD) foram 
registrados em um espectrômetro Jasco 
J-815. 
5
Os espectros IV foram registrados 
em um espectrofotômetro Bruker 
Vertex 70/70v FTIR no intervalo de 
4000-500 cm-1. 
Espectros de RMN unidimensional (1H, 13C) e bidimensional foram 
registrados em espectrômetros Bruker observando 1H a 400 ou 600 MHz, 
e 13C a 100 ou 150 MHz. Solvente: Clorofórmio deuterado (CDCl3).
7
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
6
MATERIAIS E MÉTODOS
MATERIAIS E MÉTODOS
7
Dados de espectrometria de massa de 
ionização por eletrospray de alta 
resolução foram obtidos em um 
espectrômetro de massa Bruker 
Micromass; 
8
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
8
As separações por HPLC foram realizadas em 
um aparelho Waters equipado com detector 
PDA e uma coluna Nucleosil 100-5 C18 
semi-preparativa; 
MATERIAIS E MÉTODOS 
9
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Os compostos foram visualizados por exposição sob luz UV254/365 e pulverização com 5% de 
H2SO4 em solução de etanol, seguido de aquecimento em placa quente.
Separações cromatográficas de coluna (CC) foram realizadas em sílica gel 60 (Merck, malha 
230-400), enquanto que, em CCD, foram utilizadas placas de sílica gel pré-revestida GF254.
Todos os solventes eram de grau analítico ou espectroscópico, e as misturas de solventes 
foram preparadas como v/v. 
MATERIAL VEGETAL
10
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Tubérculos de Sinningia reitzii foram coletados em Corupá, 
Estado de Santa Catarina, Brasil, em novembro/2018. A 
planta foi identificada por Mauro Peixoto, e um espécime 
voucher foi depositado no Herbário da Universidade 
Federal do Paraná. 
EXTRAÇÃO E ISOLAMENTO
11
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
53,2 g de tubérculos secos e em pó da planta foram extraídos com CH2Cl2 (quatro 
extrações seguidas utilizando 500 mL de solvente). O solvente foi removido sob 
pressão reduzida, restando o extrato de diclorometano (387,1 mg). Uma alíquota de 
50 mg deste foi reservada.
O restante do extrato foi submetido a CC e eluído com misturas de Hex:EtOAc, 
EtOAC e MeOH, rendendo 10 frações.
A fração F4 (Hex:EtOAc 7:3) foi purificada por HPLC semi-preparativa utilizando 
H2O:MeCN 40:60 como fase móvel. A amostra foi dissolvida em 4 mL de MeCN, e 
20 alíquotas de 200 µL foram injetadas. 
EXTRAÇÃO E ISOLAMENTO
12
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
A fração F7 (17,6 mg, eluído com Hex:EtOAc 
1:1) foi purificada por HPLC 
semi-preparativa (H2O:MeCN 50:50). A 
amostra foi dissolvida em 2 mL de MeCN e 
10 alíquotas de 200 µL foram injetadas 
para gerar: 
● Composto 1 → 3,2 mg; TR = 17.78 min
● Composto 3 → 1,1 mg; TR = 18.93 min
Fração F4:
● Composto 3 → 2,1 mg; TR = 11.1 min
● Composto 2 → 0,8 mg; TR = 17.4 min
● Composto 5 → 1,7 mg; TR = 18.50 min
● Composto 4 → 1 mg; TR = 20.39 min
A fração F5 (33,3 mg eluído com Hex:EtOAC 
7:3) rendeu o composto 3.
ATIVIDADE ANTIOXIDANTE 
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Atividade antioxidante: capacidade de 
absorção de radicais de oxigênio (ORAC) 
com fluoresceína (FL) como sonda 
fluorescente, e 2,2'-azobis 
(2-amidiopropano) dicloridrato como fonte 
de radical livre.
Diluições das amostras (12,5-200 µM) 
foram preparadas em tampão fosfato. 
Trolox foi utilizado como padrão nas 
mesmas concentrações.
Ácido cafeico, ác. clorogênico e quercetina 
foram os controles positivo. 
A leitura foi realizada com um filtro 
fluorescente em um leitor microplaca, 
monitorando a reação a 37 oC a cada 2 
min por 70 min.
1
2
3
 Os compostos 4 e 5 já haviam sido previamente identificados e reportados em S. reitzii “PR”. 
RESULTADOS E DISCUSSÃO
14
O extrato de diclorometano de tubérculos de S. reitzii “SC” rendeu duas novas 
naftoquinonas (1-2) e três compostos conhecidos:
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
5,5,6-dihydroxy-7-methoxy-Ⲁ-dunniona 8-hydroxy-6,7-dimethoxy-Ⲁ-dunniona
6,8-dihydroxy-7-methoxy-Ⲁ-dunniona 5-hydroxy-6,7-dimethoxy-Ⲁ-dunniona 6,8-dihydroxy-7-methoxy-2-O-methyldunniol
15
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
COMPOSTO 1
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Sólido 
laranja
C16H16O6
5,5,6-dihydroxy-7-methoxy-
Ⲁ-dunnione
Nove índices de 
deficiência de H
RESULTADOS E DISCUSSÃO
16
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Estiramento O-H
Estiramento C-H sp3
Estiramento C=O
Deformação 
CH2 
Figura: Espectro IV (KBr) do composto 1. 
Estiramento C-O
Deformação CH3
RESULTADOS E DISCUSSÃO
17
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Figura: Espectro HRMS do composto 1. 
RESULTADOS E DISCUSSÃO
18
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
RESULTADOS E DISCUSSÃO
19
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
CDCl3
RESULTADOS E DISCUSSÃO
20
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
𝞹 → 𝞹*
n → 𝞹*
𝞹 → 𝞹* R-O-CH3: n → 𝞂*; ƛ < 200 nm. 
R-OH: n → 𝞂*; ƛ = 180 nm. 
21
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
COMPOSTO 2
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Sólido 
amarelo
C17H18O6
8-hydroxy-6,7-dimethoxy-
Ⲁ-dunnione
Nove índices de 
deficiência de H
RESULTADOS E DISCUSSÃO
22
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Estiramento C-H sp3
Estiramento C=O
Deformação CH2 e 
CH3
Figura: Espectro IV (KBr) do composto 2. 
Estiramento C-O
RESULTADOS E DISCUSSÃO
23
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADODE SANTA CATARINA”
Figura: Espectro HRMS do composto 2. 
RESULTADOS E DISCUSSÃO
24
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
RESULTADOS E DISCUSSÃO
25
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
RMN 13C do composto 2
RESULTADOS E DISCUSSÃO
26
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
R-O-CH3: n → 𝞂*; ƛ < 200 nm. 
R-OH: n → 𝞂*; ƛ = 180 nm. 
𝞹 → 𝞹*
n → 𝞹*
𝞹 → 𝞹*
RESULTADOS E DISCUSSÃO
27
Os compostos isolados apresentam ao 
menos uma hidroxila fenólica, o que lhes 
confere uma boa atividade antioxidante. 
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
Atividade antioxidante 
Fonte: WINIEWSKI, Vanessa et al. (2021)
Composto 1: hidroxilas em 
relação orto → maior 
atividade antioxidante 
Compostos 3 e 5: 
hidroxilas em relação meta 
→ menor atividade 
antioxidante
CONCLUSÃO
28
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
● S. reitzii “PR” e “SC”, apesar da diferença geográfica, produzem naftoquinonas como 
os principais constituintes menos polares. 
● No entanto, a espécie predominante em São Paulo e no Paraná produz um número 
maior desses compostos, nos quais as atividades antiinflamatória e citotóxica são 
preponderantes. 
● Por sua vez, de S. reitzii “SC” foi possível isolar naftoquinonas com alto poder 
antioxidante que ainda não haviam sido relatadas. 
● Isso confirma que a variação geográfica altera os compostos produzidos pelas 
espécies. 
REFERÊNCIAS
29
“NAFTOQUINONAS ANTIOXIDANTES DE Sinningia reitzii DO ESTADO DE SANTA CATARINA”
● LÓPEZ, Lluvia Itzel; LEYVA, Elisa; GARCÍA DE LA CRUZ, Ramón Fernando. Las 
naftoquinonas: más que pigmentos naturales. Revista mexicana de ciencias 
farmacéuticas, v. 42, n. 1, p. 6-17, 2011.
● PAVIA, Donald L. et al. Introdução à espectroscopia: Tradução da 4ª edição 
norte-americana. São Paulo: Cengage Learning, 2010.
● WINIEWSKI, Vanessa et al. Antioxidant naphthoquinones of Sinningia reitzii from 
Santa Catarina State, Brazil. Química Nova, v. 44, p. 284-287, 2021.
. 
SONHOS EXIGEM PACIÊNCIA NO RESULTADO E 
DEDICAÇÃO NO PROCESSO :) 
OBRIGADO!