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Assunto 01 - Tipos de amostras utilizadas no laboratório de bioquímica

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Amostras Biológicas para 
Bioquímica Clínica
Profª Vanda Santana
TÓPICOS ABORDADOS
• Soro, plasma e demais amostras; 
• Contextualização pré-analítica no laboratório de 
bioquímica.
ASSUNTO 01 
Tipos de amostras utilizadas no 
laboratório de bioquímica
Sangue
 Sangue: Suspensão de células em um líquido rico em
proteínas e sais.
Sangue
oObtenção de sangue: punção venosa, venipunção ou
flebotomia.
o Processos de obtenção do sangue:
✓ Punção venosa
✓ Punção arterial
✓ Punção de pele
• Fossa antecubital
• Veias basílicas medianas e cefálicas*
são as mais frequentemente 
puncionadas.
Sangue Venoso
*mais propensa à formação de hematomas e 
pode ser dolorosa ao ser puncionada. 
Locais de Escolha para Venopunção
• No dorso da mão, o arco venoso dorsal é o mais
recomendado (mais calibroso)
Sangue Venoso
Amostras para determinações 
Bioquímicas
SoroSangue total 
Plasma sanguíneo
AMOSTRAS PARA DETERMINAÇÕES BIOQUÍMICAS
Sangue Total
Obtenção de Sangue Total
o Colher em tubo com anticoagulante
o Manter a amostra homogênea - através de 
equipamentos específicos ou manualmente.
Homogeneizador de sangue
Homogeneizar o sangue
Sangue total
✓ Solução aquosa no qual os elementos do
sangue encontram-se em suspensão.
✓ Contém fibrinogênio.
✓ Glicose
✓ Coletar com anticoagulante.
✓ Obtido após centrifugação
AMOSTRAS PARA DETERMINAÇÕES BIOQUÍMICAS
Plasma sanguíneo
Obtenção de plasma:
1. Colher em tubo COM anticoagulante.
2. Centrifugar a 3.500 rpm/ 10min.
3. Separar o plasma das hemácias, por meio de pipeta, 
evitando misturar e aspirar as hemácias. 
AMOSTRAS PARA DETERMINAÇÕES BIOQUÍMICAS
Plasma sanguíneo
✓ Parte líquida do sangue;
✓ Não contém fibrinogênio.
✓ Coletar SEM anticoagulante → coagulação
✓ Centrifugar após a coagulação
AMOSTRAS PARA DETERMINAÇÕES BIOQUÍMICAS
Soro sanguíneo
http://www.google.com.br/url?sa=i&source=images&cd=&cad=rja&docid=4sy3Rl2DdAF9CM&tbnid=n0xcP8crFyMSeM:&ved=0CAgQjRwwADgf&url=http%3A%2F%2Flabmedvet.blogspot.com%2F2011%2F09%2Fanticoagulantes.html&ei=ZIchUenCH6Wn4ATzloGQBQ&psig=AFQjCNE0qdaPblJUIzc3BRiRLhk6Q5s8dA&ust=1361238244549102
Obtenção do soro sanguíneo:
1. Colher em tubo SEM anticoagulante.
2. Deixar à temperatura ambiente para coagular espontaneamente (~15-30min.), 
em posição vertical.
3. Centrifugar a 3.500rpm / 10min.
AMOSTRAS PARA DETERMINAÇÕES BIOQUÍMICAS
Soro sanguíneo
4. Separar o soro do coágulo por meio de 
uma pipeta – evitar aspiração de hemácias.
Obs.: Coágulo aderido às paredes do tubo 
deve ser desprendido por meio de um bastão. 
(cuidado para não produzir hemólise).
AMOSTRAS PARA DETERMINAÇÕES BIOQUÍMICAS
Soro sanguíneo
Quando o sangue colhido não é tratado com anticoagulante
ocorre a coagulação e sendo o material centrifugado, o
sobrenadante é conhecido como:
a) plasma.
b) sangue total.
c) soro.
d) sangue venoso.
e) sangue arterial.
EXERCÍCIO 02 – Analise as afirmativas abaixo:
I. O sangue é considerado um sistema complexo e relativamente constante, constituído de
elementos sólidos (células sanguíneas), substância líquida (soro ou plasma) e elementos
gasosos (O2 e CO2).
II. Quando o sangue colhido é tratado com anticoagulante não ocorre à coagulação. Então
o material é centrifugado e o sobrenadante é conhecido como soro.
III. Para a maioria das determinações bioquímicas a amostra de escolha é o sangue venoso
(sangue que circula da periferia para o centro do sistema circulatório - coração) por sua
facilidade de obtenção.
Estão corretas:
a) I, II e III.
b) I e III somente
c) II e III somente.
d) II somente.
e) I somente.
Tubos de Coleta
Tubos de Coleta
“Tampa Amarela”
o Tubo com gel separador e ativador de coágulo
o Aditivo: Contém ativador de coágulo (sílica)
o Setor/Uso: Bioquímica/Imunologia.
o Procedimentos: 
✓Após a coleta, deve-se imediatamente homogeneizar o tubo 
por inversão de 5 a 8 vezes;
✓Manter em repouso, verticalmente, por 30 minutos para 
retrair o coágulo;
✓Seguir a centrifugação a 3.000 rpm por 10 minutos.
TUBOS DE COLETA
“Tampa Vermelha”
o Aditivos: Não há (“tubo seco”); Ativador de coágulo
o Setor/Uso: Bioquímica/Imunologia.
o Procedimentos:
✓Após coleta, aguardar a completa coagulação à temperatura
ambiente;
▪ Sem ativador de coágulo: 60 minutos
▪ Com ativador de coágulo: 30 minutos
✓Centrifugação a 3.000 rpm, por um período de 10 minutos;
✓Obs.: Os tubos com as amostras devem ser centrifugados com
tampa para evitar evaporação, formação de aerossóis bem
como evitar o risco de contaminação tanto da amostra como do
técnico.
TUBOS DE COLETA
“Tampa Cinza”
o Aditivos: 
✓ Anticoagulante: E.D.T.A.
✓ Conservante: Fluoretos de Sódio (agente antiglicolítico)
o Setor (uso): Bioquímica (glicemia e Lactato)
o Atuação: Inibidor enzimático e conservador de glicose.
o Proporção utilizada: 2:1 mg/mL de sangue.
o Obs.: Não deve ser utilizado na dosagem de ureia 
(enzima-reação com urease).
TUBOS DE COLETA
o Aditivo:
✓Anticoagulante: EDTA (Ácido Etileno-diaminotetracético)
o Setor (uso): Hematologia (hemograma); Bioquímica 
(hemoglobina glicada)
o Atuação: Quelação de cálcio plasmático; Preserva plaquetas.
o Encontrado na forma: dissódico (Na2EDTA), dipotássico
(K2EDTA) e o tripotássico (K3EDTA).
o Concentração utilizada: 0,1 mL de EDTA para 5 mL de sangue.
o Observações:
✓ 3h a 4h após a coleta, obtém-se bons esfregaços.
✓ Toxicidade baixa.
✓ Melhor anticoagulante para hematologia.
TUBOS DE COLETA
Agulha e Seringa descartáveis
Sistema a vácuo: suporte, 
tubo e agulha descartável.
Sistemas de Coleta 
Sistema da Coleta com vácuo
Agulha
adaptador 
tubo-agulha
tubos de coleta
Recomendação da Sequência dos Tubos a Vácuo na Coleta de 
Sangue Venoso de Acordo com o CLSI
Sequência de coleta para tubos plásticos de coleta de sangue
1. Frascos para hemocultura.
2. Tubos com citrato (tampa azul-claro).
3. Tubos para soro com ativador de coágulo, com ou sem gel separador (tampa vermelha ou 
amarela).
4. Tubos com heparina com ou sem gel separador de plasma (tampa verde).
5. Tubos com EDTA (tampa roxa).
6. Tubos com fluoreto (tampa cinza).
Sequência de coleta para tubos de vidro de coleta de sangue
1. Frascos para hemocultura.
2. Tubos para soro vidro-siliconizados (tampa vermelha).
3. Tubos com citrato (tampa azul-claro).
4. Tubos para soro com ativador de coágulo com gel separador (tampa amarela).
5. Tubos com heparina com ou sem gel separador de plasma (tampa verde).
6. Tubos com EDTA (tampa roxa).
7. Tubos com fluoreto (tampa cinza).
O sistema de coleta com vácuo consiste de uma agulha, um
adaptador tubo-agulha e o tubo de coleta. O tubo de tampa
vermelha é utilizado na coleta de sangue para a obtenção
a) de plasma para provas de coagulação.
b) de plasma para determinação de glicose.
c) de sangue total para a hematologia.
d) de soro para as provas bioquímicas.
e) de soro para a avaliação de metais.
Armazenamento e Conservação de 
Amostras
o A amostra pode ficar em temperatura ambiente (20-26°C) por 3
horas no máximo. Após este período o sangue pode sofrer
hemólise.
o Após a retração do coágulo, o material pode permanecer em
geladeira, de 4° a 8° C, por 12 horas no máximo, a fim de evitar
hemólise.
o Após separação do soro ou plasma, guardar a amostra em 
geladeira por 72 horas, no máximo, ou em congelador a -20°C, até o 
envio ao laboratório.
O sangue, considerado um sistema complexo, é constituído
de elementos sólidos, gasosos e de substância líquida. O
procedimento para sua obtenção é conhecido como:
a) punção capilar.
b) flebotomia.
c) punção lobular.
d) artrocentese.
e) transudado.
Assinale a alternativa CORRETA quanto as principais amostras biológicas
utilizadas para determinações bioquímicas:
a) O plasma e o soro, que são as porções líquidas do sangue, são obtidos a partir de tubos
com anticoagulantes, são comumente usados para análises bioquímicas.
b) O sangue total raramente é utilizado para análises bioquímicas, mas pode ser obtido
através de tuboscontendo EDTA, para dosagem de glicose sanguínea.
c) O sangue total, obtido através de coleta com “tubos secos”; e plasma e soro, obtidos em
tubos com aditivos, ou seja, com acelerador de coágulo.
d) O soro obtido, por exemplo, em “tubos secos”, o plasma obtido em tubo sem
anticoagulante e o sangue total, obtido com EDTA são amostras comumente usadas para
analises bioquímicas..
e) O sangue total, obtido através do uso de anticoagulante, é utilizado para determinar
hemoglobina glicada; e o soro, obtidos em tubo sem anticoagulante, sendo utilizados na
maioria das determinações bioquímicas.
o MOTTA, V.T. Bioquímica Clínica para Laboratório.
Princípios e interpretações. EDUCS. 2009.
Referências

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