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Questão 1 A função do cloreto de magnésio é: a. Atuar como co-fator da Taq polimerase; b. Bloquear a polimerização das novas fitas; c. Todas as alternativas estão corretas. d. Anelamento dos primers na reação de PCR; e. Promover a extensão dos fragmentos amplificados; A resposta correta é: Atuar como co-fator da Taq polimerase; Questão 2 Sobre os corantes utilizados durante a eletroforese de ácidos nucleicos: a. Ambos brometo de etídeo e sample buffer coram os acidos nucleicos na cor alaranjado. b. O brometo de etídeo, de cor azulada é o que cora os ácidos nucleicos e o Sample Buffer, de cor alaranjada é o que permite acompanhar a eletroforese c. O brometo de etídeo, de cor alaranjada é o que cora os ácidos nucleicos e o Sample Buffer, de cor azulada é o que permite acompanhar a eletroforese d. O brometo de etídeo, de cor alaranjada é o que permite acompanhar a eletroforese e o Sample Buffer, de cor azulada é o que permite corar os acidos nucleicos e. O brometo de etídeo, de cor azulada é o que permite acompanhar a eletroforese e o Sample Buffer, de cor alaranjada é o que permite corar os acidos nucleicos A resposta correta é: O brometo de etídeo, de cor alaranjada é o que cora os ácidos nucleicos e o Sample Buffer, de cor azulada é o que permite acompanhar a eletroforese Questão 3 A cuba de eletroforese e o transiluminador de luz UV são equipamentos utilizados para: a. A visualização dos fragmentos corados por sample buffer e a separação das moléculas carregadas em um campo elétrico, respectivamente. b. A separação das moléculas carregadas em um campo elétrico e a visualização dos fragmentos corados por brometo de etídeo, respectivamente c. A visualização dos fragmentos corados por brometo de etídeo e a separação das moléculas carregadas em um campo elétrico, respectivamente. d. A visualização dos fragmentos corados por brometo de etídeo e a separação dos fragmentos do menor para o maior, respectivamente. e. A visualização dos fragmentos de DNA dupla-fita e simples-fita, corados por brometo de etídeo ou por tampão de amostra e a separação das moléculas carregadas em um campo elétrico, respectivamente. A resposta correta é: A separação das moléculas carregadas em um campo elétrico e a visualização dos fragmentos corados por brometo de etídeo, respectivamente Questão 4 Os itens abaixo referem-se à estrutura, composição e função dos ácidos nucleicos. • Estrutura: I) Dupla hélice; II) Cadeia simples. • Composição: 1) Presença de uracila; 2) Presença de timina. • Função: a) síntese de aminoácidos; b) transcrição gênica. São características do ácido ribonucleico: a. II – 1 – a b. I–1–a c. II – 1 – b d. I–2–b e. II – 2 – b A resposta correta é: II – 1 – b Questão 5 Sobre a reação de PCR, considere: I. A reação de PCR produz milhares de cópias de um fragmento de DNA que se pretende estudar; II. Sua especificidade é garantida pelos pares de primers. Assinale a alternativa correta: a. I é verdadeira e a II justifica a primeira b. Ambas as afirmações são verdadeiras. c. I é verdadeira e II é falsa d. I é falsa e II é verdadeira e. Ambas as afirmações são falsas. A resposta correta é: Ambas as afirmações são verdadeiras. Questão 6 Nos dias de hoje, podemos dizer que praticamente todos os seres humanos já ouviram em algum momento falar sobre o DNA e seu papel na hereditariedade da maioria dos organismos. Porém, foi apenas em 1952, um ano antes da descrição do modelo do DNA em dupla hélice por Watson e Crick, que foi confirmado sem sombra de dúvidas que o DNA é material genético. No artigo em que Watson e Crick descreveram a molécula de DNA, eles sugeriram um modelo de como essa molécula deveria se replicar. Em 1958, Meselson e Stahl realizaram experimentos utilizando isótopos pesados de nitrogênio que foram incorporados às bases nitrogenadas para avaliar como se daria a replicação da molécula. A partir dos resultados, confirmaram o modelo sugerido por Watson e Crick, que tinha como premissa básica o rompimento das pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas. GRIFFITHS, A. J. F. et al. Introdução à Genética. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2002. Considerando a estrutura da molécula de DNA e a posição das pontes de hidrogênio na mesma, os experimentos realizados por Meselson e Stahl a respeito da replicação dessa molécula levaram à conclusão de que: a. a replicação do DNA é conservativa, isto é, as fitas filhas consistem de moléculas de DNA parental. b. a replicação de DNA é dispersiva, isto é, as fitas filhas contêm DNA recém-sintetizado e parentais em cada uma das fitas. c. a replicação é semiconservativa, isto é, as fitas filhas consistem de uma fita molde e uma fita codificadora. d. a replicação é semiconservativa, isto é, as fitas filhas consistem de uma fita parental e uma recém-sintetizada. e. a replicação do DNA é conservativa, isto é, a fita dupla filha é recém-sintetizada e o filamento parental é conservado. A resposta correta é: a replicação é semiconservativa, isto é, as fitas filhas consistem de uma fita parental e uma recém-sintetizada. Questão 7 Sobre a eletroforese de acidos nucleicos em gel de agarose, responda a alternativa correta: a. Separa fragmentos por tamanhos, sendo que quanto menor o fragmento, mais rápida será sua migração b. Separa fragmentos por tamanhos e por complexidade, sendo que se a molécula for simples-fita, migrará mais lentamente c. Separa fragmentos por tamanhos, sendo que quanto maior o fragmento, mais rápida será sua migração d. Separa fragmentos por tamanhos e por complexidade, sendo que se a molécula for dupla-fita, migrará mais lentamente e. As moléculas de DNA migram de forma bidirecional, devido à sua complexidade e ao seu tamanho A resposta correta é: Separa fragmentos por tamanhos, sendo que quanto menor o fragmento, mais rápida será sua migração Questão 8 O método de extração de DNA de "Salting Out"é um dos mais usados nos laboratórios de Biologia Molecular e Forenses, uma vez que é de fácil execução e de baixo custo. Seu princípio envolve a utilização de uma solução NaCl 5M muito concentrada para proporcionar a separação dos ácidos nucleicos dos demais elementos celulares. Neste método utilizamos alguns outros reagentes, que promovem a purificação do DNA. Um destes reagentes é a proteinase K que gera: a. A retração e concentração das moléculas de DNA, devido às suas interacoes eletroquimicas com os ácidos nucleicos b. A lise de membranas celulares e a liberação dos ácidos nucleicos c. A desproteinização da amostra cellular d. A concentração das proteinas na amostra e seu isolamento e. A lavagem do pellet de DNA A resposta correta é: A desproteinização da amostra cellular Questão 9 A transcriptase reversa presente nos organismos que tem como material genômico o ácido ribonucleico e é uma das enzimas mais utilizadas em técnicas de biologia molecular para sintetizar cDNA a partir do RNA. Ela é usada, por exemplo, na tecnologia de RT-PCR. Essa enzima tão importante faz parte do ciclo de vida: a. do papiloma vírus que tem como material genético DNA e é responsável por mais de 18000 casos de câncer de colo uterino no Brasil b. dos retrovírus, entre eles o HIV que tem um genoma de RNA causador da Síndrome de Imunodeficiência Adquirida. c. do bacteriófago T7 que é um vírus de DNA e tem ciclo de vida lítico. d. nenhuma e. da bactéria gram negativa Escherichia coli e o plasmídeo recombinante que permite a troca de informações genéticas entre diferentes espécies A resposta correta é: dos retrovírus, entre eles o HIV que tem um genoma de RNA causador da Síndrome de Imunodeficiência Adquirida. Questão 10 A reação de PCR acontece em ciclos que amplificam exponencialmente as amostras de DNA. Cada ciclo é composto por três fases: A primeira fase é a de ____________, com rompimento das pontes de Hidrogênio a ________, durante 1 minuto. Em seguida vem a etapa de ________________, a temperatura varia ____________, de acordo com o primer. A ultima fase é a de _____________, a temperatura de 72ºC, ideal para a enzima Taq polimerase. Assinale a alternativa que preenche corretamentea frase: a. Abertura – 80ºC – Anelamento – 50ºC a 70ºC – Extensão a 80oC b. Extensão – 94ºC – Anelamento – 50ºC a 70ºC – Abertura a 72oC c. Abertura - 94º - Extensão – 50ºC a 65ºC – Anelamento a 72oC d. Extensão – 80ºC - Abertura – 50ºC a 65ºC - Anelamento a 80oC e. Abertura – 94ºC – Anelamento – 50ºC a 65ºC – Extensão a 72oC A resposta correta é: Abertura – 94ºC – Anelamento – 50ºC a 65ºC – Extensão a 72oC