ABO, Rh, COOMBS, prova cruzada MEDLAB SP1

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Medicina Laboratorial | UC XVII | SP1
Compatibilidade sanguínea - testes pré-transfusionais
Pensando em um contexto de transfusão de sangue:
- Devemos levar em conta o receptor e o doador → analisar resposta antígeno do doador, e resposta de
anticorpo do receptor
DOADOR → ANTÍGENO
RECEPTOR→ ANTICORPO
TESTES PRÉ-TRANSFUSIONAIS
Vamos pensar sempre nos antígenos eritrocitários;
Relembrando
● TIPAGEM ABO
- ABO
- É um exemplo de polialelia, exemplo de codominância (cada alelo fornece seu efeito igualmente)
- Gene ABO está localizado no cromossomo 9q34 - codifica enzimas glicosiltransferases que adicionam
moléculas de carboidratos na cadeia precursora
- IA e IB não são dominantes entre si; i é recessivo
Os antígenos ABO são sintetizados na membrana
eritrocitária pela adição de carboidratos a uma cadeia
precursora glicoproteica ou glicolipídica
Mesmo sem ter tido um contato com outra tipo
sanguíneo, eu já tenho anticorpos contra o antígeno
sanguíneo que não é o meu; esses anticorpos são
formados a partir do 3-6 meses de vida;
Tipo AB não tem anticorpo e o tipo O não tem antígeno
contra outros;
→ Reação hemolítica transfusional RHT
- Diminuição da sobrevida da hemácia após transfusão de sangue devido a incompatibilidade imunológica entre
o doador e receptor
- Incompatibilidade imunológica;
- Ocorre quando o paciente foi previamente sensibilizado por algum antígeno, não possuindo anticorpos
detectáveis no seu plasma no momento da realização das provas pré-transfusionais (não temos tanto problemas com
relação ao ABO, porque atualmente é bem raro ocorrer transfusão errada de ABO)
- Maior incidência em pacientes politransfundidos
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As RHT podem ser:
- imediata: ocorrem durante ou algumas horas após a transfusão
- tardia: ocorre dias ou semanas após a transfusão
OBS: hemólise instravascular ou extravascular
Intravascular: formo complexo de ataque à membrana- MAC, que cria poros na membrana e a
célula é lisada; é direta, intravascular - tenho lise direta
Extravascular: posso ter também uma não ativação completa do complemento, e aí tenho
opsonização por alguns componentes de anticorpos, e aí chego na fase C3B do complemento e
isso ligado a hemácia, faz o meu macrófago fagocitar → extravascular
RHT imediata
→ por ABO
- reação hemolítica grave com alto índice de mortalidade
- anticorpos presentes no plasma do receptor hemolisam as hemácias do doador
- possibilidade de desenvolvimento de CIVD pela liberação de estroma celular com ativação do fator XII
→ sintomas de dor no tórax, no local da infusão e/ou flancos, hipotensão grave, febre e hemoglobinúria
RHT tardia
- ocorre devido à produção de anticorpos antieritrocitários (exceto ABO) após transfusão ou gestação prévias
- sintomas de febre, icterícia, diminuição da hemoglobina ou aproveitamento transfusional inadequado
● TIPAGEM DE Rh
- Procuramos o antígeno D fraco na hemácia; mas no sistema Rh temos mais de 50 antígenos, sendo o D → mais
importante e o mais imunogênico
- D fraco: faz prova reversa
OBS: se fosse considerado só ABO e Rh a maioria das transfusões dariam certo, mas temos outros problemas; então
usamos os outros testes para procurar outros tipos sanguíneos, outras reações hemolíticas, etc
● TESTE DE COOMBS
- Objetivo é identificar anticorpos irregulares - são todos anticorpos de outros tipos sanguíneos (sistema Kell,
Duff, Kidd, MNS, Lewis, Diego);
- Pesquisa de anticorpos irregulares (PAI)
- Kell é o principal depois do Rh, pois ele pode levar a uma RHT de leve a grave
- Diego é comum na população brasileira
→ Coombs direto ou TAD: pesquisa de anticorpos fixos à membrana eritrocitária - pesquiso sensibilização
ex: DHRN, anemias autoimunes, transfusões incompatíveis
→ Coombs indireto ou TAI: detecta a presença de anticorpos livres no soro
ex: sensibilização materna por gravidez
COOMBS DIRETO OU TAD - técnica de aglutinação direta
- Pegamos o sangue da pessoa e analisamos se a hemácia está
sensibilizada; quando não ativa o MAC a hemácia fica com o C3b do
complemento nela ou podemos ter um anticorpo atacando a hemácia
- O soro de coombs detecta o C3b do complemento ou uma
IgG; o soro pode ser mono ou poliespecífico; o mono considera apenas
o anti- IgG, o poli considera anti- C3b e anti-IgG;
- Não faço pesquisa direta de nenhum sistema, não sei se é
pelo Rh, pelo Kell, etc. Eu sei apenas que está sensibilizado por algum
componente
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Resultado negativo: ausência de aglutinação → hemácias não estão sensibilizadas
Resultado positivo: presença de aglutinação → hemácias estão sensibilizadas com
anticorpos; para identificar do ac, realiza eluição
→ É necessário que a hemácia seja bem lavada durante o teste para não ter outras interferências por erro de técnica
→ Não faço de rotina o teste de COOMBS, eu faço ele junto com outros exames de prova sanguínea, para tentar
entender se está tendo hemólise
COOMBS INDIRETO OU TAI - teste de antiglobulina indireto
- Painel de hemácias, em que é testado sistema por sistema
- Vejo a presença de anticorpos livres no soro;
- É extremamente importante para o paciente politransfundido, porque em um determinado momento ele está
extremamente sensibilizado a quase todos os tipos de sistemas
Pego a hemácia reagente do laboratório, e coloco com o soro do
paciente e vou verificar no soro se eu tenho anticorpo; se for positivo
vai ter aglutinação
- Os cuidados em relação à lavagem de hemácias e concentrações devem
ser levados em conta, pois podem alterar os resultados
→ Em gestante Rh negativo, faço anti-D, se ela for sensibilizada
mãe Rh negativo, ela tem anticorpo contra o Rh-D; faço teste → coloco
o sangue da mãe com hemácia que tem antígeno D, se houver reação,
o coombs indireto tá sensibilizado
Fases do coombs indireto
- temperatura ambiente
- meio proteico
- 37ºC
- Coombs
→ Painel de hemácias
Formado por 11 lotes de hemácias
- 10 lotes obtidos de doadores do tipo O
- 1 lote obtido de sangue de cordão umbilical de RN do grupo O
Homogeneizar e submeter a todas 4 fases do coombs indireto
● PROVA CRUZADA MAIOR E MENOR
- Utilizada para transfusões sanguíneas ou transplante de órgãos
- Finalidade de determinar a presença de anticorpos pré-formados no sangue do receptor contra as células do possível
doador
- MAIOR: finalidade de testar os glóbulos vermelhos do doador contra o soro do receptor
- MENOR: finalidade de testar os glóbulos vermelhos do receptor contra o soro do doador (desuso)
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