Histologia Humana - Aula 1 27.07.15

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Curso de Biomedicina
Histologia Humana
Prof. Huander Felipe Andreolla, MSc.
huander.unifra@gmail.com
Aula 1
Introdução ao estudo da histologia
Conteúdo Programático
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Preparação dos tecidos
Microscopia
Introdução ao estudo das células: Citoplasma
Introdução ao estudo das células: Núcleo
Conteúdo Programático
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Preparação dos tecidos
Microscopia
Introdução ao estudo das células: Citoplasma
Introdução ao estudo das células: Núcleo
O que é histologia?
Ramo da anatomia que estuda os tecidos dos animais e das plantas (GARTNER & HIATT, 2003)
Sinônimo de anatomia microscópica
Células
Órgãos
Sistemas
É o estudo das células e dos tecidos do corpo e de como essas estruturas se organizam para constituir os órgãos (JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2013)
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia óptica
Microscopia eletrônica
Microscopia confocal
Microscopia de contraste de fase
Microscopia óptica convencional
Microscopia de fluorescência
Microscopia eletrônica de transmissão
Microscopia eletrônica de varredura
Microscopia Óptica
Microscopia óptica Convencional
Princípio: Transluminação
Componente óptico formado por três sistemas de lentes:
Condensador
Objetivas 
Oculares
Poder de resolução: 0,2mm
Possibilita um aumento de 1000 a 1500x a escala real
Não distingue objetos menores ou mais delgados do que 0,2mm
Uso em larga escala na rotina de diagnóstico laboratorial, requer emprego de colorações específicas
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia óptica Convencional
Microscopia Óptica
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia óptica Convencional
Microscopia Óptica
Microscopia de Contraste de fase e de contraste diferencial de interferência (microscopia de Nomarski)
Princípio: Transluminação
Possibilita a visualização de células ou secções de tecidos não corados
Imagens visualizadas em preto e branco
Uso mais comum em rotinas de pesquisa
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia Óptica
Microscopia Confocal
Princípio: Transluminação
Evita superposição entre os planos que aparecem em foco simultaneamente
Fundamentos:
Iluminação provida por uma fonte de laser
Imagem coletada deve passar por um orifício muito pequeno
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Componente de interesse deve ser marcada com molécula fluorescente
Requer uma amplificação eletrônica da detecção e visualização em monitor
Microscopia Óptica
Microscopia de Fluorescência
Princípio: Transluminação
Secções são iluminadas por uma fonte de luz de mercúrio
Fundamentos:
Os componentes são visualizados uma vez que seja selecionado um determinado comprimento de onda
As substâncias fluorescentes são observadas como objetos brilhantes e coloridos
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia Eletrônica
Microscopia Eletrônica de transmissão
Princípio: Interação entre elétrons e componentes dos tecidos
Altíssima resolução: 0,1 nm (usualmente 3 nm)
Poder de aumento em 400 .000x a escala original.
Ocorre o fluxo unidirecional de elétrons
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia Eletrônica
Microscopia Eletrônica de transmissão
Fundamentos: Ao atravessar o corte alguns elétrons interagem com os átomos do espécime e continuam seus trajetos em direção às outras lentes enquanto que outros elétrons simplesmente cruzam o corte histológico sem interagir com ele
Cátodo: filamento de tungstênio
Ânodo: placa redonda de metal com um furo no meio
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia Eletrônica
Microscopia Eletrônica de varredura
Princípio: Interação entre elétrons e componentes dos tecidos
Fornece imagens pseudotridimensionais das células, tecidos e órgãos
Os elétros não atravessam o espécime
Fundamento: elétrons varrem uma delgada camada de metal previamente aplicada ao espécime e são refletidos pelos átomos do metal
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia óptica
Microscopia eletrônica
Microscopia confocal
Microscopia de contraste de fase
Microscopia óptica convencional
Microscopia de fluorescência
Microscopia eletrônica de transmissão
Microscopia eletrônica de varredura
Microscopia Óptica
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Microscopia óptica Convencional
Preparo de espécimes para o exame microscópico
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Fixação: Processo químico que tem por objetivo evitar a autólise, endurecer os fragmentos e preservar a composição molecular dos tecidos
Substâncias empregadas: Formalina 10%, Formaldeído 4% ou Glutaraldeído.
Desidratação e Clareamento: Banhos em soluções com concentração crescente de etanol
Inclusão ou embebição em parafina: Processo realizado para se obter finas camadas do tecido
Substâncias empregadas: Formalina 10%, Formaldeído 4% ou Glutaraldeído.
Preparo de espécimes para o exame microscópico
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Micrótomo utilizado para realizar os cortes histológicos
Preparo de espécimes para o exame microscópico
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Coloração: Tem como objetivo tornar evidentes os vários componentes dos tecidos, das células e da matriz extracelular
Basófilos: componentes teciduais de caráter ácido corados por corantes básicos. Na coloração H&E, por exemplo, o núcleo (o qual é constituído por ácidos nucleicos) tem alta afinidade por hematoxilina.
Ex: Hematoxilina, azul de toluidina e azul de metileno.
Acidófilos: componentes teciduais de caráter básico são corados por corantes ácidos. Na coloração H&E, por exemplo, citoplasma e fibras de colágeno são corados por eosina
Ex: Eosina, orange G, fucsina
Preparo de espécimes para o exame microscópico
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Preparo de espécimes para o exame microscópico
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
https://www.youtube.com/watch?v=PafHxS5bq9A
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Bibliografia recomendada
Introdução à histologia e técnicas básicas de histologia
Introdução ao estudo das células: Citoplasma