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Questionário de avaliação sobre diagnóstico molecular: técnicas PCR (RT‑PCR, qPCR e PCR multiplex), microarranjos, genotipagem de HPV, confirmação molecular do HTLV e vantagens/limitações das análises genéticas em doenças infecciosas.

Ferramentas de estudo

Questões resolvidas

Uma amostra de sangue total chega ao laboratório com suspeita de HCV e HIV, ambos vírus de RNA. Entretanto seu laboratório não dispõe de um equipamento para análise molecular por PCR quantitativo em tempo real. Qual seria a metodologia escolhida para realizar o diagnóstico ao mesmo tempo (em um mesmo tubo):
RT-PCR
RT-PCR multiplex
qPCR-multiplex
PCR-RFLP
PCR multiplex

O HTLV é um vírus com tropismo por linfócitos que afeta mais de 2.5 milhões de pessoas e está associado a algumas doenças, como a mielopatia associada ao HTLV. Após um teste sorológico reagente, um teste molecular deve ser realizado, de acordo com o Ministério da Saúde. Qual teste molecular para o HTLV é considerado padrão-ouro:
ELISA
STRs
Western Blot
PCR-RFLP
Microarranjos

Os microarranjos tem a função de identificar diferentes padrões genéticos que possam estar associados a determinados doenças. Sobre essa tecnologia, é correto afirmar:
Tanto a amostra teste como a amostra controle são marcadas com o mesmo fluoróforo
A hibridização é um processo opcional nessa metodologia, porém aumenta a eficiência da análise
A expressão gênica é quantificada pela emissão de fluorescência e hibridização
Não é necessário um DNA controle para a análise
A técnica de microarranjos é uma tecnologia barata e de fácil execução

O HPV é um oncovirus considerado um problema de saúde pública no Brasil por estar diretamente associado ao câncer de colo do útero. Em um laboratório clínico uma amostra de lesões de biópsia deve ser genotipada para o verificar a presença de subtipos de HPV de alto risco. Dentre as metodologias abaixo qual seria a melhor opção:
qPCR
RT-PCR mutiplex
qPCR multiplex
DNA recombinante
Microarranjos

As análises genéticas no diagnóstico das doenças infecciosas apresentam algumas vantagens quando comparamos com outras metodologias não moleculares. Dentre as alternativas abaixo assinale a desvantagem dessa técnica:
Auxiliam na escolha da terapia alvo
Possibilidade de diferenciação entre espécies
Possibilita quantificação
Custo superior quando comparada a outras metodologias e necessita de mão de obra qualificada.
Rapidez no diagnóstico

O diagnóstico da infecção pelo HIV pode ser realizado por algumas técnicas moleculares, sendo que a detecção do vírus circulante e sua quantificação é de extrema importância para o acompanhamento do paciente nos serviços de referência. Dentre as técnicas citadas abaixo, qual permite a detecção do HIV e quantifica as partículas virais:
Western Blot
RT-PCR
qPCR
RT-PCR multiplex
PCR convencional

O diagnóstico molecular em sua maioria utiliza do material genético para as metodologias, entretanto é possível utilizar técnicas moleculares para detectar anticorpos. Assinale a alternativa que contenha a técnica molecular que detecta anticorpos:
Western Blot
Southern Blot
qPCR
PCR convencional
RT-PCR

O Western Blot é uma técnica utilizada para o diagnóstico de algumas doenças infeccionas. Sobre esta técnica é incorreto afirmar que:
Essa técnica tem uma fase obrigatória de eletroforese em gel
A técnica diminuiu significativamente as reações cruzadas.
A transferência segundária de DNA ocorre quando DNA da vítima se mistura com o DNA do culpado
Várias proteínas alvos podem ser analisadas em mesmo momento
Essa técnica analise proteínas

O diagnóstico molecular de agente infecciosos é uma realidade hoje e é utilizado de forma ampla devido as vantagens apresentadas em relação as técnicas convencionais. Em relação as vantagens apresentadas pelo diagnostico molecular é correto afirmar:
As maiores vantagens em relação as técnicas anteriores é a especificidade já que é possível identificar com grande eficácia qualquer agente infeccioso, porém pé necessário uma grande quantidade de amostra.
A possibilidade de amplificar quantidade ínfimas do DNA de uma agente infeccioso, aliados ao baixo custo e menor tempo são as maiores vantagens dessa técnica.
As únicas vantagens dessa técnica é a possibilidade de amplificar o DNA de patógenos com quantidade de amostras bem pequenas, visto que o tempo de reação é o mesmo das técnicas anteriores.
O custo das técnicas moleculares é extremamente alto tornado essas técnicas pouco aplicáveis na rotina dos laboratórios, sendo aplicáveis apenas na área da pesquisa cientifica.
As técnicas moleculares são desvantajosas em relação as anteriores por causa da utilização de primers e da necessidade de se conhecer o genoma dos microrganismos fato impossível de se realizar.

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Questões resolvidas

Uma amostra de sangue total chega ao laboratório com suspeita de HCV e HIV, ambos vírus de RNA. Entretanto seu laboratório não dispõe de um equipamento para análise molecular por PCR quantitativo em tempo real. Qual seria a metodologia escolhida para realizar o diagnóstico ao mesmo tempo (em um mesmo tubo):
RT-PCR
RT-PCR multiplex
qPCR-multiplex
PCR-RFLP
PCR multiplex

O HTLV é um vírus com tropismo por linfócitos que afeta mais de 2.5 milhões de pessoas e está associado a algumas doenças, como a mielopatia associada ao HTLV. Após um teste sorológico reagente, um teste molecular deve ser realizado, de acordo com o Ministério da Saúde. Qual teste molecular para o HTLV é considerado padrão-ouro:
ELISA
STRs
Western Blot
PCR-RFLP
Microarranjos

Os microarranjos tem a função de identificar diferentes padrões genéticos que possam estar associados a determinados doenças. Sobre essa tecnologia, é correto afirmar:
Tanto a amostra teste como a amostra controle são marcadas com o mesmo fluoróforo
A hibridização é um processo opcional nessa metodologia, porém aumenta a eficiência da análise
A expressão gênica é quantificada pela emissão de fluorescência e hibridização
Não é necessário um DNA controle para a análise
A técnica de microarranjos é uma tecnologia barata e de fácil execução

O HPV é um oncovirus considerado um problema de saúde pública no Brasil por estar diretamente associado ao câncer de colo do útero. Em um laboratório clínico uma amostra de lesões de biópsia deve ser genotipada para o verificar a presença de subtipos de HPV de alto risco. Dentre as metodologias abaixo qual seria a melhor opção:
qPCR
RT-PCR mutiplex
qPCR multiplex
DNA recombinante
Microarranjos

As análises genéticas no diagnóstico das doenças infecciosas apresentam algumas vantagens quando comparamos com outras metodologias não moleculares. Dentre as alternativas abaixo assinale a desvantagem dessa técnica:
Auxiliam na escolha da terapia alvo
Possibilidade de diferenciação entre espécies
Possibilita quantificação
Custo superior quando comparada a outras metodologias e necessita de mão de obra qualificada.
Rapidez no diagnóstico

O diagnóstico da infecção pelo HIV pode ser realizado por algumas técnicas moleculares, sendo que a detecção do vírus circulante e sua quantificação é de extrema importância para o acompanhamento do paciente nos serviços de referência. Dentre as técnicas citadas abaixo, qual permite a detecção do HIV e quantifica as partículas virais:
Western Blot
RT-PCR
qPCR
RT-PCR multiplex
PCR convencional

O diagnóstico molecular em sua maioria utiliza do material genético para as metodologias, entretanto é possível utilizar técnicas moleculares para detectar anticorpos. Assinale a alternativa que contenha a técnica molecular que detecta anticorpos:
Western Blot
Southern Blot
qPCR
PCR convencional
RT-PCR

O Western Blot é uma técnica utilizada para o diagnóstico de algumas doenças infeccionas. Sobre esta técnica é incorreto afirmar que:
Essa técnica tem uma fase obrigatória de eletroforese em gel
A técnica diminuiu significativamente as reações cruzadas.
A transferência segundária de DNA ocorre quando DNA da vítima se mistura com o DNA do culpado
Várias proteínas alvos podem ser analisadas em mesmo momento
Essa técnica analise proteínas

O diagnóstico molecular de agente infecciosos é uma realidade hoje e é utilizado de forma ampla devido as vantagens apresentadas em relação as técnicas convencionais. Em relação as vantagens apresentadas pelo diagnostico molecular é correto afirmar:
As maiores vantagens em relação as técnicas anteriores é a especificidade já que é possível identificar com grande eficácia qualquer agente infeccioso, porém pé necessário uma grande quantidade de amostra.
A possibilidade de amplificar quantidade ínfimas do DNA de uma agente infeccioso, aliados ao baixo custo e menor tempo são as maiores vantagens dessa técnica.
As únicas vantagens dessa técnica é a possibilidade de amplificar o DNA de patógenos com quantidade de amostras bem pequenas, visto que o tempo de reação é o mesmo das técnicas anteriores.
O custo das técnicas moleculares é extremamente alto tornado essas técnicas pouco aplicáveis na rotina dos laboratórios, sendo aplicáveis apenas na área da pesquisa cientifica.
As técnicas moleculares são desvantajosas em relação as anteriores por causa da utilização de primers e da necessidade de se conhecer o genoma dos microrganismos fato impossível de se realizar.

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24/06/2022 14:35 Comentários
https://sereduc.blackboard.com/ultra/courses/_92791_1/outline/assessment/_5079670_1/overview/attempt/_19877488_1/review/inline-feedback?attemptId=_19877488_1&mode=inline&columnId=_1884655_1&conte… 1/8
Conteúdo do exercício
Graciele Maria Silva dos San…
Pergunta 1 -- /0
. Uma amostra de sangue total chega ao laboratório com suspeita de HCV e HIV, ambos vírus de RNA. Entretanto seu laboratório não dispõe de um 
equipamento para análise molecular por PCR quantitativo em tempo real. Qual seria a metodologia escolhida para realizar o diagnóstico ao mesmo tempo (em 
um mesmo tubo): 
Nota final
Última tentativa com nota
Concluído
Concluído
Tentativa 1 Enviado em: 24/06/22 14:32 (BRT)
24/06/2022 14:35 Comentários
https://sereduc.blackboard.com/ultra/courses/_92791_1/outline/assessment/_5079670_1/overview/attempt/_19877488_1/review/inline-feedback?attemptId=_19877488_1&mode=inline&columnId=_1884655_1&conte… 2/8
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RT-PCR
Resposta corretaRT-PCR multiplex
qPCR-multiplex
PCR-RFLP
PCR multiplex
Pergunta 2 -- /0
O HTLV é um vírus com tropismo por linfócitos que afeta mais de 2.5 milhões de pessoas e está associado a algumas doenças, como a mielopatia associada 
ao HTLV. Após um teste sorológico reagente, um teste molecular deve ser realizado, de acordo com o Ministério da Saúde. Qual teste molecular para o HTLV é 
considerado padrão-ouro: 
Resposta corretaELISA
STRs
Incorreta: Western Blot
PCR-RFLP
24/06/2022 14:35 Comentários
https://sereduc.blackboard.com/ultra/courses/_92791_1/outline/assessment/_5079670_1/overview/attempt/_19877488_1/review/inline-feedback?attemptId=_19877488_1&mode=inline&columnId=_1884655_1&conte… 3/8
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Microarranjos
Pergunta 3 -- /0
Os microarranjos tem a função de identificar diferentes padrões genéticos que possam estar associados a determinados doenças. Sobre essa tecnologia, é 
correto afirmar:
Tanto a amostra teste como a amostra controle são marcadas com o mesmo fluoróforo
A hibridização é um processo opcional nessa metodologia, porém aumenta a eficiência da análise
Resposta corretaA expressão gênica é quantificada pela emissão de fluorescência e hibridização
Não é necessário um DNA controle para a análise
A técnica de microarranjos é uma tecnologia barata e de fácil execução 
Pergunta 4 -- /0
24/06/2022 14:35 Comentários
https://sereduc.blackboard.com/ultra/courses/_92791_1/outline/assessment/_5079670_1/overview/attempt/_19877488_1/review/inline-feedback?attemptId=_19877488_1&mode=inline&columnId=_1884655_1&conte… 4/8
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A análise dos perfis de expressão gênica é importante para várias aplicações distintas, em especial para investigar o perfil de células cancerígenas e poder 
prever a resposta do paciente a determinado tratamento. Sobre a tecnologias de análise da expressão gênico podemos afirmar:
Os fundamentos da técnica de microarray é a ausência da necessidade de hibridização nas amostras, o que torna essa técnica tão difundida.
A tecnologia de microarray são as menos utilizadas hoje, por necessitar da utilização de sondas extremamente caras para hibridização.
As análises dos perfis genéticos atualmente são extremamente onerosas e laboriosas, por isso tem quase nenhuma aplicação na prática.
Resposta correta
A tecnologia de microarray são as mais utilizadas hoje, por permitir investigar a expressão de milhares de genes através da 
hibridização. 
A análise de expressão gênica é muito feita através dos microarray, contudo sua limitação é na quantidade de genes que ela pode analisar.
Pergunta 5 -- /0
O HPV é um oncovirus considerado um problema de saúde pública no Brasil por estar diretamente associado ao câncer de colo do útero. Em um laboratório 
clínico uma amostra de lesões de biópsia deve ser genotipada para o verificar a presença de subtipos de HPV de alto risco. Dentre as metodologias abaixo qual 
seria a melhor opção: 
qPCR
RT-PCR mutiplex
24/06/2022 14:35 Comentários
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Resposta corretaqPCR multiplex
DNA recombinante
Microarranjos 
Pergunta 6 -- /0
As análises genéticas no diagnóstico das doenças infecciosas apresentam algumas vantagens quando comparamos com outras metodologias não moleculares. 
Dentre as alternativas abaixo assinale a desvantagem dessa técnica: 
Auxiliam na escolha da terapia alvo
Possibilidade de diferenciação entre espécies 
Possibilita quantificação 
Resposta corretaCusto superior quando comparada a outras metodologias e necessita de mão de obra qualificada. 
Rapidez no diagnóstico
P t 7 --
24/06/2022 14:35 Comentários
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Pergunta 7
O diagnóstico da infecção pelo HIV pode ser realizado por algumas técnicas moleculares, sendo que a detecção do vírus circulante e sua quantificação é de 
extrema importância para o acompanhamento do paciente nos serviços de referência. Dentre as técnicas citadas abaixo, qual permite a detecção do HIV e 
quantifica as partículas virais:
Western Blot
RT-PCR
Resposta corretaqPCR
RT-PCR multiplex
PCR convencional
Pergunta 8 -- /0
O diagnóstico molecular em sua maioria utiliza do material genético para as metodologias, entretanto é possível utilizar técnicas moleculares para detectar 
anticorpos. Assinale a alternativa que contenha a técnica molecular que detecta anticorpos: 
24/06/2022 14:35 Comentários
https://sereduc.blackboard.com/ultra/courses/_92791_1/outline/assessment/_5079670_1/overview/attempt/_19877488_1/review/inline-feedback?attemptId=_19877488_1&mode=inline&columnId=_1884655_1&conte… 7/8
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Resposta corretaWestern Blot
Southern Blot
qPCR
PCR convencional
RT-PCR
Pergunta 9 -- /0
O Western Blot é uma técnica utilizada para o diagnóstico de algumas doenças infeccionas. Sobre esta técnica é incorreto afirmar que: 
Resposta corretaEssa técnica tem uma fase obrigatória de eletroforese em gel
A técnica diminuiu significativamente as reações cruzadas. 
A transferência segundária de DNA ocorre quando DNA da vítima se mistura com o DNA do culpado
Várias proteínas alvos podem ser analisadas em mesmo momento
Essa técnica analise proteínas 
24/06/2022 14:35 Comentários
https://sereduc.blackboard.com/ultra/courses/_92791_1/outline/assessment/_5079670_1/overview/attempt/_19877488_1/review/inline-feedback?attemptId=_19877488_1&mode=inline&columnId=_1884655_1&conte… 8/8
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Pergunta 10 -- /0
O diagnóstico molecular de agente infecciosos é uma realidade hoje e é utilizado de forma ampla devido as vantagens apresentadas em relação as técnicas 
convencionais. Em relação as vantagens apresentadas pelo diagnostico molecular é correto afirmar:
As maiores vantagens em relação as técnicas anteriores é a especificidade já que é possível identificar com grande eficácia qualquer agente 
infeccioso, porém pé necessário uma grande quantidade de amostra.
Resposta correta
A possibilidade de amplificar quantidade ínfimas do DNA de uma agente infeccioso, aliados ao baixo custo e menor tempo são 
as maiores vantagens dessa técnica.
As únicas vantagens dessa técnica é a possibilidade de amplificar o DNA de patógenos com quantidade de amostras bem pequenas, visto que o 
tempo de reação é o mesmo das técnicas anteriores.
O custo das técnicas moleculares é extremamente alto tornado essas técnicas pouco aplicáveis na rotina dos laboratórios, sendo aplicáveis 
apenas na área da pesquisa cientifica.
As técnicas moleculares são desvantajosas em relação as anteriorespor causa da utilização de primers e da necessidade de se conhecer o 
genoma dos microrganismos fato impossível de se realizar.

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