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Proteínas – Método de Kjeldahl 
 
Material 
Balança analítica, tubos de digestão, aparelho de digestão, capela, destilador de nitrogênio, 
frasco Erlenmeyer de 250 mL, bureta de 25 mL, espátula e pipeta graduada de 25 mL e 
pipetador automático. 
 
Reagentes 
 Ácido sulfúrico (H2SO4 95% a 98%); 
 Ácido bórico (H3BO3 5%; diluído em água destilada); 
 Ácido clorídrico (HCl 0,1M); 
 Água destilada; 
 Verde de bromocresol (C21H14Br4O5S 0,2%; diluído em álcool etílico); 
 Vermelho de metila (C15H15N3O2 0,2%; diluído em álcool etílico); 
 Fenolftaleína (1%; diluído em álcool etílico); 
 Hidróxido de sódio (NaOH 40%; diluído em água destilada; procedimento de 
preparação na capela); 
 Mistura catalítica – sulfato de cobre anidro (CuSO4.5H20; hidratado ou não), sulfato 
de potássio anidro (K2SO4) e dióxido de selênio (SeO2), na proporção 10:100:1. 
 
 OBS: Azul de bromofenol (C19H10Br4O5S 0,2%): na falta do verde de bromocresol, é 
utilizado em conjunto com o vermelho de metila 0,2%. 
 
Procedimento 
1. Pesar 2,5 g de leite ou 0,5 g de queijo no tubo de digestão em balança. 
2. Adicione 5 mL de ácido sulfúrico concentrado e aproximadamente 1g da mistura 
catalítica. 
3. Leve ao aquecimento em chapa elétrica, na capela, até a solução se tornar azul-
esverdeada e livre de material não digerido (pontos pretos). 
 
Faculdade Maurício de Nassau 
Unidade de Campina Grande 
Disciplina: Bromatologia 
Professor: Neube Michel dos Santos 
Aula Prática 
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OBS: Repetir itens 2 e 3 com tubo de digestão sem amostra (branco). Elevar a 
temperatura do digestor gradativamente (100, 150, 200, ..., 350ºC). 
4. Aqueça por mais uma hora. Deixe esfriar. 
5. Adicione 5 mL de água destilada para lavagem dos tubos e 10 gotas do indicador 
fenolftaleína. 
6. Ligue imediatamente o tubo ao conjunto de destilação (Destilador de Nitrogênio 
SOLAB). OBS: caldeira, ajuste do nível da caldeira e o aquecimento no nível 8. 
OBS: Sempre proceder com a limpeza do destilador com água destilada. 
7. Mergulhe a extremidade afilada do refrigerante em 10 mL de ácido bórico, contido 
em frasco Erlenmeyer de 250 mL, com duas gotas do indicador vermelho de metila e 
duas gotas do verde de bromocresol. 
8. Adicione ao frasco que contém a amostra digerida, por meio de um funil com 
torneira, solução de hidróxido de sódio a 40% até garantir um ligeiro excesso de 
base (mudança de cor). 
9. Aqueça a ebulição e destile até obter cerca de (70) mL do destilado. 
OBS: Retirar o frasco Erlenmeyer antes de desligar o conjunto de destilação 
10. Titule o destilado com solução de ácido clorídrico 0,1 M. 
 
Cálculo 
 
P = (volume gasto na bureta – volume branco) ×fator de correção do ácido clorídrico × fator de conversão × 0,14 
Peso da amostra 
 
fator de conversão = 6,25 para carne e derivados e 6,38 para leite e derivados