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O sangue está contido em um compartimento fechado, o aparelho circulatório, que o mantém em movimento regular e unidirecional, devido essencialmente às contrações rítmicas do coração. O volume total de sangue em uma pessoa saudável é de aproximadamente 7% do peso corporal. Funciona principalmente um meio de transporte de células, hormônios, nutrientes e gases. Por seu intermédio, os leucócitos atravessam por diapedese a parede das vênulas e capilares e concentram-se rapidamente nos tecidos lesionados ou atacados por microrganismos, nos quais desempenham suas funções defensivas. Transporta oxigênio ligado à hemoglobina dos eritrócitos, e gás carbônico (C02), ligado à hemoglobina e a outras proteínas dos eritrócitos, ou dissolvido no plasma. O plasma também transporta nutrientes e metabólitos dos locais de absorção ou síntese, distribuindo-os pelo organismo. Transporta, ainda, escórias do metabolismo que são removidas do sangue pelos órgãos de excreção. O sangue possibilita a troca de mensagens químicas entre órgãos distantes e tem papel regulador na distribuição de calor, no equilíbrio acidobásico e no equilíbrio osmótico dos tecidos. A formação das células sanguíneas ocorre na medula óssea, órgão formado por células troncos e capilares sinusoides com estroma constituído de células, fibras reticulares, macrófagos, adipócitos e megacariócitos. Hematopoiese embrionária- fetal: ocorre em vários locais do mesênquima até a 5ª semana, no fígado da 6ª semana até o 7ª mês e no baço, medula óssea e linfonodos até o nascimento. Hematopoiese pós-natal: -infância: medula óssea de praticamente todos os ossos -adulto: medula óssea (esqueleto axial + partes do fêmur e úmero) O sangue é formado pelos glóbulos sanguíneos e pelo plasma, parte líquida, na qual os primeiros estão suspensos. Os glóbulos sanguíneos são os eritrócitos ou hemácias, as plaquetas (fragmentos do citoplasma dos megacariócitos da medula óssea) e diversos tipos de leucócitos ou glóbulos brancos. O sangue coletado por punção venosa, tratado por anticoagulantes e em seguida centrifugado, separa-se em várias camadas que refletem sua heterogeneidade. O resultado obtido por essa sedimentação, realizada em tubos de vidro de dimensões padronizadas, chama-se hematócrito. No hematócrito, o plasma corresponde ao sobrenadante translúcido e amarelado. Os glóbulos sedimentam em duas camadas facilmente distinguíveis. A camada inferior tem cor vermelha e é formada pelos eritrócitos. A camada imediatamente superior tem cor acinzentada e contém os leucócitos e sobre eles repousa delgada camada de plaquetas O plasma é uma solução aquosa que contém componentes de pequeno e de elevado peso molecular sendo eles: proteínas plasmáticas, sais inorgânicos e compostos orgânicos diversos (aminoácidos, vitaminas, hormônios e glicose). A composição do plasma é um indicador da composição do líquido extracelular. As principais proteínas do plasma são as albuminas, as alfa, beta e gama globulinas, as lipoproteínas, proteínas de complemento e proteínas de coagulação. -albuminas: são sintetizadas no fígado e muito abundantes no plasma sanguíneo, desempenham papel fundamental na manutenção da pressão osmótica do sangue. Deficiência em albuminas causa edema generalizado. -gamaglobulinas são anticorpos e, por isso, também chamadas imunoglobulinas. -protrombina e fibrinogênio: fazem parte do sistema de coagulação, junto com as plaquetas, em uma cascata complexa com outras proteínas plasmáticas e algumas enzimas e cofatores enzimáticos envolvidos na formação do coágulo. Página 1 de Histologia Célula anucleada e bicôncava com grande quantidade de hemoglobina, proteína transportadora de O2 e CO2, sendo seu citoplasma formado por 33% de Hb e 66% de água. Por conta da hemoglobina, uma proteína básica, os eritrócitos são acidófilos, corando-se pela eosina. Não saem do sistema circulatório, permanecendo sempre no interior dos vasos e são flexíveis, passando facilmente pelas bifurcações dos capilares mais finos, onde sofrem deformações temporárias, mas não se rompem. A forma bicôncava é mantida por proteínas estruturais do citoesqueleto e ligadas à membrana da hemácia, como, por exemplo, espectrina, anquirina, actina, proteína 4.1 e banda 3. Função: transporte de gases através da hemoglobina Vida: aproximadamente 120 dias Concentração: aproximadamente 4 a 5,4 milhões por microlitro (mm3), na mulher, e de 4,6 a 6 milhões por microlitro, no homem. Os eritrócitos usam energia derivada da glicose, cerca de 90% da glicose são degradados pela via anaeróbia até o estado de lactato, e os 10% restantes são utilizados pela via pentose-fosfato. Linhagem eritrocítica: Durante a maturação na medula óssea, o eritrócito perde o núcleo e as outras organelas, ao penetrarem a corrente sanguínea, vindos da medula óssea vermelha, na qual são formados, os eritrócitos imaturos (reticulócitos) contêm certa quantidade de ribossomos, que será perdida depois. Os leucócitos são incolores, de forma esférica quando em suspensão no sangue e têm a função de proteger o organismo contra infecções. Produzidos na medula óssea ou em tecidos linfoides e permanecem temporariamente no sangue, o utilizando como meio de transporte para alcançar seu destino final, os tecidos. São classificados em dois grupos, os granulócitos e os agranulócitos. Os granulócitos têm núcleo de forma irregular, contêm grânulos azurófilos, que se coram em púrpura, e são lisossomos e têm no citoplasma grânulos específicos que, ao microscópio eletrônico, aparecem envoltos por membrana. De acordo com a afinidade tintorial dos grânulos específicos, distinguem-se três tipos de granulócitos: neutrófilos, eosinófilos e basófilos. Os agranulócitos possuem núcleo mais regular e o citoplasma não tem granulações especificas, podendo apresentar grânulos azurófilos, inespecíficos, presentes também em outros tipos celulares. São dois tipos: linfócitos e os monócitos. Neutrófilos Os neutrófilos, ou leucócitos polimorfonucleares, são células arredondadas com diâmetros entre 10 e 14 µ.m, têm núcleos formados por dois a cinco lóbulos (mais frequentemente, três lóbulos) ligados entre si por finas pontes de cromatina. Concentração: constituem cerca de 50% a 70% dos leucócitos circundantes. Vida: Duram até 4 dias no tecido conjuntivo. O citoplasma do neutrófilo apresenta predominantemente grânulos específicos e azurófilos. Enquanto os grânulos azurófilos (lisossomos) contêm proteínas e peptídeos destinados à digestão e morte de microrganismos, os grânulos específicos, além de apresentarem enzimas importantes no combate aos microrganismos, também têm componentes para reposição de membrana e auxiliam na proteção da célula contra agentes oxidantes. Os grânulos azurófilos contêm em seu interior uma matriz rica em proteoglicanos sulfatados, importantes para manter os diversos componentes do grânulo em estado quiescente. Grânulos atípicos ou vacúolos no citoplasma dos neutrófilos podem sugerir diferentes condições patológicas, como infecções bacterianas e inflamações sistêmicas. Ao microscópio eletrônico os grânulos azurófilos são maiores e mais elétron-densos do que os grânulos específicos, e os neutrófilos não tem afinidade nem com a hematoxilina, nem com a eosina. Página 2 de Histologia Linhagem granulocítica: A célula muito jovem tem núcleo não segmentado em lóbulos, sendo chamada de neutrófilo com núcleo em bastonete pois o núcleo tem a forma de um bastonete curvo. Nos núcleos dos neutrófilos das pessoas do sexo feminino, aparece frequentemente um pequeno apêndice, muito menor do que um lóbulo nuclear, com a forma de uma raquete que contém a cromatina sexual, constituída por um cromossomo X heterocromático (condensado) que não transcreve seus genes. O neutrófilo é uma célula em estágio final de diferenciação, realizando uma sú1tese proteica muito limitada., apresenta poucos perfis do retículo endoplasmático granuloso, raros ribossomos livres, poucas mitocôndriase complexo de Golgi rudimentar. Eosinófilos Essas células têm aproximadamente o mesmo tamanho dos neutrófilos, ou são ligeiramente maiores. Seu núcleo em geral é bilobulado, o retículo endoplasmático, as mitocôndrias e o complexo de Golgi são pouco desenvolvidos. Concentração: constituindo apenas l a 3% do total de leucócitos. A principal característica para a identificação do eosinófilo são granulações ovoides que se coram pela eosina (granulações acidófilas). Essas granulações são maiores do que as dos neutrófilos, medindo de 0,5 a l,5 µm no seu maior eixo. Paralelamente ao eixo maior do grânulo, encontra-se um cristaloide ou internum alongado, elétron-denso. O principal componente do internum é a proteína básica principal, rica em arginina, que constitui 50% das proteínas do grânulo e é responsável por sua acidófila. A camada que envolve o internum é menos densa aos elétrons, denomina-se externum ou matriz e é rica em proteína catiônica eosinofílica, peroxidase eosinofílica e neurotoxina derivada de eosinófilos. A proteína catiônica e a neurotoxina são ribonucleases, com atividade antiviral, a catiônica promove o aparecimento de poros nas células-alvo (ação citotóxica), induz a desgranulação de mastócitos e basófilos e modula negativamente a atividadelinfocitária. Tanto a proteína catiônica quanto a proteína básica principal têm atividades antibacteriana e antiparasitária. A peroxidase está envolvida na geração de espécies reativas de oxigênio, um importante mecanismo de defesa e são capazes de promover dano tecidual. Dentre outras substâncias secretadas pelos eosinófilos estão citocinas (pelo menos 11 interleucinas diferentes e interferona) e mediadores inflamatórios lipídicos (leucotrienos), que exacerbam a resposta inflamatória. Sabe-se também que os eosinófilos apresentam antígenos para os linfócitos. Basófilos O basófilo tem núcleo volumoso, com forma retorcida e irregular, geralmente com o aspecto da letra S. O citoplasma é carregado de grânulos maiores do que os dos outros granulócitos, os quais muitas vezes obscurecem o núcleo. Ao microscópio eletrônico os grânulos dos basófilos são muito elétron-densos e frequentemente contêm filamentos ou partículas alongadas, medem 0,15 a 0,5 µm de diâmetro e são metacromáticos. Contêm histamina, fatores quimiotáticos para eosinófilos e neutrófilos, e heparina, que é responsável pela metacromasia do grânulo. Concentração: menos de 2% dos leucócitos do sangue. Vida: 1 a 2 dias no sangue A membrana plasmática dos basófilos, como a dos mastócitos, também apresenta receptores para a imunoglobulina E (IgE). Os basófilos liberam seus grânulos para o meio extracelular, sob a ação dos mesmos estímulos que promovem a expulsão dos grânulos dos mastócitos. Além das proteínas contidas nos grânulos, os basófilos também secretam citocinas (IL-4, IL-13) e leucotrienos, que são mediadores inflamatórios. Acredita-se que por meio da secreção de citocinas os basófilos modulem a função de determinadas populações de linfócitos . Página 3 de Histologia Linfócitos Os linfócitos são responsáveis pela defesa imunológica do organismo, reconhecem moléculas estranhas existentes em diferentes agentes infecciosos. combatendo-as por meio de resposta humoral (produção de imunoglobulinas) e resposta citotóxica mediada por células. Constituem uma família de células esféricas, com diâmetro variável entre 6 e 8 µ.m; com essas dimensões, são conhecidos como linfócitos pequenos e no sangue circulante ocorre ainda uma pequena porcentagem de linfócitos maiores, que podem alcançar 18 µm de diâmetro. São produzidos na medula óssea, possuem quantidade mínima de citoplasma, núcleo arredondado, poucos grânulos azurófilos e não possuem grânulos específicos. O linfócito pequeno tem núcleo esférico, às vezes com uma chanfradura e sua cromatina se dispõe em grumos grosseiros, de modo que o núcleo aparece escuro nos preparados usuais, característica que favorece a identificação do linfócito. Apresenta basofilia discreta, corando-se em azul claro, pode conter grânulos azurófilos, que não são exclusivos dos linfócitos, pois aparecem também nos monócitos e granulócitos, pobre em organelas, contendo moderada quantidade de ribossomos livres. O tempo de sobrevivência dos linfócitos é muito variável, alguns vivem apenas alguns dias, enquanto outros vivem durante muitos anos. Ao contrário dos outros leucócitos que não retornam ao sangue depois de migrarem para os tecidos, os linfócitos voltam dos tecidos para o sangue, recirculando continuamente. -Linfócitos B: produzidos na medula óssea e são células secretoras de anticorpos -Linfócitos T: produzidos na medula óssea, completam sua maturação no timo e participam da imunidade mediada por células. Monócitos Os monócitos são os maiores leucócitos circulantes, com diâmetro entre 15 e 22 µm, núcleo ovoide, em forma de rim ou de ferradura, geralmente excêntrico e devido ao arranjo pouco denso de sua cromatina, o núcleo dos monócitos é mais claro e contém dois ou três nucléolos. O citoplasma do monócito é basófilo e contém grânulos azurófilos (lisossomos) muito finos, podem preencher todo o citoplasma, conferindo-lhe uma coloração acinzentada, mas não possuem grânulos específicos. O citoplasma contém pequena quantidade de polirribossomos e retículo endoplasmático granuloso pouco desenvolvido, muitas mitocôndrias pequenas e o complexo de Golgi é grande, participando da formação dos grânulos azurófilos. Circulam no sangue por 12 ou 100 horas e, então, entram no tecido conjuntivo e se diferenciam em macrófagos, células fagocitárias e apresentadoras de antígeno, produzem citocinas. Os monócitos do sangue representam uma fase na maturação da célula mononuclear fagocitária originada na medula óssea. Esta célula passa para o sangue, onde permanece apenas por alguns dias, e, atravessando por diapedese a parede dos capilares e vênulas, penetra alguns órgãos, transformando-se em macrófagos, que constituem uma fase mais avançada na vida da célula mononuclear fagocitária. A superfície celular mostra muitas microvilosidades e vesículas de pinocitose. As plaquetas são corpúsculos anucleados, com a forma de disco, medindo cerca de 2 a 4 µ,m de diâmetro, derivados de células gigantes e poliploides da medula óssea, os megacariócitos. Possuem várias moléculas receptoras na membrana plasmática e algumas organelas (mitocôndria e lisossomos). Promovem a coagulação do sangue e auxiliam a reparação da parede dos vasos sanguíneos, evitando perda de sangue. Concentração: 150 mil a 450 mil plaquetas por microlitro (milímetro cúbico) de sangue Vida: permanecem no sangue por aproximadamente 10 dias. Nos esfregaços de sangue, as plaquetas tendem a aparecer em grupos (aglutinação). Elas apresentam uma parte transparente, azul-clara, o hialômero, o qual contém grânulos corados em púrpura, que constituem o cromômero. Megacariócito Plaquetas Página 4 de Histologia Página 5 de Histologia
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