Exercicios para o testinho

Prévia do material em texto

Exercícios sobre Cromatografia líquida de alta eficiência. 
Nome:____________________________________________ 
 
1 - A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) é o tipo mais versátil e mais 
amplamente empregado de cromatografia por eluição. Essa técnica é usada pelos 
químicos para separar e determinar espécies em uma grande quantidade de materiais 
orgânicos, inorgânicos e biológicos. A figura abaixo apresenta um equipamento básico de 
CLAE. 
 
Assinale a alternativa correta que apresenta o nome dos componentes identificados pelas 
letras a, b, c, d, e e f presentes num CLAE. 
 
A-a) reservatório da fase móvel; b) bomba de alta pressão; c) válvula de injeção; d) coluna; 
e) detector e f) registrador. 
B-a) reservatório da fase móvel; b) bomba de alta pressão; c) coluna; d) válvula de injeção; 
e) detector e f) registrador. 
C- a) reservatório da fase móvel; b) bomba de alta pressão; c) válvula de injeção; d) forno; 
e) detector e f) registrador. 
D- a) reservatório da fase móvel; b) bomba de alta pressão; c) válvula de injeção; d) 
coluna; e) registrador e f) detector. 
E-a) reservatório da fase móvel; b) bomba de baixa pressão; c) válvula de injeção; d) 
coluna; e) detector e f) registrador. 
 
2 – A cromatografia líquida de alta resolução (HPLC) é uma técnica utilizada na análise de 
compostos tóxicos. Uma vez aceito o material para análise, o químico deve preparar a 
amostra para injetar no cromatógrafo, de forma que preencha os seguintes 
requisitos, EXCETO: 
 
A-Ser solúvel na fase móvel. 
 
B-Não ter compostos que insolúveis que possam entupir a coluna. 
 
C-Ser adsorvida irreversivelmente ou reagir quimicamente com a fase estacionária. 
 
D-Ter uma concentração compatível com o volume da válvula de injeção e com a 
característica do detector empregado. 
 
E-Não conter compostos que podem interferir na análise. 
 
3) A figura abaixo esquematiza um cromatograma obtido por CLAE. 
 
 
Pela análise desse cromatograma, conclui-se que 
Alternativas 
Ao tempo morto é de 2,0 min. 
Bo tempo de retenção ajustado do componente B é 2,5 min. 
Co tempo de retenção do componente A é aproximadamente 0,6. 
Do fator de resolução entre os componentes P e Q é aproximadamente 0,8. 
Ecom base no componente Q, o número de pratos teóricos da coluna é de 
aproximadamente 4.900. 
 
4)A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) tornou-se uma ferramenta 
analítica indispensável. Os laboratórios criminais frequentemente empregam a CLAE 
no processo de obtenção de evidências. Sobre a CLAE, assinale a alternativa 
INCORRETA. 
Alternativas 
A 
A CLAE também pode ser chamada de cromatografia líquida de alta velocidade, alta 
pressão, alto desempenho ou alta resolução. 
B 
É bastante empregada na análise de combustíveis alterados, no controle de qualidade de 
medicamentos e alimentos, na análise de elementos traços e resíduos. 
C 
A Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) é uma técnica de separação utilizadas 
somente para fins qualitativos. 
D 
A cromatografia pode ser utilizada para a identificação de compostos, por comparação 
com padrões previamente existentes para a purificação e compostos, separando-se as 
substâncias indesejáveis, e para a separação dos componentes de uma mistura. 
E 
Na cromatografia líquida de alta eficiência, requer-se pressões de bombeamento de vários 
milhares de libras por polegada quadrada (psi) e, por esse motivo, o equipamento 
necessário para CLAE é mais sofisticado e caro do que os utilizados em outros tipos de 
cromatografia. 
5) Analise as três afirmações abaixo sobre Cromatografia Líquida de Alta Eficiência 
(CLAE): 
I – Dissolve-se em um solvente a amostra a ser observada e introduz-se na coluna 
cromatográfica (fase estacionária). Com o bombeamento de um solvente com vazão 
constante, os componentes da mistura são deslocados através da coluna, que se 
distribuem entre as duas fases de acordo com as afinidades. 
II - Substâncias com maior afinidade com a fase estacionária deslocam-se mais 
lentamente. As substâncias com pouca afinidade com esta fase movem-se mais 
rapidamente, e ao sair da coluna, os componentes passam pelo detector. 
III - CLAE é usada para observação de compostos não voláteis ou instáveis termicamente, 
onde a cromatografia gasosa não pode ser utilizada, sendo considerado, portanto, amplo o 
campo de aplicação de CLAE, já que a maioria dos compostos possuem essas 
características. Assinale a alternativa correta: 
A-Todas as afirmações estão corretas. 
B-Todas as afirmações estão incorretas. 
C-Apenas a afirmação I está correta. 
D-Apenas as afirmações II e III estão corretas. 
E-Apenas as afirmações I e III estão corretas. 
 
6) Após Cromatografia Líquida de Alta Resolução (CLAE) foram observados os cromatogramas 
X, Y e Z, que se referem a uma mistura de compostos presentes em uma amostra biológica e 
foram obtidos em uma mesma coluna, mas utilizando fases móveis diferentes e em modo 
isocrático (X= 70:30 MeOH:H2O; Y= 60:40 MeOH:H2O; Z= 40:60 MeOH:H2O). Considerando 
essas informações. Assinale a opção que aponta o composto mais polar: 
 
 
 
 
7) Em relação aos diferentes métodos de cromatografia existentes e sua função, assinale a 
alternativa incorreta. 
A Na cromatografia em coluna, existe a fase móvel, constituída por uma solução 
tamponada e a fase estacionária, um material sólido e poroso 
 
B A cromatografia é uma técnica utilizada para a identificação e separação de 
componentes em uma mistura 
C Na cromatografia de camada delgada, a fase móvel líquida percorre pela fase 
estacionária absorvente, onde a amostra é aplicada. 
D Na cromatografia de troca catiônica, a matriz sólida tem grupos carregados 
negativamente 
 
8) Cromatografia é uma técnica analítica que permite a separação, identificação e 
quantificação dos componentes de uma mistura. Em relação ao tema, analise as assertivas 
e assinale a alternativa que aponta a(s) correta(s). 
I. Uma das características desejáveis da fase estacionária em cromatografia é que ela 
apresente grande afinidade com a fase móvel. 
II. A fase móvel, na cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), corresponde a um líquido 
que irá competir com a fase estacionária pela interação com o analito. 
III. Uma das funções do forno do cromatógrafo é estabelecer uma temperatura ou uma 
rampa de temperatura adequada para promover a separação dos constituintes de uma 
amostra, com base nos pontos de ebulição destes. 
A-Apenas I. 
B-Apenas III. 
C-Apenas I e II. 
D-Apenas II e III. 
E-I, II e III. 
 
9) O Projeto de Lei nº 3.267/2019 dispõe sobre as modificações das regras do Código de 
Trânsito Brasileiro e inclui a proposta da não obrigatoriedade da realização do exame 
toxicológico para motoristas profissionais. Essa modificação tem gerado grande polêmica, 
uma vez que o monitoramento de substâncias psicoativas em humanos é responsável pela 
redução de acidentes de ônibus (45%) e caminhões (34%), de acordo com dados da 
Polícia Rodoviária Federal. A ausência de um controle rigoroso do consumo dessas 
substâncias é praticamente um atentado contra a vida. A seguir estão algumas moléculas 
orgânicas com efeitos estimulantes. 
 
Uma amostra com essas substâncias foi analisada por cromatografia líquida de alta 
eficiência (CLAE), em uma coluna de fase octadecilsilano (C18), usando-se uma mistura de 
metanol e água (70:30 v/v). Assinale a opção que corresponde à ordem de eluição 
cromatográfica. 
AMetanfetamina; anfetamina; efedrina; norefedrina. 
BAnfetamina; metanfetamina; norefedrina; efedrina. 
CNorefedrina; efedrina; anfetamina; metanfetamina. 
DNorefedrina; anfetamina; efedrina; metanfetamina. 
EEfedrina; metanfetamina; norefedrina; anfetamina. 
 
10) “A eluição ___________ é realizada com um único solvente (ou uma mistura de 
solventes) de composição constante. Se um solvente não proporcionar uma eluição 
suficientemente rápida e uma efetiva separação dos componentes, então pode ser usada a 
eluição ___________”. 
 
A-isocrática / porgradiente 
B-isocrática / por partição 
C-por partição / isocrática 
D-por solvatação / isocrática 
E-por gradiente / isocrática 
11) Analise os cromatogramas abaixo justificando as influências dos parâmetros 
cromatográficos: 
11.A) Condições analíticas: 
 
 Coluna: C18 (5 µm, 46x150 mm) 
 Eluente: Água: Metanol: Ácido acético 
 glacial (69:28:3) 
 Fluxo: 2mL/min 
 Amostra: Acetaminofeno, Aspirina, Cafeína 
 (100µg/mL) e Ácido benzóico (600µg/mL) 
 Volume de injeção: 10µL 
 Detecção: UV, a 275nm 
 Temperatura: 45ºC 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
A) Qual é o composto mais polar e o mais apolar desta análise cromatográfica? 
B) A fase móvel é uma fase normal ou reversa? Porque? 
C) Para aumentar o tempo da corrida qual seria a sugestão para essa análise por CLAE? 
D) Para reduzir o tempo de retenção e aproximar os picos cromatográficos qual seria a 
sugestão para esta corrida analítica. 
E) Qual o tempo de retenção do volume morto desta corrida analítica? Demostre por 
cálculos analíticos. 
F) Se reduzir a temperatura do sistema para 30ºC o que poderá ocasionar nesta corrida 
cromatográfica. 
G) Calcule o Fator de capacidade (K’) para cada pico cromatográfico. 
H) Calcule o número de pratos teóricos de cada pico analítico. 
I) Calcule a resolução entre os picos de Paracetamol e cafeína, cafeína e aspirina, 
aspirina e acido benzoico, cafeína e acido benzoico, paracetamo e aspirina. 
 
 
PRINCIPAIS PARÂMETROS CROMATOGRÁFICOS 
 
 
 
 PRATOS TEÓRICOS 
ICH: N ˃ 2000 
 
 
 
 
 
 FATOR DE CAPACIDADE (K’) 
 ICH recomenda k’>2 
 
 
 
 
 
 
 
 SELETIVIDADE 
 
 
 
 
 
 
 
 
α = tr’2 / tr’1 
 
 
 
 
 RESOLUÇÃO 
ICH recomenda Rs > 2 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 FATOR CAUDA 
ICH Recomenda T≤2 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 FATOR DE ASSIMETRIA 
Ideal: 0,95-1,15% 
 
 
 
 
 
R= 2 (tr2 – tr1) 
 Wb1 + Wb2 
Cálculo do Volume Morto: 
 
• Vo= π.R2.C 
 2.F.1000