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Prova CASO CLINICO ( PARA RESOLUÇÃO DAS QUESTÕES 1 – 6) Algumas cepas de enterobactérias produzem β-lactamases de espectro estendido (ESBL), que conferem resistência a vários antibióticos β-lactâmicos de amplo espectro. O CLSI recomenda fazer testes de disco-difusão para identificação de cepas ESBL, em casos de infecções por Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Proteus mirabilis. Os testes devem ser realizados por disco-difusão e os resultados são comparados com pontos de corte das zonas de inibição, estabelecidos pelo CLSI. Você é um microbiologista que trabalha em um laboratório de análises clínicas de um hospital de alta complexidade. Certa manhã você recebeu amostra de urina de um paciente para realização de Urocultura. A urina foi semeada com uma alça de 1 μl nos meios de cultura de rotina para urocultura (Ágar CLED e MacConkey). Após 24 horas de incubação em estufa a 35± 2°C, houve crescimento de 50 colônias bacterianas de um único morfotipo. A coloração de gram da colônia mostrou bacilos gram negativos. 1ª Questão (nota 3/3) Os resultados dos crescimentos das placas de urocultura estão nas imagens abaixo. Considerando o resultado do exame após a realização da urocultura qual provável patógeno isolado da urina do paciente considerando os resultados observados nas duas placas? Justifique O provável patógeno isolado da urina do paciente é Klebsiella pneumoniae, produz colônias grandes e gomosas quando cultivadas em placas com nutrientes. No ágar MacConkey, produz colônias róseas, brilhantes, com aspecto elevado e de consistência mucoide. 2ª Questão (nota3/3) Qual é a contagem de colônias em UFC/mL (unidades formadoras de colônia/mL) que o farmacêutico responsável pelo Laboratório de Microbiologia deve liberar no laudo neste caso? Demonstre o cálculo. Resultado: Klebsiella pneumoniae Contagem de colônia:50.000 UFC/ml 50 ............0,001 x....................1 ml 0,001X=50 X=50/0,001 x=50.000 UFC/ml 3ª Questão (nota3/3) O resultado do exame do paciente indica infecção ou contaminação? JUSTIFIQUE O resultado corresponde a uma infecção, pois quando acontece uma contaminação, a placa fica escura, que não é o caso referente. O resultado corresponde a uma infecção, pois quando acontece uma contaminação, a placa fica escura, que não é o caso referente 4ª Questão (nota3/3) Você utilizou um antibiograma para identificação de ESBL, pela técnica de disco difusão, de acordo com as recomendações do CLSI, e encontrou os seguintes halos de inibição. Cefpodoxina = 18mm Cefazidima = 23mm Aztreonam = 29mm Cefotaxina = 30mm Ceftriaxona = 25mm Você precisa comparar os resultados de acordo com a tabela do CLSI de identificação de cepas de ESBL em disco difusão. Considerando o resultado apresentado e a tabela padrão no teste de sensibilidade a antimicrobianos (TSA) realizado, algum(ns) do(s) halo(s) está(ão) dentro do ponto de corte para ESBL estabelecido pelo CLSI? Em caso positivo, indique. Sim. Apresenta resultado Positivo para Ceftriaxona, pois o halo de inibição está dentro do ponto de corte, para ESBL estabelecido pelo CLSI. Halo de inibição da ceftriaxona: encontrado:≤25 mm Halo de ceftriaxona estabelecido pela CLSI ≤27 mm 5ª Questão (nota 0/3) Com os resultados encontrados no TSA, você pode afirmar que se trata de uma ESBL? Justifique sua resposta. Sim, pois está dentro do ponto de corte, de acordo com a tabela.Os ESBLs refere-se às beta-lactamases produzidas principalmente por Klebsiella spp. que apresentam resistência aos beta-lactâmicos de amplo espectro, os quais normalmente possuem atividade contra os bacilos Gram-negativos, que é indicativo para o caso em questão. Resposta corrigida Sim, pois está dentro do ponto de corte, de acordo com a tabela.Os ESBLs refere-se às beta-lactamases produzidas principalmente por Klebsiella spp. que apresentam resistência aos beta-lactâmicos de amplo espectro, os quais normalmente possuem atividade contra os bacilos Gram-negativos, que é indicativo para o caso em questão. Resposta corrigida pele prof 6ª Questão (nota0/3) Como você liberaria o laudo desse exame? Resposta corrigida Teste de sensibilidade aos Antimicrobianos Positivo para ESBL, halo de Ceftriaxona dentro do ponto de corte estabelecido pelo CLSI. O resultado demonstra resistência bacteriana por K.pneumoniae Teste de sensibilidade aos Antimicrobianos Positivo para ESBL, halo de Ceftriaxona dentro do ponto de corte estabelecido pelo CLSI. O resultado demonstra resistência bacteriana por K.pneumoniae 7ª Questão (nota1/3) Uma criança de 4 anos de idade foi transferida para um hospital de alta complexidade em decorrência de complicação de uma pneumonia com derrame pleural. Uma amostra de escarro foi coletada na data da admissão para exames microbiológicos. A imagem 1 abaixo mostra o resultado da cultura. A imagem 2 abaixo mostra o resultado da bacterioscopia. Resposta corrigida: Imagem 1 – Bacteria alfa hemolítica Imagem 2 – Diplococos gram positivos A avaliação microbiológica de escarro deve ser cuidadosa, uma vez que para a obtenção espontânea do muco da árvore brônquica obrigatoriamente haverá passagem pela via respiratória superior e contaminação com a microbiota residente. Nos exames microbiológicos de escarro é sugerida a avaliação da qualidade da amostra por observação no bacterioscópico. A observação de muco e mais de 25 leucócitos por campo de 100 vezes são indicativos de amostra adequada, enquanto que a observação de mais de 10 células epiteliais é um indicativo de contaminação. 8ª Questão (nota 3/3) Como você poderia confirmar qual a espécie bacteriana presente? Primeiramente pela coloração gram teste da catalase teste da isolamento no ágar sangue para confirmar se é alfa ou beta hemolítico. alfa-hemólise - teste de sensibilidade à optoquina sensível à optoquina indicativo para Streptococcus pneumoniae 9° questão (Nota3/6) CASO CLÍNICO Um paciente com AIDS é internado, com sintomas de febre alta e rigidez da nuca. Foram solicitados testes laboratoriais do líquor do paciente. Resultados dos exames Líquor: Cor: Incolor Aspecto: Límpido Contagem de Glóbulos Brancos: 100 cels/µl Contagem Diferencial: 75% de linfócitos 23% monócitos e 2% neutrófilos Glicose: 55 mg/ dl (Glicose no sangue paciente = 85mg/dl) Proteínas: 700 mg/ dl Resultado (Microbiologia): Bacterioscopia direta (microscopia): Negativo para Gram Positivo Tinta nanquim Resultado Cultura: Crescimento em meio Agar Sabouraud a) A partir desses resultados qual diagnóstico provável? Justifique sua resposta Resposta corrigida Meningite FUNGICA, Crescimento em meio Agar Sabouraud – Meio seletivo para fungo Positivo tinta China à Identificação presuntiva Cryptosporidium. Os níveis elevados de proteína são importantes? Explique sua resposta? Proteínas totais elevadas são com frequência observados em condições patológicas, nas meningites que causam danos a barreira hematoencefálica ocorre um aumento. Outro motivo seria porque o nosso organismo acaba aumentando a produção de algumas proteínas relacionadas a defesa (por ex imunoglobulinas). Nas meningites fungicas estão discretamente aumentadas.