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Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 1 Núcleo • Conservação e replicação do genoma • Regulação da transcrição dos genes • Processamento dos RNAs resultantes da transcrição do DNA Centro de controlo da célula Principais componentes do núcleo interfásico Invólucro nuclear, Nucleoplasma, Cromatina e Nucléolo(s) Microfotografia TEM de um núcleo interfásico (à esquerda) e respectiva representação esquemática (à direita) Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 2 Constituintes estruturais • Membranas nucleares • Poros nucleares • Lâmina nuclear Invólucro nuclear Separação temporal e espacial dos fenómenos de expressão genética (De Robertis e De Robertis, 1996) __ __ ______ ___ ____ Invólucro Nuclear Microfotografia TEM da região perinuclear Representação esquemática do Invólucro Nuclear Membranas nucleares Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 3 Lâmina Nuclear Interface estrutural e funcional entre a membrana interna nuclear e a cromatina periférica (Cooper & Hausman, 2009) Comportamento do invólucro nuclear durante a mitose Alberts et al., 2002 A lâmina nuclear desempenha um papel crucial na desorganização e reorganização do invólucro nuclear durante a divisão do núcleo Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 4 Microfotografia TEM do invólucro nuclear após criofractura (à esquerda; Cooper & Hausman, 2009) e respectiva representação esquemática (à direita) Poros Nucleares Canais de transporte selectivo entre o núcleo e o citoplasma Poros Nucleares Representações esquemáticas da simetria octogonal do complexo poro nuclear e microfotografia TEM de poros num invólucro corado negativamente (em cima, à direita). (Azevedo, 2005; Cooper & Hausman, 2009) (constituídos por nucleoporinas) Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 5 CROMATINA Complexo de DNA e proteínas originado durante o processo evolutivo, que veio permitir às células eucarióticas conter, num compartimento de aproximadamente 10 µm, a maior parte do seu DNA (≈ 2 m) s CROMATINA (De Robertis e De Robertis, 1996) Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 6 Microfotografia TEM da estrutura em rosário da cromatina obtida pela técnica do estendido CROMATINA nucleossoma Representações esquemáticas de um nucleossoma (à esquerda) e de uma sequência de nucleossomas, primeiro nível da organização da cromatina (à direita) (Cooper & Hausman, 2009) CROMATINA Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 7 CROMATINA Microfotografia TEM da fibra de 30 nm (em cima) e respectivas interpretações esquemáticas (Lodish et al., 2000, 2009) CROMATINA Modelo radial da estruturação da fibra de cromatina (fibra de 300 nm) em interfase Alberts et al., 2002 Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 8 Modelo da estruturação do cromossoma metafásico DNA nucleossomas armação esquelética solenóide de 30 nm (Lodish et al., 1995) Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 9 CROMATINA • Eucromatina • Heterocromatina Constitutiva: - Centromérica; telomérica; intercalar Facultativa: - Cromatina sexual ou corpúsculo de Barr Tipos de Cromatina Inactivação do cromossoma X (Alberts et al., 2002) Heterocromatina facultativa Presente apenas em determinados tipos de células de um organismo ou só em determinados estádios especiais de desenvolvimento Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 10 Cromossomas metafásicos • Transcrição e processamento de RNAs ribossómicos e montagem das subunidades ribossómicas. • Parece intervir também na modificação de alguns RNAs, já que vários tipos de RNA (RNAt, RNAi) se movem para o nucléolo em etapas específicas do seu processamento. Nucléolo Fábrica de produção de ribossomas nas células eucarióticas (De Robertis e De Robertis, 1996) Ribossoma da célula eucariótica Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 11 Ribossomas Componentes das subunidades ribossómicas em ribossomas procarióticos e eucarióticos (Cooper & Hausman, 2007) Polirribossomas Microfotografias TEM de polirribossomas e respectiva interpretação esquemática Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 12 Biogénese dos ribossomas rRNA 18S, 5,8S e 28S Região Organizadora Nucleolar (NOR) rRNA 5S Telómeros dos Cromossomas Proteínas ribossómicas Citoplasma NUCLÉOLO Representação esquemática da organização ultrastrutural nucleolar e microfotografia TEM dum nucléolo (NC) mostrando o componente fibrilar denso (Cf), o componente granular (Cg) e o cromossoma nucleolar (Cr) em íntima ligação com um centro fibrilar (CF) (Azevedo, 2005) Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 13 Nucléolo e biogénese dos ribossomas Nucléolo mostrando o componente fibrilar denso (CfD) marcado com grãos de prata após a aplicação da técnica autorradiográfica. Esta técnica permitiu estabelecer a correlação no processo de biogénese dos ribossomas: DNA Nucleolar Zona Fibrilar Zona Granular Nucléolo e biogénese dos ribossomas Organizador nucleolar estendido para TEM mostrando 11 genes rRNA (genes ribossómicos) consecutivos Configuração em “Árvore de Natal” das moléculas precursoras do rRNA nascente Mapa genético de uma unidade de rDNA (De Robertis e De Robertis, 1996) Prof. Augusto Dinis BIOLOGIA CELULAR 14 Nucléolo e biogénese dos ribossomas Esquemas mostrando o processamento do RNA ribossómico nos nucléolos (Cooper & Hausman, 2009) Processamento do pre-rRNA e montagem das subunidades ribossómicas (Lodish et al., 2004) (Cooper & Hausman, 2009)
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