Aula_Genetica T - Biologia Forense

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Áreas da Biologia Forense e o seu contributo 
na estimativa do intervalo postmortem 
Hugo Paiva de Carvalho 
 
Genética 
2012/2013 
 
 Departamento de Ciências da Vida 
FCTUC 
Estimar o tempo após a morte (PMI) 
 
- Uma das maiores questões nas ciências forenses; 
 
- Grande probabilidade em dar respostas credíveis 
a este assunto!!! 
 
 COMO??? 
 
Como calcular o Intervalo post mortem 
(PMI) ? 
- Genética Forense; 
 
- Entomologia Forense; 
 
- Micologia Forense. 
Genética Forense 
 Utilização de ferramentas moleculares nas 
ciências forenses para estimar o PMI. 
 
• RNA 
 
• miRNA (micro RNA’s) 
 
Genética Forense - RNA 
 RNA é uma molécula pouco estável num decorrente 
período post mortem, sobretudo devido à presença 
ubíqua das ribonucleases!!! 
 
• Bauer et al (2003) procuraram quantificar a 
degradação do mRNA como possível indicador do 
PMI; 
 
• Pela técnica de RT-PCR demonstraram uma 
correlação entre a degradação do RNA com o 
decorrer do PMI, sendo essa degradação similar 
entre as amostras de sangue de indivíduos vivos e de 
cadáveres. 
 
Genética Forense - RNA 
Bauer et al (2003) 
Genética Forense - RNA 
Bauer et al (2003) 
Genética Forense - RNA 
• Bauer (2007) refere que apesar dos bons resultados 
obtidos, a qualidade do RNA é influenciada pela 
temperatura e logo denota que as experiências foram 
realizadas sob condições laboratoriais controladas, o que 
não acontece numa cena real. 
 
• Apesar disto, pode ser demonstrado que o RNA 
permanece intacto após um certo espaço de tempo (24-
48h) após a morte, desde que os corpos sejam 
armazenados em condições ambiente próprias. 
 
• Além disso a utilização da técnica de RT-PCR, para 
aceder à degradação do RNA, produz resultados mais 
eficientes do que técnicas mais tradicionais como 
aquelas que comparam as bandas ribossomais 18s e 28s. 
 
Genética Forense - miRNA 
Courts & Madea (2010) defendem o potencial forense do 
uso de miRNAs (micro RNAs) em relação ao RNA. 
 
• Pelo facto de possuir uma cadeia curta, normalmente só 
possuem cerca de 22 nucleótidos, são mais estáveis que o 
mRNA sendo muito menos susceptíveis contra o 
fraccionamento químico ou físico da sua cadeia; 
 
• Além disso, tendo em conta a caraterística anterior, a 
tipagem dos miRNA tem uma maior poder 
discriminatório do que a tipagem do mRNA. 
 
Entomologia Forense 
• É a ciência que aplica o conhecimento dos 
insectos em procedimentos criminais e judiciais; 
 
• Objectivo principal: estabelecer o PMI dum 
determinado cadáver. 
 
 
 Sucessão dos insectos no cadáver 
 
 
Entomologia Forense 
 Pai et al. (2007), reportam um caso em que tiveram de 
calcular o PMI dum cadáver duma rapariga que tinha 
sido assassinada e depois queimada. 
 
• Curiosamente um mês antes desta ocorrência, e a 
poucos kilómetros do local do crime, estes mesmos 
autores tinham realizado uma experiência; 
 
• Tinham usado um cadáver dum porco queimado para 
estimar o PMI através das espécies de insectos e larvas 
que nele apareceram em vários dias após a morte; 
 
• Registaram a ocorrência das espécies e os seus estádios 
nos vários dias do decorrer da experiência. 
 
Entomologia Forense 
 Pai et al. (2007) 
Entomologia Forense 
• Baseando-se nos registos da experiência anterior , 
compararam as espécies que apareceram nos cadáveres 
bem como os seus estados de desenvolvimento; 
 
• Uma vez que os locais de ambas situações eram 
próximos, o ambiente em si era similar e o tipo de 
insectos e larvas a desenvolverem-se nos corpos seriam 
por isso similares também; 
 
• Com isto os autores estimaram um PMI de 50 horas, oo 
que coincidiu como tempo de desaparecimento da 
vítima(46 horas), após confissão do crime. 
Entomologia Forense 
 Archer et al. (2005) utilizaram a Entomologia forense 
como forma de calcular o PMI em casos de 
isolamento social. 
 
• Num dos casos descritos, foi encontrada uma 
senhora idosa cujo corpo estava rodeado de larvas e 
adultos de escaravelhos (Trogidae) nos tecidos 
moles. 
 
• Foram também encontradas muitos restos de 
cutículas de larva, o que indica que estes insectos 
estão relacionados com o corpo há já alguns meses. 
 
Entomologia Forense 
• Foram também colhidas algumas pupas de moscas, se 
bem que os adultos já tinham emergido alguns meses 
antes. 
 
• Não foi encontrada nenhuma espécie especifica de um 
uma determinada estação do ano, sendo impossível 
determiná-la. 
 
• As espécies encontradas são típicas de ambientes indoor 
de zonas urbanas, e dada a extenção de insectos a 
alimentarem-se de tecidos moles tudo indicou que o 
corpo ali se encontrava há mais de um ano. 
 
 
Última vez que alguém vira esta senhora fora 18 meses 
antes!!! 
 
 Micologia Forense 
 É a disciplina que faz uso dos recursos 
micológicos em investigações criminais . 
 
 
Qual a importância dos fungos nas 
ciências forenses? 
Surgimento de colónias de fungos em cadáveres 
Desprezadas pelos peritos forenses!!! 
Actualmente revelam ter potencial forense 
EXEMPLOS ???? 
Quais são as finalidades? 
 Traçar provas criminais 
 
 Estimar o tempo após a morte (Intervalo postmortem ou PMI) 
 
 Determinar o tempo de deposição do cadáver 
 
 Investigar causas de morte, alucinações ou envenenamentos 
 
 Localizar corpos enterrados 
 
 Guerra Biológica 
 
Micologia Forense 
Caso relatado por Hitosugi et al. (2006): 
 
- Foi encontrado um cadáver de um homem 
de 71 anos no fundo de um poço; 
 
- A sua cara apresentava algumas colónias 
fúngicas brancas; 
 
- No fundo do poço a humidade relativa era 
próxima de 100% , a temperatura era cerca 
de 12-13ºC e a luz era escassa: 
Propício ao desenvolvimento de 
 colónias de microfungos!!!! 
Micologia Forense 
- Queda acidental como causa de morte, após autópsia; 
 
- Foram isoladas amostras de fungos em meio artificial ; 
 
 
 
 
A informação da polícia revelou que o homem tinha sido 
visto 12 dias antes e as provas micológicas permitiram 
estimar um PMI de 10 dias!!! 
Micologia Forense 
- Foram encontradas as seguintes espécies: Aspergillus 
terreous e Penicillium sp.; 
 
- Local da cena de morte com condições de baixa 
temperatura, alguma escuridão e humidade alta 
 
 
 
Não são ideais para atrair insectos, não ocorrendo 
nenhum tipo a desenvolver-se no cadáver!!! 
Micologia Forense 
Caso da Polícia de Tayside, 2009 
 
- Foi encontrado um cadáver dum homem num 
apartamento, vítima de espancamento; 
 
- Por se encontrar num local fechado não havia vestígios 
de larvas nem moscas; 
 
- No entanto desenvolveram-se colónias de fungos 
nalguma partes duma carpete e num sofá, embebidos 
com fluidos corporais. 
 
Micologia Forense 
- Foram medidas as colónias e foram isoladas para 
subculturas em meio artificial para posterior 
determinação das taxas de crescimento; 
 
- Retiraram-se todas as amostras fúngicas da carpete, 
colocou-se num local seco e esperou-se 5 dias para ver se 
cresciam novas colónias; 
 
- Como a humidade relativa era baixa não ocorreu 
crescimento; 
 
 Mas quando se a carpete foi encharcada com sangue de 
bovino e mantida a uma humidade mais alta, houve uma 
proliferação fúngica elevada!!! 
 
Micologia Forense 
- Depois compararam-se o tamanho das colónias, tanto 
das culturas isoladas como as da carpete, com as 
encontradas na cena do crime: 
 
 
 
Sugeriu-se que a morte teria ocorrido 5 dias antes da 
descoberta do cadáver!!!Espécies encontradas: Mucor plumbeus, 
Penicillium brevicompactum e Penicillium citrinum 
 
Micologia Forense 
Caso de assassínio em série de prostitutas, Ipswich, 2006; 
 
- Foram encontrados dois dos corpos das prostitutas 
assassinadas, submersos e envoltos em micélio fúngico com 
evidente crescimento; 
 
- Uma das vítimas possuía uma quantidade de micélio maior 
do que a outra, i.e., uma estaria no local há mais tempo que 
outra. 
 
 
Micologia Forense 
- Estes mantos de hifas eram compostos por uma mistura 
de vários fungos; 
 
- Entre eles havia espécies de Fusarium, Geotrichum, 
Mucor e Pythium. 
 
Tendo em conta a condição do micélio e outras 
características dos cadáveres, estimou-se que o primeiro 
cadáver estaria submerso há cerca de 2 semanas e o 
outro há cerca de 5 semanas. 
Coincidiu com o período tempo em que se encontravam 
desparecidas!!!! 
Pontos importantes a considerar: 
- Conhecer a diversidade de fungos presentes em 
cadáveres; 
 
- Determinar as suas taxas de crescimento; 
 
 
 
Fungos revelam hábitos locais, dependem muito do 
ambiente (Luz, Humidade e Temperatura)!!!! 
Pontos importantes a considerar: 
- Importante: forma de conservação do cadáver ; 
 
- A colheita de amostras deve ser feita por pessoal 
qualificado para o efeito; 
 
 
- Será preciso fazer mais estudos sobre estes aspectos 
 
 
Experiências que espelhem o melhor possível o ambiente 
onde um cadáver pode ser encontrado!!!! 
Micologia Forense 
FIM (???)