aula4 2022

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Meios de cultura e 
provas bioquímicas 
empregados na 
microbiologia clínica
Professor Ivson Cassiano
Meio decultura
• Conjunto de substâncias, formuladas de maneira adequada, capazes 
de promover o crescimento bacteriano, em condições de laboratório.
Cultivo e isolamento (estudo e análise)
Nutrientes necessários 
Multiplicação (desenvolvimento,
Cultivo)
Objetivos Isolar, crescer e identificar
Tintoriais, morfológicos, 
bioquímicos, sorológicos e 
moleculares
Quanto ao 
estado físico
Meio liquido 
(caldo)
Meio 
semissólido 
Meio sólido 
(ágar) 
Quanto a 
finalidade
Meio de 
enriquecimento
Meio de transporte
Meio de seletivo
Meio de diferencial
Meio indicador
Quimicamente 
definido
Quanto a 
composição
Complexos
Diferentes microrganismo tem diferentes 
exigências para o seu crescimento. 
Atenção na escolha do meio de cultura 
ideal para crescimento microbiano.
Atenção nas condições físicas de 
crescimento. 
Agarsangue
O meio de Ágar sangue, usando uma base rica, fornece
condições de crescimento para a maioria dos
microrganismos. A conservação dos eritrócitos íntegros
favorece a percepção da hemólise, úteis para a
diferenciação de bactérias como os Streptococcus spp.
Diferencial 
O ágar sangue é usado
principalmente para cultivar
organismos patogênicos capazes de
criar enzimas extracelulares que
podem causar hemólise no sangue.
hemólise 
processo de destruição dos glóbulos vermelhos no sangue por causa de enzimas 
extracelulares que são produzidas por bactérias 
Alfa hemólise Beta hemólise Gama hemólise 
Ágar EMB (Eosin Methylene BlueAgar)
Seletivo e Diferencial 
Eosina e azul de 
metileno 
Fermentação lactose 
Gram-negativos
Ágar DNAse
Diferencial 
Enzima que quabra DNA 
Ágar MH 
Enriquecimento 
Utilizado para teste de susceptibilidade 
aos antimicrobianos 
Ágar MH sangue 
microrganismos 
exigentes
cepas de Streptococcus pneumoniae e estreptococos beta-hemolíticos
As diretrizes EUCAST atuais recomendam a utilização de MH-F para microrganismos exigentes,
incluindo Streptococcus pneumoniae, Haemophilus ssp., Moraxella catarrhalis, Campylobacter jejuni e
coli, estreptococos do grupo Viridans, estreptococos dos grupos A, B, C e G, Listeria monocytogenes,
Pasteurella multocida, bem como Corynebacterium spp
Ágar SS
Salmonela e 
Shiguella
amostras clinicas fecais
Meio seletivo e 
diferencial 
Ágar SS
Salmonela e 
Shiguella
Meio seletivo e 
diferencial 
Inibem o 
crescimento de 
Gram-positivas 
Ágar SS
Salmonela e 
Shiguella
Meio seletivo e 
diferencial 
Inibem o 
crescimento de 
coliformes fecais
Ágar SS
Salmonela e 
Shiguella
Meio seletivo e 
diferencial 
A fermentação da 
lactose em ácido é 
revelada, na presença 
de vermelho neutro, 
pela formação de 
colônias vermelhas. 
Ágar SS
Ágar CLED
Ágar cistina lactose deficiente em 
eletrólitos
Diferencial 
Meio utilizado 
para 
urocultura
O ágar CLED inibi o movimento 
bacteriano em meio de cultura
Ágar CROMO Seletivos e diferenciais 
Diferencia as bactérias pela cor
moléculas solúveis incolores
substrato (direcionado a 
uma atividade enzimática 
específica)
permite a diferenciação e
identificação sem necessidade de
realizar testes de confirmação.
(a) Candida albicans, (b) C. dubliniensis, (c) C. tropicalis, (d) C. glabrata, and (e) C. krusei (Shettar et al.,2012).
• Quando a enzima do 
organismo alvo cliva o 
conjugado cromogênico 
incolor, o cromóforo é 
liberado. Na sua forma não 
conjugada, o cromóforo 
exibe sua cor distinta e, 
devido à solubilidade 
reduzida, forma um 
precipitado.
Meios de cultura 
clássicos 
Indicador de pH
Meios de cultura chromogenicos
Cromogenico ligado a um substrato 
enzimático. 
Ao acelerar esse processo, 
o microbiologista clínico
pode auxiliar não apenas
no diagnóstico de qual 
infecção um paciente pode
ter, mas também na
seleção da 
antibioticoterapia
adequada para eventual 
tratamento e cura.
Redução na carga de 
trabalho e nos custos
Existe meio de cultura pra fungo? 
Como garantir o crescimento só de 
fungo no meio de cultura? 
AGAR CANDIDA CROMOGÊNICO
Ágar Sabouraud
Meio seletivo para fungos
Ágar citrato
Meio indicador, usado como prova bioquímica 
Citrato como fonte de carbono 
Ágar citrato
Verde – negativo
Azul – Positivo
Ágar TSI
Triple Sugar Iron Agar
Meio indicador, usado como prova bioquímica 
Fermentação 
Não-
fermentativo 
Ágar motility
Meio semissólido = permite o crescimento bacteriano em todo o tubo 
Bactérias imóveis = irão crescer 
somente na linha que foi 
inoculada 
Bactérias móveis = irão 
crescer em todo o meio 
Depois de semeado nos meios de 
cultura o que eu preciso fazer para 
ver o crescimento bacteriano ?
Condições ideias para o 
crescimento microbiano
Tempo 
Fatores físicos
Afinidade por oxigêniomolecular...
AEROTOLERANTES Não usam, mas suportam a atmosfera de O2.
AERÓBIAS
ANAERÓBIAS
ESTRITAS
MICROARERÓFILAS
FACULTATIVAS
ESTRITAS
Utilizam altos teores deO2.
Utilizam baixos teores deO2.
Na ausência de disponibilidade de O2, fazemfermentação.
São consideradas aeróbias ou anaeróbiasfacultativas.
Morrem na presença deO2.
E para anaeróbicos ?
Estufas
Morfologia das colônias 
O que é colônias ?
Por que caracterizar as colônias ?
COR
TAMANHO
BORDA
ELEVAÇÃO
Puntiforme Pequenas 
Média Grande 
Cor da colônia 
FORMA
Colonias puntiformes 
convexas e inteiras 
Colonias filamentosas 
Característica de fungos 
Colonias irregulares, 
papiladas lobuldas