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Os meios de cultura são meios em que há nutrientes mais adequados para o crescimento de microrganismos a serem cultivados em laboratório, seja em uma placa de Petri ou em um tubo de ensaio. O processo em que os microrganismos são introduzidos chama-se inoculação, e quando há o crescimento desses inóculos denominamos como cultura bacteriana. Assinale a alternativa correta quanto às informações dos meios de cultura a seguir: 1. no meio redutor, tem-se a finalidade de cultivar bactérias aeróbias através de meios e métodos que reduzam o oxigênio a que seriam expostas. Esses meios contém o tioglicolato de sódio, que se liga ao oxigênio dissolvido e o elimina. 2. tem-se por objetivo, no meio seletivo e diferencial, facilitar a diferenciação das colônias de uma bactéria desejada em relação ao crescimento de outras colônias na placa. Então, elabora-se um meio que induz o crescimento de bactérias indesejadas para que elas impeçam o crescimento das demais. 3. o meio de enriquecimento tem como objetivo enriquecer uma cultura, não precisando necessariamente fornecer nutrientes e condições favoráveis ao determinado crescimento bacteriano. 4. no meio quimicamente definido, a composição exata dos compostos (substratos orgânicos) embutidos nele é conhecida. Sendo reconhecidos como fastidiosos os micro-organismos que necessitam de poucos fatores para o seu crescimento. 5. no meio complexo são utilizados nutrientes derivados de extratos de leveduras, carnes ou plantas, além de subprodutos desses componentes. O carbono, nitrogênio e o enxofre são fornecidos essencialmente pelas substâncias macromoleculares insolúveis (proteínas). Resposta correta A tecnologia de DNA recombinante (rDNA) na biologia molecular tem por finalidade incorporar esse rDNA, de um humano ou animal, a um genoma de uma bactéria. Um uso bastante interessante e comum para essa tecnologia foi a produção do hormônio do crescimento (hGH) através dessa técnica de recombinação genética pelas bactérias E. coli. A respeito dessa técnica, responda: I- uma enzima de restrição cliva o DNA de dupla fita nos sítios específicos de reconhecimento. II- as clivagens produzem um fragmento do DNA com duas extremidades constantes. III- há o pareamento de bases de dois desses fragmentos de DNA clivados pela mesma enzima de restrição. IV- os fragmentos unidos geralmente formam uma molécula linear ou circular. V- a enzima DNA-ligase é utilizada para unir os dois fragmentos de DNA e produz assim o mDNA. Está correto o que se afirma em: 1. I, II, III e IV. Resposta correta 2. I, II e IV. 3. II, III e IV. 4. Todas estão corretas. 5. I, II e III. A coloração de Gram é uma das metodologias mais aplicadas para o diagnóstico e classificação inicial de bactérias, devido a sua facilidade de execução e baixo custo. Com relação à metodologia de coloração de Gram, é correto afirmar o que consta nas alternativas: I- inicia-se com a coloração primária, que consiste em corar o esfregaço, previamente fixado em calor, com um corante básico de coloração púrpura (cristal de violeta), corando sem distinção todas as bactérias ali presentes; II- após um determinado período de tempo realiza-se a lavagem do corante e a adição de um mordente (iodo); III- em seguida, realizamos a lavagem da lâmina com álcool-acetona, para que haja a descoloração de determinadas bactérias; IV- e logo após, lavamos a lâmina e aplicamos o corante básico de coloração avermelhada (safranina). 1. II, III e IV. 2. I, II e IV. 3. Todas as alternativas estão corretas. Resposta correta 4. I e II. 5. I, II e III. A parede celular é a estrutura mais externa de uma célula bacteriana e é composta de camadas de carboidrato e proteínas (peptideoglicano). O peptideoglicano é uma espécie de rede macromolecular, um dissacarídeo repetitivo ligado por polipeptídeos (formado por monossacarídeos de NAM e NAG), o que confere rigidez e proteção ao circundar toda a célula bacteriana. Assinale a alternativa que pontua corretamente a diferença entre as paredes celulares bacterianas das células gram-positivas e gram- negativas. 1. A parede celular das bactérias gram-positivas consiste em muitas camadas de peptideoglicano, em contrapartida, a parede celular das bactérias gram-negativas tem somente uma ou poucas camadas de peptideoglicano. Resposta correta 2. Nenhuma das alternativas. 3. A parede celular das bactérias gram-negativas tem a presença do ácido teicoico e lipopolissacarídeos (LPS), o que confere uma grande rigidez comparada à parede celular das bactérias gram-positivas. 4. A parede celular das bactérias gram-positivas tem pouca maleabilidade, portanto, o espaço periplasmático das bactérias gram-negativas retém melhor o corante na coloração diferencial de Gram. 5. A parede celular das bactérias gram-negativas tem uma estrutura bastante espessa e rígida. A sorologia é a ciência responsável por estudar a indução de respostas imunológicas através do estímulo da antigenicidade de um patógeno. Comercialmente, existem soluções à base de anticorpos que podem identificar patógenos de importância clínica, os chamados antissoros. Acontece o isolamento da bactéria de interesse e, posteriormente, colocamos essa bactéria em contato com um antissoro conhecido para identificá-la. Com relação aos testes sorológicos, responda a alternativa incorreta: 1. a imunofluorescência indireta consiste em ter ou não a presença de um anticorpo antibacteriano ligado à superfície da célula bacteriana, que será identificada por um anticorpo de marcação fluorescente, ou seja, acontece por intermediação de um anticorpo secundário. 2. no ensaio de imunoabsorção ligado a enzimas (ELISA) direto, são colocados em uma placa de microtitulação, os anticorpos específicos para o antígeno a ser investigado. 3. a imunofluorescência direta consiste em detectar a marcação de um anticorpo antibacteriano complexado à uma molécula de fluorescência. 4. a aglutinação direta passiva é quando se utiliza antígenos solúveis ou anticorpos adsorvidos em partículas insolúveis, como esferas de látex. Uma reação positiva ocorre na presença de um antígeno solúvel conjugado às partículas de látex e anticorpos presentes na amostra de soro do paciente. 5. o ensaio de imunoabsorção ligado a enzimas (ELISA) indireto objetiva pesquisar anticorpos contra o antígeno. O antígeno fica imobilizado na matriz e, posteriormente, adicionamos o soro a ser investigado. Resposta correta A coloração álcool-ácido resistente (Ziehl-Neelsen) tem por característica se ligar fortemente apenas às bactérias que têm em sua estrutura de parede celular um material ceroso. Sendo assim, assinale a alternativa que condiz corretamente com essa técnica de coloração. I- Inicialmente, aplica-se a carbolfucsina (um corante de tom avermelhado). II- Há a fixação do corante na lâmina pelo calor e, logo após, têm-se um processo de resfriamento e lavagem com água. III- Aplica-se o álcool-ácido para descolorir o que foi tratado pelo corante. IV- Em seguida, utiliza-se um contracorante para as células que não são resistentes ao álcool-ácido. 1. Somente I, II e IV estão corretas. 2. Somente I, II e II estão corretas. 3. Todas as alternativas estão corretas. Resposta correta 4. Somente I e II estão corretas. 5. Somente I e III estão corretas. O semeio bacteriano nada mais é que a inoculação do microrganismo no meio onde o mesmo será estimulado a crescer. Garantir a esterilidade do meio onde as bactérias serão expostas é imprescindível, já que a inserção de microrganismos indesejáveis pode ocasionar interferências na cultura desejada. O semeio pode se subdividir com características diferentes. Sendo assim, assinale a alternativa correta: 1. estria reta, estria sinuosa e estria simples são realizadas em placa de Petri. 2. nenhuma das respostas está correta. 3. picada central e difusão são os métodos realizados em meio sólido no tubo. 4. estria simples, método de esgotamento e o método de distensão são realizadosem placa de Petri. Resposta correta 5. estria reta, estria sinuosa e estria simples são realizadas em tubo. Sabemos que o oxigênio é um fator fundamental para fornecer condições adequadas ou inadequadas para o crescimento bacteriano. A depender do percentual dissolvido no meio, podemos encontrar bactérias que tenham afinidade, tolerância ou total rejeição ao mesmo. Com isso, assinale a alternativa incorreta: 1. microaerófilos são obrigatoriamente aeróbios, porém, o oxigênio é requerido em baixa concentração. 2. anaeróbios aerotolerantes toleram a presença de oxigênio no meio e são potencialmente aeróbios. Resposta correta 3. aeróbios obrigatórios são microrganismos que precisam do suporte do oxigênio para o seu desenvolvimento. 4. anaeróbios facultativos têm o crescimento aeróbio e anaeróbio, mas podem ser mais produtivos na presença do oxigênio. 5. anaeróbios obrigatórios têm o crescimento apenas na ausência do oxigênio. As bactérias foram visualizadas pela primeira vez pelo comerciante holandês e microscopista amador Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723), que relatou sua descoberta à influente Royal Society of London, onde descreveu e desenhou morfologicamente as estruturas dessas células. Posteriormente, foram realizados estudos experimentais com o cientista alemão-polonês Ferdinand Cohn (1828-1898), descobrindo a resistência térmica das bactérias e, ainda, houve a contribuição de Robert Koch, o primeiro microbiologista médico que realizou isolamento e caracterização de várias bactérias causadoras de doenças. Com relação à morfologia e o arranjo celular, assinale a alternativa correta: I- Estreptococos são cocos organizados como se estivessem enfileirados. II- Estafilococos são cocos agrupados como em um cacho de uva. III- Tétrades são cocos organizados em oito, sendo quatro em cada plano sagital. IV- Sarcinas são cocos organizados em quatro, unidos formam uma estrutura semelhante a um cubo com duas facetas. V- Diplococos são apenas duas bactérias em formato de bacilos unidas. 1. Somente III, IV e V são falsas. Resposta correta 2. Somente I, II e III são verdadeiras. 3. Somente I, II e V são verdadeiras. 4. Somente II, III e IV são falsas. 5. Somente I, II e IV são verdadeiras. A coloração diferencial de Gram foi desenvolvida por um bacteriologista dinamarquês chamado Hans Christian Gram, em 1884. Essa metodologia permite identificar a que grupo uma determinada bactéria pertence. Sendo assim, bactérias gram-positivas pertencem a que grupo? 1. Nenhuma das alternativas está correta. 2. Coram-se de violeta ou púrpura, retendo a coloração do cristal de violeta. Resposta correta 3. A espessura da parede celular, quanto às dimensões dos espaços intersticiais, não é determinante do resultado final da coloração de Gram. 4. Não conseguem corar, pois o álcool-acetona corrói a parede celular e impede a coloração. 5. Coram-se de rosa ou avermelhado, retêm o corante safranina.
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