relatorio-citologia-2

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Instituto de Engenharias e Ciências do Mar – ISECMAR
Papel de diferentes corantes sobre células da epiderme da cebola
Observação de células do parênquima amiláceo da batata 
Relatório nº 2
 
Elementos:
Bruna da Cruz
Daniela Lima
Edivânia Fernandes
Jacqueline Gomes
Docente: António Pinto Almeida
Resumo
No presente relatório referente a aula prática abordamos alguns experimentos, onde foram analisadas amostras da epiderme da cebola e células da batata, observando todos os seus constituintes. Neste experimento foram utilizados corantes para auxiliar a observação das membranas, núcleos e citoplasmas das células. Os corantes que foram utilizados são solução de Lugol que é um corante de contraste não vital e a solução Azul Metileno que é um corante básico utilizado para colorir principalmente as partes ácidas da célula que são o núcleo e a membrana citoplasmática.
Índice geral
Resumo	i
Índice geral	ii
Índice de figuras	iii
Introdução	1
Materiais	3
Métodos	3
Resultados e Discussão	5
Conclusão	8
Índice de figuras
Figura 1- Observação da célula da cebola na objetiva de 10x	5
Figura 2- Observação da célula na objetiva de 4x com o uso do soluto azul metileno	6
Figura 3- observação das células na batata na objetiva de 4x	6
Figura 4- Observação das células da batata na objetiva de 4x	7
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Introdução
A Célula é a unidade básica estrutural e funcional de todos os seres vivos, em que todas as células provêm de células pré-existentes. As células não possuem um padrão ou um modelo ou um modelo de estruturas nem de constituintes. Conforme for as condições assim teremos um tipo de células. E isso pode ser comprovado na prática, e foi exatamente o que foi feito na aula prática a que se direciona este relatório.
Foi feito a observação de células da epiderme do bolbo da cebola que é uma túnica superficial que cobre a concavidade de cada camada que forma o bolbo da cebola, a estrutura das células da epiderme da cebola é muito semelhante a das células humanas, poies ambas são eucariontes e possuem organelos como núcleo, complexo de golgi e cromossomas (baiadoconhecimento, 22). E foi feito também a observação de células da batata, que podem ser chamadas de amiloplastos. Os amiloplastos que são organelos não pigmentados especializadas em sintetizar e estocar granulas de amido formados através da polimerização da molécula de glicose, eles são essenciais para as plantas, pois servem para estocar material de reserva.
Essas células foram observadas com a ajuda de corantes como, a solução de Lugol que é um corante não vital utilizado para por em evidência as estruturas celulares, e também soluçao Azul Metileno que por sua vez é um corante básico que atua principalmente sobre o núcleo e a membrana citoplasmática que são os constituintes mais ácidos da célula, fazendo com que elas sejam mais expostas a vistas com maior facilidade, isto porque os cromo vão combinar-se com os componentes ácidos do núcleo e da membrana citoplasmática. Este corante pode ser considerado como corante vital, já que, em baixas concentrações ele consegue penetrar a célula oferecendo-lhe a tonalidade mas sem a matar (notapositiva, 2019).
 
Objetivos
· Conhecer a constituição da célula eucariótica vegetal ao microscópio ótico 
· Possibilitar a identificação de diferentes estruturas celulares da célula vegetal
· Verificar que os diferentes corantes atuam de modo diferente sobre estruturas celulares
Materiais e Métodos 
Materiais
Atividade 1 – Papel de diferentes corantes sobre células da epiderme da cebola
· Microscópico ótico composto
· Bolbo da cebola
· Agulhas de dissecção
· Água
· Lâminas e Lamelas 
· Conta-gotas 
· Solução de lugol
· Solução de azul metileno 
· Pinça 
· Tesoura 
Atividade 2- Observação de células do parênquima amiláceo da batata 
· Microscópico composto 
· Batata 
· Agulha de dissecção 
· Lâminas e Lamelas 
· Água 
· Pinça de dissecção
· Conta-gotas 
· Solução de lugol
· Solução de azul metileno
Métodos
Atividade 1 – Células da epiderme do bolbo da cebola
Utilizou-se uma pinça para retirar um fragmento da epiderme da face côncava de uma túnica da cebola, apos isso, colocou-se numa lâmina a pelicula da cebola e adicionou-se com uma gota de água, sendo este o meio de montagem. Cobriu-se cuidadosamente com uma lâmina e observou-se a preparação ao microscópio utilizando a objetiva de menor poder ampliador, seguida das restantes objetivas.
Depois colocou-se duas gotas da solução de lugol na lâmina contida a pelicula da cebola, apos isso, foi colocado no microscópio para ser observado. Utilizou-se a objetiva de 4x, 10x e de 40x. Na objetiva de menor ampliação ilustrou-se um desenho para entender melhor o estudo. Mudou-se para a objetiva de 10x e depois para a objetiva de 40x, que também ilustrou-se desenhos, efetuou-se alguns registros. Retirou-se a lâmina com logol e colocou-se com o soluto azul metileno e repetiu-se todo o processo acima.
Atividade 2 – Observação de células do parênquima na batata 
 Retirou-se da polpa da batata uma fina pelicula, em seguida colocou-se a pelicula da batata na lâmina e adicionou-se uma gota de água, sendo este o meio de montagem. Cobriu-se cuidadosamente com uma lamela, colocou-se a preparação ao microscópico e observou-se com as objetivas de 4x, 10x e de 40x. Que na objetiva de 4x ilustrou-se um desenho e efetuou-se alguns registros. Apos isso colocou-se duas gotas de soluto de lugol na lâmina contida a pelicula da batata. Colocou-se no microscópio para ser observado, na objetiva de 4x conseguiu-se identificar algumas estruturas ai presentes, efetuou-se alguns registros. Mudou-se para a objetiva de 10x e depois a objetiva de 40x que também ilustrou-se alguns registros e foi possível identificar melhor as estruturas ali presentes. Por fim retirou-se a lâmina com logol e colocou-se a lâmina com o soluto azul metileno e repetiu-se todo o processo acima referido.
Resultados e Discussão 
Na atividade 1: Observação das células na epiderme da cebola
Meio de montagem: Água
Na primeira observação feita utilizou-se água (2 gotas de água) como meio de montagem. Iniciou-se a observação com a objetiva de menor ampliação. Feita a focagem, de imediato observou-se um campo de células. Essas células apresentavam uma forma retangular e encontravam-se bem organizadas. Passando para a objetiva de 10x, observou-se a membrana plasmática, a parede celular e o núcleo das células (figura 1). Mudou-se para a objetiva de 40x. Com a mudança do plano de focagem pôde-se observar nitidamente os núcleos pertos das membranas e a distância entre a membrana e a parede celular.
Figura 1- Observação da célula da cebola na objetiva de 10x
Numa observação feita a um microscópio ótico composto e utilizando como meio de montagem a água não é possível ter uma observação muito detalhada. Isto porque as células aparecem muito transparente e só se consegue identificar o citoplasma, a membrana plasmática, a parede celular e um pouco do núcleo (biomedicinapadrão, 22).
Meio de montagem: Solução de Lugol 
Com a observação de 4x, o que foi observado foi quase idênticas as observações com água. Mas houve algumas diferenças notáveis. A célula apresentou um breve escurecimento da membrana e do citoplasma, o que tornou a imagem bem mais nítida. Usando a objetiva de 10x observou-se a membrana plasmática e o núcleo mais nitidamente. Com a objetiva de 40x foi possível a observação de algumas estruturas no núcleo, e para além disso fez-se repetidas mudanças de plano, onde observou-se a espessura da membrana plasmática e a parede celular.
O lugol é um corante utilizado para melhorar a visualizações de células por este motivo, a imagem ficou mais nítido do que quando se utilizou água. Mas essa diferença vai variar de microscópio para microscópio, pois a microscópio com luz amarela, onde o lugol não se destaca. E há microscópio de luz branca onde se nota de imediato a presença do corante lugol.
Meio de montagem: Solução de Azul Metileno
Feito a montagem da lâmina com duas gotas da solução azul metileno, de imediatoocorreu uma reação. Antes mesmo da amostra ser levada ao microscópio, observou-se um escurecimento da mesma. Na observação feita coma objetiva de 4x, observou-se que a membrana plasmática, a parede celular e o núcleo se encontravam mais escuros que outras estruturas da célula (figura 2). Passando para a objetiva de 10x, observou-se mais detalhadamente a membrana. Por fim com a objetiva de 40x conseguiu-se ver o núcleo de forma isolada, apresentando todos os seus constituintes. 
Figura 2- Observação da célula na objetiva de 4x com o uso do soluto azul metileno
Com a utilização do corante azul metileno houve um escurecimento da membrana, parede celular e o núcleo da cebola, uma vez que estas são estruturas ácidas, estabeleceram uma afinidade com o corante que é básico (microbiologia, 22). 
Na atividade 2: Observação de células do parênquima amiláceo da batata
Meio de montagem: Água
Na primeira observação utilizou-se a água como meio de montagem. Em que na objetiva de 4x observou-se somente alguns granulados de amido (figura 3). Mas já na objetiva de 10x e de 40x conseguiu-se identificar melhor a parede celular e os amidos agrupados, em forma ovoides semelhante a pequeninas batatas.
Pode-se chegar a conclusão que com o meio de montagem a água não é possível ter uma observação detalhada, ou seja, só se consegue identificar a parede celular e os amiloplastos.
Figura 3- observação das células na batata na objetiva de 4x
Meio de montagem: Solução de Lugol 
Utilizando a objetiva de menor ampliação observou-se um campo de células não muito alterado em relação a água. As células observadas se encontravam todas dispersas, umas sobrepostas a outras, apresentando tamanhos variados e essas células estruturas dentro. Mudando para a objetiva de 10x foi possível observar que estas pequenas estruturas eram grãos de amido em que estes apresentavam-se uma cor mais escura ficando assim mais visíveis. Já na objetiva de 40x foi observado uma única célula, onde era possível observar a membrana, a parede celular e o núcleo e estes apresentam uma cor mais escura em relação ao citoplasma. 
O lugol normalmente na batata é utilizado para determinar a presença de amido. Esse lugol reage com o amido presente na batata resultando de uma coloração preta ao interagir com a cadeia amilose (infoescola, 22). Devido a reação do lugol e do amido foi possível observar os amidos de cor mais escura.
Meio de montagem: Solução de Azul Metileno 
Há muita diferença de visualização ao usar o corante azul metileno para observar as células da batata em relação a utilização somente com água ou lugol. Com a objetiva de 4x conseguiu-se identificar os grãos de amido e o citoplasma (figura 4). Mas já na objetiva de 10x e de 40x conseguiu-se identificar o núcleo, a parede celular, a membrana plasmática e os grãos de amido de forma mais detalhada.
Figura 4- Observação das células da batata na objetiva de 4x
Concluiu-se que o corante azul metileno é muito eficaz nas componentes ácidas da célula, já que ele é um corante básico, então haverá uma maior afinidade em relação a proporções com água e lugol.
Conclusão 
As imagens vistas ao microscópio ótico composto podem apresentar diferenças conforme o que for utilizado na montagem da lâmina. E um exemplo claro são os corantes. 	Quando se adiciona corante a uma amostra aumenta as chances de observar mais nítido e detalhadamente uma célula. 
No nosso caso podemos concluir que, adicionando água na amostra da epiderme da cebola e na amostra do parênquima amiláceo da batata só conseguimos observar a célula, a membrana plasmática, o nucleio, e a parede celular. Isso porque são estruturas ácidas e os corantes são básicos. Essa afinidade fez com que emitem um sinal facilitando a observação. Então os corantes são de grande importância.
Referências Bibliográficas 
baiadoconhecimento. (20 de 11 de 22). baiadoconhecimento. Obtido de baiadoconhecimento: https://baiadoconhecimento.com/
biomedicinapadrão. (20 de 11 de 22). biomedicinapadrão. Obtido de biomedicinapadrão: biomedicinapadrão.com.br
infoescola. (20 de 11 de 22). infoescola. Obtido de infoescola: https://www.infoescola.com/
microbiologia. (20 de 11 de 22). microbiologia. Obtido de microbiologia: http://microbiologia.comunidades.net
notapositiva. (19 de 9 de 2019). notapositiva. Obtido de notapositiva: https://notapositiva.com/celulas-da-epiderme-da-cebola/#
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