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Testes cromatográficos R E S U M O Imunocromatografias O teste imunocromatográfico é um tipo de teste rápido que identifica doenças infecciosas, hormônios e outros analitos, por associação específica de anticorpos com partículas coloridas conjugadas. O resultado de um teste de imunocromatografia geralmente considera a presença de antígenos na amostra. → Qualitativos → Teste de triagem → Fácil interpretação → Detecção de antígenos ou anticorpos → Exemplos de amostras: sangue, soro, plasma, urina Tipos de Imunocromatografia: → Fluxo lateral: → Dupla migração: → Imunoconcentração: → Fase sólida: Princípio da Imunocromatografia (Teste de migração lateral): → O sistema é realizado em uma matriz constituída de membrana de nitrocelulose. → O antígeno ou o anticorpo é fixado na membrana na forma de linhas e o restante da membrana é bloqueado com proteína inerte. → Para detectar antígeno: ● Emprega-se um anticorpo marcado específico ao antígeno pesquisado, e um anticorpo específico de captura, ligado à matriz. → Para detectar anticorpo: ● Utiliza-se um anticorpo anti-imunoglobulina marcado; e um antígeno específico ligado à matriz. → Suporte do conjugado = É a parte do meio/a parte visível do teste no cassete (que é o que cobre a membrana). É onde irá ocorrer a interação antígeno/anticorpo → Região de controle (C) = Região confirmatória para o teste em questão, é a partir dessa linha que mostra se o teste está funcionando → Linha teste (T) = Linha que irá ser formada se a substância alvo estiver presente, ou seja, for reagente. → Filtro de adsorção = Localiza-se na outra ponta da membrana, e funciona como uma espécie de ralo.É esse filtro que mantém o fluxo sempre em sua direção, impedindo que a amostra volte em outro sentido. Interpretação: → POSITIVO: Duas linhas são visíveis, sendo uma linha na região controle (C) e outra na região teste (T). A intensidade de cor da linha teste (T) poderá variar de acordo com a concentração presente na amostra. Todavia, qualquer intensidade de cor na linha teste indica resultado positivo. → NEGATIVO: Apenas uma linha é visível na região controle (C), não sendo observada linha na região teste. → INVÁLIDO: Não é evidenciada a linha controle (C). As razões mais comuns de falha são o volume insuficiente de amostra ou falha no procedimento técnico. Neste caso, reler a técnica e repetir o teste com uma nova tira. ------------------------------------------------------------- TESTES RÁPIDOS: → Também chamados de testes remotos, são conhecidos por dispensarem o uso de reagentes e a presença de um técnico especializado → Resultados em até 30 minutos; podem ser usados como triagem Exemplos de testes: Detecção de anticorpos: → Dengue, COVID-19, Sífilis ● Necessário considerar o período de janela imunológica Detecção de antígenos: → Testes de gravidez (Detecção de beta-HCG1) → Hepatite B ● Teste HBsAg 1 glicoproteína hormonal produzida pelas células trofoblásticas sinciciais nos líquidos maternos. No início da gravidez, as concentrações de hCG no soro e na urina da mulher aumentam rapidamente, sendo um bom marcador para testes de gravidez
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