4 - Parasitologia - estágio

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Parasitologia - estágio
 
A parasitologia é a área que estuda o parasita, mais especificamente quando o parasita vive em um hospedeiro e causa prejuízos no mesmo através do exame parasitológico de fezes (EPF). Existem diversos meios de diagnosticar parasitas em humanos, iniciando com o exame macroscópico o qual analisamos a consistência da amostra (diarreica, pastosa, semi-pastosa e formada); coloração (amarela, marrom, esverdeada ou sanguinolenta); presença ou ausência de muco e se temos presença ou não de sangue, e seguindo com o exame microscópico o qual pode ser realizado de diversas formas, como método direto, método de Hoffman e vários outros buscando informar a presença de ovos de helmintos, cistos de protozoários ou larvas na amostra analisada. Os exames são diferenciados em qualitativos que são utilizados para mostrar a presença das formas parasitarias e quantitativos para realizar a contagem. (SUS, 2016) 
 
1. Método Direto 
 
O método direto é usado em pesquisa de trofozoitos de protozoários, o qual identifica cistos de protozoários e larvas de helmintos, o resultado depende da carga parasitaria do paciente. 
· Método direto (procedimento) 
· Os materiais necessários são: amostra e fezes do paciente, lugol, lâmina e palito 
· Acrescentamos 3 gotas de lugol na lâmina limpa; 
· Com o palito inserido em várias partes da amostra, transferimos uma pequena parte da amostra para a lâmina, espalhando a com o lugol; 
· Depois do esfregaço pronto levamos para o microscópio, iniciando a avaliação na objetiva de 10x e depois com a objetiva de 40x. 
 
2. Método de Hoffman, Pons e Janer 
 
Esse método é de sedimentação espontânea, o qual é mais sensível para ovos, larvas de helmintos, utiliza de atividade gravitacional na água. 
 
· Método de Hoffman, Pons e Janer (procedimento) 
· Depois de realizado o exame macroscópico com a amostra precisamos separar os materiais utilizados no procedimento, sendo eles: copo descartável, palito, água destilada, peneira, funil, pipeta pasteur, lâmina e lugol 
· Primeiro passo é adicionar 10g da amostra de fezes no copo com ajuda do palito e adicionar 5 ml de água destilada; 
· Necessário dissolver a amostra toda e depois usar a peneira sobre o funil, despejando a amostra do copo sobre a peneira e adicionando mais 20ml de água destilada, preciso completar o cálice com água até a borda; 
· Depois de 2h á 24h despejar o liquido sobrenadante, e com a pipeta pasteur coletar uma porção do fundo da amostra restante adicionando na lâmina;
· Adicionar 2 gotas de lugol sobre a amostra da lâmina e levar ao microscópio iniciando com o foco de 10x e passando para o de 40x. 
3. Método de Willis 
O método de Willis utiliza a flutuação de ovos de helmintos e cistos de protozoários para sua pesquisa. 
 
· Método de Willis (procedimento) 
· Depois de realizado o exame macroscópico separamos a amostra, uma solução saturada de sal, tubo, lâmina, lugol e lamínula 
· O primeiro passo é adicionar 10g da amostra de fezes e diluir em um recipiente com a NaCI; 
· Depois de diluído, o material é transferido para um tubo que deve ser completado até a sua borda; 
· Adicionamos uma lâmina na boca do tubo, de maneira que a lâmina entre em contato com a amostra, o que deve ficar por 5 minutos; 
· Depois do tempo finalizado a lâmina é retirada rapidamente de cima do tubo e adicionamos lugol; 
· Depois de pronta a lamina analisamos na objetiva de 10x e depois de 40x. 
4. Método de Faust 
O método de Faust permite a flutuação de estruturas leves, é utilizado para detectar a presença de cistos, ovos leves e também alguns cocistos de protozoários. 
 
· Método de Faust (prodecimento) 
· Diluímos 10g da amostra de fezes com 20ml de água em um copo descartável; 
· Depois de completamente diluída a amostra ela vai ser filtrada através da gaze para um tubo de ensaio; 
· Será levada para a centrifuga por 1 minuto á 2.500 RPM; 
· O liquido vai ser desprezado e ressuspendendo com água novamente realizamos o método até que o liquido do sobrenadante fique claro; 
· Depois de ficar claro, desprezamos novamente o sobrenadante e ressuspendemos o sedimento com solução de sulfato de zinco 33%; 
· Centrifugamos novamente em 2.500RPM por 1 minuto; 
· Com a alça de platina transferimos a película que ficou concentrada na parte superior da amostra para a lamina, adicionamos 1 gota de lugol e inserimos a lamínula; 
· Levamos a lâmina para o microscópio e comecamos com a objetiva de 10x e passamos para a de 40x. 
5. Método de Rugai 
 Esse método é utilizado para pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis. 
· Método de Rugai (procedimento) 
· Utilizaremos o pote com a amostra para realização desse procedimento; 
· Passamos a amostra de fezes contida do coletor para a tampa, de maneira que a tampa fique completa com a amostra; 
· Envolvemos a tampa com gaze, como se fosse uma trouxa; 
· Em um cálice com água aquecida em 45° inserimos a trouxa com a amostra, de modo que a parte da tampa em que tem a amostra entre em contato com a agua; 
· Depois de 1h de repouso retiramos a trouxa da água; 
· Coletamos o sedimento contido no fundo do cálice com uma pipeta pasteur e transferimos para uma lâmina; 
· Coramos com lugol e levamos para o microscópio.