Relatório 5 - Extração de DNA

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ 
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE 
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E FARMACOLOGIA 
DOCENTE: JOÃO MARCELO DE CASTRO E SOUSA 
DISCIPLINA: BIOQUÍMICA PARA FARMÁCIA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
EXTRAÇÃO DE DNA 
 
 
 
 
 
 
AGATA DA SILVA MACHADO 
LIARA LYN BENEDITO MOURA 
MARCOS JEFFERSON DA SILVA COQUEIRO 
VINICIUS CAVALCANTE SANTOS 
VITÓRIA RÉGIA VASCONCELOS MARQUES DOS SANTOS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Teresina – PI 
2022 
 
RESUMO 
O DNA (ácido desoxirribonucleico) é um dos ácidos nucleicos que constituem o 
material genético da maioria dos seres vivos. O DNA, em sua forma original de dupla 
fita, apresenta alta estabilidade e é muito resistente e se mantém inalterado em várias 
condições de meio. A partir da extração do DNA, será possível verificar o aspecto do 
DNA, observar que o DNA pode ser encontrado em diversos tipos de células e debater 
e aprofundar questões científicas relacionadas à genética. 
Palavras-chaves: ácido desoxirribonucleico; ácido nucleico; estabilidade; resistência. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
SUMÁRIO 
1 INTRODUÇÃO ............................................................................................................ 3 
2 OBJETIVOS ................................................................................................................ 4 
3 MATERIAL E MÉTODOS ........................................................................................... 5 
3.1 MATERIAL E REAGENTES ................................................................................. 5 
3.2 MÉTODOS ............................................................................................................ 5 
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO ................................................................................. 6 
5 CONCLUSÃO.............................................................................................................. 8 
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................. 9 
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1 INTRODUÇÃO 
A extração do DNA é um método primordial para o desenvolvimento da biologia 
molecular, que é de suma importância nas áreas laboratoriais e forense. No processo 
de extração, a lise ou a dissolução dessas membranas é importante para se liberarem 
as moléculas de DNA em meio aquoso, que logo após será separado por densidade 
quando for misturado com o álcool etílico 95% (REBOUÇAS, 2014). 
O DNA tem extrema importância para o corpo humano, pois é o responsável 
por controlar as funções celulares. Cada ser humano possui diversas moléculas, como 
proteínas que regulam, desencadeiam, impedem ou realizam as reações para um bom 
funcionamento do organismo. É o responsável por carregar consigo a “receita” para a 
produção das proteínas, por exemplo (NELSON; COX, 2014). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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2 OBJETIVOS 
A realização desse experimento teve por objetivo analisar as características do 
ácido desoxirribonucleico a partir da sua extração, bem como sua importância 
biológica para a genética. 
 
 
 
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3 MATERIAL E MÉTODOS 
3.1 MATERIAL E REAGENTES 
• Uma banana (aproximadamente 20g) 
• Uma peneira de plástico; 
• Um detergente líquido neutro; 
• Um almofariz e um pistilo; 
• Água destilada; 
• Béquer de 100 ml e 200 ml; 
• Duas pipetas graduadas; 
• Pipetador; 
• Tubos de ensaio; 
• Uma espátula; 
• Um bastão de vidro; 
• Banho-maria a 60oc; 
• Sal de cozinha (NaCl); 
• Recipiente com gelo; 
• Álcool etílico 95% gelado; 
 
3.2 MÉTODOS 
Em um almofariz, com o auxílio de um pistilo, foram amassados cerca de 20g 
de banana até obter-se uma massa homogênea. Em um béquer, foram misturados 5 
ml de detergente neutro com 1 g de sal de cozinha (NaCl), e completou-se até 50 ml 
de água destilada, sendo a mistura obtida a solução de extração. 
Adicionou-se a banana amassada a solução de extração. A mistura foi 
homogeneizada com um bastão de vidro e levada ao banho-maria a 60oc pelo tempo 
de 30 minutos. 
Passados os 30 minutos no aquecimento em banho-maria, levou-sea solução 
para resfriar em um recipiente com gelo. Ao mesmo tempo, mexeu-se vagarosamente 
com um bastão de vidro. Após o resfriamento, a mistura foi rapidamente levada para 
coar na peneira. Passou-se 7 ml do filtrado para um tubo de ensaio, onde foi 
adicionado vagarosamente 7 ml de álcool etílico 95 % gelado. Inverteu-se o tubo com 
cuidado até a formação do precipitado do DNA. 
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DNA 
Fase alcóolica 
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO 
Após a realização do experimento foi possível identificar o DNA, podendo ser 
visualizado no precipitado esbranquiçado na figura 1 (DNA misturado com proteínas) 
e no filamento branco na figura 2 (somente o DNA). 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Para a realização do presente experimento foi necessário a divisão em três 
etapas para que assim houvesse a obtenção de um emaranhado branco de 
filamentos, próximo a superfície do tubo de ensaio. Primeiramente ocorreu a 
maceração da banana, onde houve o rompimento das paredes celulares e posterior 
liberação de núcleos. Após essa etapa houve a mistura da banana à solução de 
extração, para que assim obtivesse a separação das estruturas de DNA e proteínas, 
desfazendo o enovelamento e deixando o DNA linearizado. Por fim houve o 
isolamento do DNA por meio da adição do álcool etílico gelado à solução (PINTO, 
2012). 
O NaCl foi utilizado no experimento para desintegrar os núcleos e os 
cromossomos das células, assim como separar o DNA cromossômico das proteínas. 
Pois, por ser um sal, ele irá se dissociar e contribuir com íons negativos e positivos. 
Os íons negativos irão neutralizar a carga das proteínas histonas, enquanto os íons 
positivos irão neutralizar as cargas negativas do DNA, favorecendo a aglomeração de 
suas moléculas ao fazer com que estas não sofram repulsão entre si, além de 
aumentar a densidade do meio, o que irá facilitar a migração do DNA (CAMILA, 2022). 
Figura 1. Precipitação do DNA. Figura 2. DNA isolado após a adição do álcool etílico. 
Fonte: Acervo pessoal, 2022. Fonte: Acervo pessoal, 2022. 
Fase aquosa 
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Já o detergente foi utilizado afim de romper a bicamada lipídica presente na 
membrana celular. Pois, com o rompimento dessa bicamada a camada será destruída 
e, consequentemente, o citoplasma será liberado, permanecendo na solução 
enquanto o DNA começa a se precipitar (PENKAL; et al, 2016). 
Por fim, ao se adicionar o álcool etílico 95% (gelado) à solução nota-se que ele 
irá reagir fazendo com que o DNA da banana se aglutine e se una formando uma 
massa filamentosa e esbranquiçada como visto na figura 2. Tal reação ocorre devido 
a insolubilidade do DNA em solução com o álcool etílico, sendo assim, quanto mais 
álcool gelado for adicionado, mais insolúvel o DNA irá se apresentar. Com isso é 
possível visualizar o DNA na superfície da solução na figura 1 ou isolado do álcool e 
da solução formando um filamento esbranquiçado na figura 2 (LOUREDO, 2022). 
Ademais, é de suma importância a variação de temperatura para o sucesso do 
experimento. Pois, ao aumentar a temperatura do meio ocorrerá o agitamento das 
moléculas e assim as membranas lipídicas começam a se desestabilizar. Além de 
promover a desnaturação de proteínas, inativando enzimas que possam degradar o 
DNA, como as DNAases. Já no resfriamento ocorrerá a desidratação do DNA, o que 
irá facilitar a sua visualização após o agrupamento das moléculas, como observado 
na figura 2 (PORTAL EDUCAÇÃO, 2022). 
 
 
 
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5 CONCLUSÃO 
 Através do experimento de extração de DNA, foi possível isolar o DNA por meio 
da utilização de substâncias auxiliares, tais como: NaCl, que auxiliou na desintegração 
dos núcleos e dos cromossomos das células, bem como separar o DNA 
cromossômico das proteínas; detergente, que foi utilizado para romper a bicamada 
lipídica presente na membrana celular; o álcool etílico 95%que provocou a 
aglutinação do DNA da banana devido a sua insolubilidade com o mesmo; e a variação 
de temperatura que promoveu a desnaturação de proteínas, inativando enzimas que 
possam degradar o DNA, como as DNAases. 
 
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
CAMILA. Extração do DNA. Disponível em: 
<http://biomomento.blogspot.com.br/2011/02/extracao-de-dna.html>.Acesso em: 14 
ago. 2022. 
 
LOUREDO, P. Atividade prática para extração do DNA. Disponível em: 
<https://educador.brasilescola.uol.com.br/estrategias-ensino/atividade-pratica-para-
extracao-dna.htm>. Acesso em: 14 ago. 2022. 
 
NELSON, D.; COX, N. Princípios de bioquímica de Lehninger. 6 ed. rev. Porto 
Alegre: Artmed, 2014. 1250 p. ISBN 978-85-8271-073-9. 
 
PENKAL, K. et al. Extração do DNA e eletroforese. Disponível em: 
<https://www.passeidireto.com/arquivo/26347434/relatorio-extracao-de-dna-e-
eletroforese>. Acesso em: 14 ago. 2022. 
 
PINTO, R.S. Extração do DNA. Disponível em: 
<https://pt.scribd.com/document/89885634/Relatorio-da-Pratica> Acesso em: 14 
ago. 2022. 
 
PORTAL EDUCAÇÂO. Desnaturação e renaturação. Disponível em: 
<https://www.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/biologia/desnaturacao-e-
renaturacao/23317.> Acesso em: 14 ago. 2022. 
 
REBOUÇAS, N. A. Biologia Molecular Aplicada à Medicina: Fundamentos 
Teóricos e Metodológicos. Disponível em: <http://www.i2bio.org/wp-
content/uploads/BIOLOGIA-MOLECULAR-APLICADA-À-MEDICINA-
FUNDAMENTOS-TEÓRICOS-E-METODOLÓGICIOAS.pdf>. Acesso em: 15 ago. 
2022 
http://biomomento.blogspot.com.br/2011/02/extracao-de-dna.html
https://www.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/biologia/desnaturacao-e-renaturacao/23317
https://www.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/biologia/desnaturacao-e-renaturacao/23317
	1 INTRODUÇÃO
	2 OBJETIVOS
	3 MATERIAL E MÉTODOS
	3.1 MATERIAL E REAGENTES
	3.2 MÉTODOS
	4 RESULTADOS E DISCUSSÃO
	5 CONCLUSÃO
	REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS