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Diagnóstico laboratorial de TB A prova tuberculínica é utilizada para detectar uma infecção prévia por M. tuberculosis – não confirma a existência da doença. É baseada na reação de hipersensibilidade IV contra os antígenos (chamada de tuberculina, PPD ou Mantoux). Não gera memória imunológica. Não detecta infecção recente – é necessário de 3 a 12 semanas para o paciente se tornar positivo. Diagnóstico (prova tuberculínica, baciloscopia, cultura e outros métodos) • Prova tuberculínica: o Injeção intradérmica de 0,1mL da solução tuberculina; o Realizada no terço medial do braço esquerdo; o Aplicação deve ser intradérmica – com 5 a 15º. o Após a aplicação forma-se uma pápula de aproximadamente 10mm que some em 10 minutos. o O resultado deve ser lido em 48 até 72 horas (máximo de 96h); o Quando positivo, a pápula fica com um infiltrado nodular, plano e irregular acompanhado de uma área eritematosa definida; o A MEDIDA DEVE SER APENAS DA PÁPULA – NÃO SE MEDE O ERITEMA. o O resultado é dado como positivo quando a pápula forma mais que 10 mm, e menor que 5 mm é considerado não reativo. o Se o paciente for HIV positivo, considera a prova tuberculínica positiva se a reatividade for igual ou maior que 5 mm. o Influência da BCG = 50% dos vacinados terão PT + de até 14mm e vai diminuindo com o passar do tempo. Para vacinados a menos de 2 anos a PT vai ser considerada positiva se > ou = a 15mm, e para os vacinados a mais de 2 anos deve-se considerar positiva quando for maior ou igual a 10mm. Coleta de amostras: escarro espontâneo, induzido, lavado gástrico, aspirado transtraqueal e lavado brônquico. PELO ESCARRO ESPONTÂNEO: • Obtido após esforço da tosse • Possui maior riqueza bacilar • Pode conter fragmentos necróticos (caseum) • Estável na geladeira (de 2 a 8 ºC por até 7 dias) • Preferencialmente 2 coletas • Coletar em local aberto e com boa ventilação • Necessita: água para ingerir durante a coleta; frasco coletor e papel toalha ou guardanapo. • Pedir ao paciente: higienizar a mucosa oral somente com água e lavar as mãos; retirar próteses dentárias. • Técnica: inspire profundamente pelo nariz, retenha o ar por alguns segundos e expire. Repita isso 3x e na última tussa com esforço. Após tossir, abra o pote e expectore a secreção sem encostar os lábios ou colocar o dedo dentro do pote. • Repete-se o processo até conseguir de 5 a 10 mL (se o volume não for atingido, enviar ao laboratório a quantidade que se tem). • Segunda coleta: no domicílio. Ingerir bastante água na noite anterior. Primeira atividade do dia preferencialmente em jejum. Se estiver em tratamento para TB, ingerir os medicamentos só após a coleta. E proceder com os demais cuidados para manter o material íntegro. PELO ESCARRO INDUZIDO: • Nebulização com solução com solução salina hipertônica 3% • Indicar que a coleta foi obtida após indução • Normalmente é utilizada em pacientes AIDS positivo e pacientes em tratamento para TB BACILOSCOPIA: • Coloração de GRAM para identificar o agente. -> Coloração de Ziehl-Neelsen: • Resultado negativo é aquele em que não são encontrados BAAR em 100 campos • Quando é encontrado de 1 a 9 BAAR em 100 campos deve-se relatar a quantidade de BAAR obtidas. • A amostra é positiva quando são encontrados de 10 a 99 BAAR em 100 campos A baciloscopia é obrigatória na análise de todas as amostras, tanto para diagnóstico quanto para controle do tratamento. A cultura é obrigada nos casos em que a amostra não é o escarro; em casos em que o escarro dá negativo várias vezes na baciloscopia, mas o paciente permanece sintomático respiratório; e no caso para avaliação de farmacoresistência (aqueles que não respondem ao tratamento). -> Meios de cultura: • Sólidos (Löwenstein-Jensen; Ogawa; Middlebrook 7H10; Middlebrook 7H11) -> Métodos moleculares: • PCR (amplifica o DNA, extremamente rápido, sensível, específico) -> Teste do nitrato: • M. tuberculosis produz uma enzima (nitrato redutase) que reduz nitrato em nitrito • É feita então a detecção do nitrito com uma substância (alfa-naftilamina) • A reação é positiva quando fica vermelha ou rosa; em casos de negativo, a infecção é por M. bovis -> Teste da niacina: • M. tuberculosis não tem a enzima que converte niacina para ribonucleotídeo de niacina (então acumula niacina na amostra/no meio de cultura) • Detecta a presença de niacina pela adição de algumas substâncias • Reação positiva = tubo amarelado. Quando negativo, a infecção é por M. bovis • Os reagentes do teste são tóxicos
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