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Todas as amostras de sêmen são reservatórios potenciais para os vírus HIV e hepatite e as precauções padrão devem ser observadas em todos os momentos durante análise Espermograma O que é? Exame que estuda e analisa alterações do líquido seminal Avaliação físico-química, qualiquantitativa e morfofuncional do sêmen e seus componentes Serve para... Avaliar infertilidade Monitoramento cirúrgico (pós-vasectomia) Acompanhamento terapêutico Pesquisas O sêmen é composto por... Como os espermatozoides são formados? A coleta da amostra... Diversos fluidos produzidos em vários órgãos reprodutivos PRÓSTATA Líquido leitoso (fosfatase ácida e enzimas proteplíticas) VESÍCULA SEMINAL Líquido com frutose e outros nutrientes TESTÍCULOS Produção dos espermatozoides EPIDIDIMO Armazenamento dos espermatozoides Formados em 74 dias TRÊS FASES Espermatocitogênese, Meiose e Espermiogênese CÉLULAS GERMINATIVAS Produção de espermatozoides CÉLULAS DE SERTOLI Suporte e nutrientes para células germinativas durante espermatogênese Método preferencial = masturbação Coleta após abstinência sexual (2 a 7 dias) Amostra que reflita a contagem eviabilidade espermática Paciente deve ficar em jejum (12 horas) Recipiente deve ser de vidro ou plástico, limpo e com abertura ampla Maior parte dos espermatozoides está contida na primeira porção do ejaculado Necessário registrar: Nome do paciente e data de nascimento Medicamentos em uso Motivo do exame Período de abstinência sexual Integridade da amostra Dificuldade com coleta (perda de material) Horário preciso da coleta e recebimento da amostra como... Amostras que aguardam análise devem ser mantidas a 37ºC Não se deve coletar em preservativos (espermicidas) Fase pré-analítica tem interferência direta na avaliação morfofuncional e número de espermatozoides A análise físico-química... OMS preconiza Dentro de 60 minutos deve ao menos preparar lâmina para coloração e avaliação morfológica Análise microbiológica deve ocorrer dentro de três horas Após quatro horas ou no dia seguinte (se amostra congelada) pode-se fazer detecção de marcadores de glândulas acessórias e testes com anticorpos Liquefação e Coagulação Após coleta e recebimento da amostra, deve-se observar (de forma cronometrada) quanto tempo foi necessário para liquefação do líquido. Se não houver coagulação deve ser relatado Analise da amostra não pode começar até que liquefação tenha ocorrido Tempos de liquefação acima de 60 minutos são considerados anormais SE... Aos 30 minutos não se liquefez, aguardar 60 minutos Aos 60 minutos não se liquefez, adotar alternativas (amilase ou bromelina) e relatar Início da liquefação ocorre em 15 minutos ATENÇÃO Fios de muco e aglutinação dos espermetazoides podem interferir na análise Aspecto Opaco e homogêneo (se não apresentar grumos de gelatina) Parece translúcido, mas quando concentração de espermatozoide é baixa, amostra pode parecer quase límpida Aumento da turvação branca indica presença de leucócitos e infecção no trato reprodutivo Volume Odor Cor pH Viscosidade Provas Bioquímicas Análise microscópica Volume pode ser obtido por pesagem ou tubo cônico graduado de vidro Valor de referência (OMS): limite inferior ≤ 1,5 mL HIPOSTERMIA (< 1,5 mL) Problemas de coleta, ausência de abstinência, insuficiência vesicular ou prostática, ejaculação retrograda, deficiência de andrógenos, obstrução do ducto ejaculatório ou ausência de vasos deferentes congênita, erros pré-analíticos HIPERESPERMIA (> 5mL) Abstinência prolongada, inflamação de glândulas acessórias, tumores beningnos ou malignos da prostata ASPERMIA Ejaculação retrograda e agenesia glandular Odor característico é devido a presença de espermina (85%) Influenciam o odor a espermidina (5-7%) e a putrescina (5-7%) Cores típicas: cinza, branco e amarelo-claro Odor característico de mofo (hipoclorito de sódio/pútrido) CORES ATÍPICAS Amarela - Maior concentração de flavina no sêmen, icterícia e infecção Amarelo-escura - Associada a drogas Castanho ou vermelho - Pode conter sangue (hemorragia) Rosa - Processos inflamatórios Mensurado em até uma hora após coleta (sêmen torna-se mais ácido ou alcalino à medida que amostra envelhece) Valor de referência (OMS): ≥ 7,2 pH ÁCIDO Aplasia congênita de dutos deferentes e vesículas seminais pH ALCALINO Infecção do trato reprodutos ATENÇÃO pH reduzido pode estar associado ao aumento do fluido prostático, obstrução do ducto ejaculatório ou vesículas seminais mal desenvolvidas Avaliada durante mensuração do volume ou ao pipetar espécime para outros testes Semen normal é levemente viscoso e derrama-se gota a gota Amostras não liquefeitas totalmente serão altamente viscosas MÉTODO Durante o despejamento do tubo cônico líquidos normais ao serem gotejados terão até 2 cm de fio O Aumento da viscosidade impede o teste de motilidade, concentração espermática, detecção de anticorpos antiespermatozoides e medição de marcadores bioquímicos O liquefação incompleta impede o teste de motilidade, concentração espermática, detecção de anticorpos antiespermatozoides e medição de marcadores bioquímicos Para avaliação da prostata... Para avaliação da vesícula seminal... Frutose (VR ≥ 13 µmol/ejaculação) Ácido cítrico: equilíbrio osmótico do esperma Fosfatase ácida: ↑50x do que no soro Prova da Vitabilidade Espermática (Motilidade) Prova de Viabilidade Espermática Contagem de Espermatozoides e Células Redondas Morfologia Deve ser avaliada no prazo de até 60 minutos (se reduz ao longo tempo) Pode ser categorizada... MOTILIDADE PROGRESSIVA (MP) Espermatozoide se move ativamente, de modo linear ou em grandes círculos MOTILIDADE NÃO PROGRESSIVA (MNP) Outros padrões de motilidade na ausência de progressão (pequenos círculos, batidas do flagelo...) IMÓVEL Sem movimento Influenciada por anticorpos, temperatura e outros fatores Avaliação feita em prova de lâmina-lâminula em aumento de 200x ou 400x Valor de referência (OMS): MP + MNP > 40% Estabelece causa para infertilidade masculina e é importante para amostras que mostram < 40% de motilidade progressiva A proporção de espermatozoides imóveis não deve ser superior à proporção de espermatozoides viáveis Geralmente, 75% dos espermatozoides são viáveis MÉTODO Eosina-nigrosina: eosina cora células mortas e nigrosina é o corante de fundo Valor de Referência (OMS): valor mínimo igual a 58% Mais de uma espécime deve ser avaliada para estudos de infertilidade (devido a vários fatores afetarem concentração de esperma) Emprega-se a Câmara de Contagem de Neubauer A contagem é... Por meio da validaçao da cabeça do espermatozoide Padronizada a partir da esquerda superior A diluição (1:40) em solução com formal é essencial para imobilização do esperma antes da contagem Células redondas podem ser indentificadas na extensão corada no aumento de 1000x VALOR DE REFERÊNCIA (OMS) Espermatozoides > 15 milhões/mL Células Redondas até 1000/mm³ Normal... CABEÇA Ovalada, com região acrossômica envolvendo 40-70% e sem presença de vacúolos PEÇA INTERMEDIARIA Delgada, regular, mesmo comprimento que cabeça, ângulo de inserção alinhado à cabeça PEÇA PRINCIPAL (CAUDA) Dez vezes o comprimento da cabeça OMS recomenda... Esfregaço de esperma em lâmina e corar amostra pelo método de Shorrcom Leishman, Papanicolau ou Shorr modificado Valor de Referência (OMS): mínimo 4% de células normais MUNDT, L.A; SHANAKAN, K. Exame de Urina e de Fluidos Corporais de Graff. Grupo A, 2015 OMS. Departamento de Reprodução Humana e Pesquisa. Manual de Laboratório da OMS para o exame e processamento do sêmen humano. 5ª ed. 2010, 296 p. STRASINGER, S. K. Urinalysis and Body Fluid. 6ª ed. 2014
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