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HEMATOLOGIA | Eduarda Oliveira | FARMÁCIA 7º PERÍODO F 1 0 Hemograma Automatizado Equipamento de tres partes: conta três tipos de células, é necessário contar todas as lâminas Equipamento de 5 partes: Conta neutrófilos, linfócitos, monócitos, eosinófilos e basófilos. 6 partes: conta também metamielócitos, mielócito e promielócitos Análise da Amostra 1º Fase - Aspiração e Divisão da Amostra 2º Fase - Processamento de Amostra Acontece a diluição e tratamento da amostra para facilitar a contagem e mensuração dos parâmetros (as células são coradas ou lisadas para que determinado tipo celular seja identificado, quantificado) - Alguns equipamentos de pequeno porte separam a amostra em duas partes. Uma parte para diluição, para quantificar plaquetas e hemácias e outra parte para análise de leucócitos, onde as hemácias são lisadas. - A lise das hemácias liberam hemoglobina, permitindo a quantificação de hemoglobina 3º Fase - Determinação analítica da célula ou parâmetro de interesse Corresponde à contagem e/ou mensuração do tamanho e/ou do conteúdo interno da célula, entre outros. Fase de avaliação da célula por: - Impedância: As células sanguíneas são más condutoras de energia. Essas células quando estão em uma suspensão eletrolítica e são obrigadas a passar por uma abertura onde há uma corrente elétrica, ocorre a impedância - um impedimento da corrente elétrica - ao passar pela corrente, interrompendo a corrente elétrica e gerando um pulso. Esse pulso gerado corresponde a uma célula, e o tamanho do pulso representa o tamanho da célula. TOXICOLOGIA | Eduarda Oliveira | FARMÁCIA 6º PERÍODO F 2 0 Cada célula do sangue periférico tem um tamanho diferente, plaquetas, leucócitos e hemácias, cada uma vai gerar um pulso de tamanho diferente. É uma metodologia que vai quantificar as células pela diferença de tamanho do pulso. Pode ocorrer, em casos que há muitas macroplaquetas, a contagem de plaquetas pode estar falsamente diminuída, por que o equipamento que conta por impedância pode acabar não reconhecendo aquelas células como plaquetas pelo tamanho aumentado. - Absorbância; - Radiofrequência: - Citometrias de fluxo Além do tamanho da célula, também se percebe outras características. Mede as propriedades de células em suspensão, orientadas num fluxo laminar, interceptadas uma a uma por um feixe de laser e mensuradas por sensores (detectores). A luz é coletada por um sistema óptico que permite identificar as células pelo seu tamanho e granularidade interna; classificando-as em hemácias, plaquetas, linfócitos, monócitos e granulócitos Dependendo de como a luz é dispersada quando em contato com a célula, os detectores do equipamento são capazes de identificar e traduzir as informações. FSC: Dispersão frontal: tamanho da célula SSC: Dispersão lateral: complexidade interna das células SFL: fluorescente com dispersão lateral: informações de DNS/RNA celular Pode fazer isso de forma isolada ou simultânea, dependendo do equipamento. As características de cada célula analisadas são computadas e armazenadas no software do equipamento. 4º Processamento de sinais e emissão As informações computadas pelo software do aparelho são transformadas em resultados padronizados: Histograma Após o equipamento separar as classes celulares e no caso de hemácias e plaquetas vai liberar um gráfico de distribuição volumétrica, o histograma. TOXICOLOGIA | Eduarda Oliveira | FARMÁCIA 6º PERÍODO F 3 0 A avaliação do gráfico permite a identificação de macrocitose, microcitose ou uma dupla população eritrocitária na amostra. A base do gráfico traz informações sobre o tamanho da célula. O gráfico é demarcado por dois descritores verdes, onde é feita a avaliação, tudo o que estiver dentro da área marcada ele vai considerar. Se o gráfico está mais para a esquerda, significa que as hemácias são pequenas (microcitose). Se estiver mais à direita, são maiores (macrocitose). Centralizado, são normais. Se a base do gráfico for mais aberta, maior é a variação do tamanho das hemácias, pode identificar se tem ou não anisocitose, se é uma população homogênea ou heterogênea. O pico do gráfico corresponde ao VCM. A presença de dois picos indica uma dupla população eritrocitária. No gráfico a variação de tamanho é tão grande que o RDW não foi liberado. Uma dupla população pode ocorrer em caso de transfusão de sangue, o equipamento detecta tanto as células do paciente como as do sangue recebido na transfusão. Sendo dupla população eritrocitária deve-se colocar observação que o RDW não foi liberado pela automação devido a presença de dupla população eritrocitária, por exemplo, com hemácias normocíticas e microcíticas. E o VCM nesse caso é sem valor estatístico, como são duas populações deveria ter um VCM para cada população, como o equipamento não libera, é um VCM sem valor estatístico. Em outro caso de dupla população é em pacientes com anemia ferropriva já instalada, com VCM diminuído expressivo, já fazendo tratamento. Antes, com a falta de ferro, a medula óssea não produzia as hemácias de forma correta, e com o início do tratamento já é capaz de produzir hemácias normais. A dupla TOXICOLOGIA | Eduarda Oliveira | FARMÁCIA 6º PERÍODO F 4 0 população se dá às hemácias velhas e novas com a suplementação de ferro. Leucócitos Equipamento de 3 partes Histograma Para a contagem de leucócitos as hemácias são lisadas e as células são tratadas com um líquido para que o citoplasma fique retraído ao redor do núcleo. Pico - Vale - Pico Avaliação de leucócitos por impedância SCARTEGRAMA - Gráficos em dispersão de leucócitos Rosa - Linfócitos Verde - Monócitos Azul - Neutrófilos Vermelho - eosinófilos Azul escuro - debrir - resto celular - A cor pode variar de equipamento O eixo Y traz informações sobre a fluorescência da célula (material genético). Quanto mais pra cima estiver, mais fluorescente essa célula é. O eixo X traz informação sobre a complexidade da célula. Quanto mais granulada a célula for, mais para a direita ela vai estar. Eosinófilos são células muito granulares, então vão estar mais à direita. Leucócitos são células agranulares, pouco complexas, então vão estar mais à esquerda. Mais fluorescente - Mais acima Menos fluorescente - Mais abaixo Menos complexo - Mais a esquerda Mais granular - Mais a direita TOXICOLOGIA | Eduarda Oliveira | FARMÁCIA 6º PERÍODO F 5 0 ALTERAÇÕES NAS POSIÇÕES TOXICOLOGIA | Eduarda Oliveira | FARMÁCIA 6º PERÍODO F 6 0
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