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Sorologia MsC. Dahara Carvalho 1 Sangue 2 Sangue O sangue é um tecido líquido que circula pelo corpo de todos os seres humanos e vertebrados; É responsável pela distribuição de nutrientes por todo o corpo, bem como pela defesa contra infecções e trocas gasosas 3 Soro x Plasma 4 Soro e Plasma Plasma: contém fribrinogênio, glóbulos brancos, glóbulos vermelhos e plaquetas; Soro: o soro sanguíneo é o resultado da coagulação do sangue e da remoção do coágulo. É o mesmo que o plasma sanguíneo, embora não possua proteínas de coagulação (fibrinogênio) Existe uma substância chamada fibrinogênio, responsável pela coagulação do sangue. Quando o sangue se separa e o plasma é removido, ele ainda retém o fibrinogênio. Quando os fatores de coagulação são consumidos, a parte resultante do sangue é o soro sanguíneo, que não contém a extração desse fibrinogênio. 5 E o que é sorologia? 6 Antes vamos rever alguns conceitos 7 Anticorpo Anticorpos são proteínas circulantes produzidas em vertebrados em resposta à exposição a estruturas estranhas conhecidas como antígenos, e são os mediadores da imunidade humoral contra todas as classes de microrganismos 8 Anticorpos Os anticorpos são extremamente diversos e específicos em sua capacidade de reconhecer estruturas moleculares estranhas; Uma vez que essas proteínas foram descobertas como moléculas séricas que conferiam proteção contra a toxina diftérica, foram inicialmente chamadas antitoxinas; As substâncias que estimulavam a produção de anticorpos ou eram reconhecidas por eles foram então denominadas antígenos. Anticorpos 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 Anticorpos Os anticorpos são sintetizados somente pelas células da linhagem de linfócitos B e existem em duas formas: 1- anticorpos ligados à membrana na superfície dos linfócitos B que atuam como receptores antigênicos; 2- anticorpos secretados que atuam na proteção contra microrganismos 1 5 Imunidade humoral Plasma, nas secreções mucosas e no fluido intersticial dos tecidos Função: neutralizar toxinas microbianas, previnir a entrada e disseminação dos patógenos e desencadeiam vários mecanismos efetores que eliminam os microrganismos 1 6 Sorologia Soro: sangue ou plasma removido de um indivíduo forma um coágulo, os anticorpos permanecem no fluido residual, o que é denominado soro; O soro não possui os fatores da coagulação (os quais são consumidos durante a formação do coágulo), mas contém todas as outras proteínas encontradas no plasma; Sorologia: O estudo dos anticorpos e suas reações com antígenos. Posso fazer sorologia com soro ou plasma? 1 7 Titulação A concentração de moléculas de anticorpo no soro, específicas para um antígeno em particular, é frequentemente estimada pela determinação de quantas diluições seriadas do soro podem ser feitas antes que a ligação não seja mais detectada. Quando determinada por esse método, a concentração do anticorpo é chamada título (após titulação) Obs: Quanto mais diluições são necessárias, maior será o título de moléculas de anticorpo específicas para um antígeno em particular 1 8 1 9 2 0 Tipos de soro 2 1 2 2 2 3 Imunidade Humoral • A imunidade humoral é mediada por anticorpos secretados que são produzidos por células da linhagem dos linfócitos B; • A ativação de células B resulta em sua proliferação e diferenciação em plasmócitos secretores de anticorpo e células de memória; • As respostas imunes humorais são iniciadas pelo reconhecimento específico do antígeno pela célula B, em órgãos linfoides secundário; • O antígeno se liga à imunoglobulina M (IgM) IgD de membrana em células B naive maduras 2 4 2 5 Anticorpos 2 6 Características gerais Proteínas plasmáticas ou séricas podem ser fisicamente separadas em albuminas e globulinas, com base nas características de solubilidade; Nas separações eletroforéticas de soro ou plasma, a maioria dos anticorpos é encontrada no terceiro grupo mais rápido de migração das globulinas denominado gamaglobulinas (imunoglobulinas); Todas as moléculas de anticorpo compartilham as mesmas características estruturais básicas, mas apresentam extraordinária variabilidade nas regiões que se ligam ao antígeno; 2 7 Características gerais Uma molécula de anticorpo tem uma estrutura central simétrica composta de duas cadeias leves idênticas e duas cadeias pesadas idênticas; A porção de ligação ao antígeno de uma molécula de anticorpo é a região Fab, e a extremidade Cterminal que está envolvida nas funções efetoras é a região Fc; 2 8 Anticorpos monoclonais Um anticorpo monoclonal é uma coleção pura de moléculas de anticorpo idênticas e com a mesma especificidade; Um tumor de plasmócitos (mieloma ou plasmacitoma), assim como a maioria dos tumores de qualquer origem celular, é monoclonal e, dessa maneira, produz anticorpos de uma única especificidade 2 9 3 0 Identificação tumoral. Anticorpos monoclonais marcados e específicos para várias proteínas celulares são usados para determinar a fonte tecidual dos tumores por meio da coloração de seções histológicas de tumores. 3 1 Ligação dos anticorpos aos antígenos Todas as funções dos anticorpos são dependentes de sua capacidade de se ligar especificamente aos antígenos 3 2 Características dos antígenos biológicos Um antígeno é qualquer substância que pode ser especificamente ligada por uma molécula de anticorpo ou receptor de célula T; Nem todos os antígenos reconhecidos por linfócitos específicos ou por anticorpos secretados são capazes de ativar os linfócitos Metabólitos intermediários simples, açúcares, lipídeos, autacoides e hormônios, bem como macromoléculas tais como carboidratos complexos, fosfolipídeos, ácidos nucleicos e proteínas. Isso contrasta com as células T, as quais reconhecem principalmente peptídeos Ativação da célula B necessita que múltiplos receptores antigênicos sejam unidos (ligação cruzada) = imunógeno Determinante ou epítopo polivalência ou multivalência 3 3 Ligação antigênica ❖ O reconhecimento dos antígenos pelos anticorpos envolve ligação não covalente e reversível; ❖ A força de ligação entre um único sítio de combinação entre um anticorpo e um epítopo de um antígeno é chamada AFINIDADE do anticorpo; ❖ A afinidade é normalmente representada por uma constante de dissociação (Kd), a qual indica quão fácil é a separação (dissociação) de um complexo antígeno-anticorpo em seus constituintes; ❖ Uma Kd menor indica uma interação de afinidade mais forte ou maior porque uma menor concentração do antígeno e do anticorpo é necessária para a formação do complexo; ❖ Força da ligação do anticorpo ao antígeno deve levar em conta a ligação de todos os sítios para todos os epítopos disponíveis = essa força geral de ligação é chamada AVIDEZ e é muito maior do que a afinidade a qualquer sítio individual de ligação antigênica; 3 4 3 5 Ligação antigênica Antígeno polivalente com um anticorpo específico em um tubo de ensaio, os dois interagem formando imunocomplexos; Se uma zona de equivalência é alcançada in vivo, grandes imunocomplexos podem se formar na circulação; Os imunocomplexos que são aprisionados ou formados nas paredes dos vasos sanguíneos podem iniciar uma reação inflamatória, resultando em doenças de imunocomplexos 3 6 Características Relacionadas ao Reconhecimento do Antígeno Os anticorpos podem ser notavelmente específicos para os antígenos, distinguindo entre pequenas diferenças em sua estrutura química; Esse alto grau de especificidade é necessário para que anticorpos gerados em resposta aos antígenos de um microrganismo normalmente não reajam com as moléculas próprias estruturalmente semelhantes ou com os antígenos de outros microrganismos; Especificidade REAÇÃO CRUZADA 3 7 Vacinas e resposta imune 3 8 Obrigada! 3 9 Slide 1: Sorologia Slide 2: Sangue Slide 3: Sangue Slide 4: Soro x Plasma Slide5: Soro e Plasma Slide 6: E o que é sorologia? Slide 7: Antes vamos rever alguns conceitos Slide 8: Anticorpo Slide 9: Anticorpos Slide 10 Slide 11 Slide 12 Slide 13 Slide 14 Slide 15: Anticorpos Slide 16: Imunidade humoral Slide 17: Sorologia Slide 18: Titulação Slide 19 Slide 20 Slide 21: Tipos de soro Slide 22 Slide 23 Slide 24: Imunidade Humoral Slide 25 Slide 26: Anticorpos Slide 27: Características gerais Slide 28: Características gerais Slide 29: Anticorpos monoclonais Slide 30 Slide 31 Slide 32: Ligação dos anticorpos aos antígenos Slide 33: Características dos antígenos biológicos Slide 34: Ligação antigênica Slide 35 Slide 36: Ligação antigênica Slide 37: Características Relacionadas ao Reconhecimento do Antígeno Slide 38: Vacinas e resposta imune Slide 39: Obrigada!
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