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TSI ➢Determinar se o micro-organismo é capaz de fermentar os açucares glicose, lactose e sacarose, se forma gás carbônico a partir de glicose e se produz sulfeto de hidrogênio (H2S). O meio TSI é inclinado em bico de flauta, de cor vermelho-cereja e deve ser inoculado por picada central até o fundo, seguido de espalhamento na superfície. Incubar 18 - 24 horas/ 35oC. Interpretação: a) Púrpura / amarelo (ápice púrpuro ESCURO e base amarelada) = fermentação apenas da glicose (lactose e sacarose negativas) b) Púrpura / amarelo (ápice púrpuro CLARO e base amarelada) = fermentação apenas da glicose (lactose ou sacarose negativa). PS: Se a lactose é positiva em meio indicador o teste geralmente se repete em tubo, neste caso ápice púrpuro claro indica apenas sacarose negativa. c) Amarelo/ amarelo (ápice e base amarelos) = fermentação da glicose + lactose + sacarose d) Presença de gás (CO2) = bolhas ou o meio fragmentado e) H2S positivo = presença de precipitado negro CITRATO ➢Determinar se o microrganismo é capaz de utilizar o citrato como única fonte de carbono em seu metabolismo com resultante alcalinidade do meio de cultura. Deve ser o primeiro dos tubos a ser inoculado, ou então o estilete flambado antes de se pegar a colônia para evitar contaminação de substâncias de outros meios de cultura. Incubar 24 horas/ 35oC. Interpretação: Citrato positivo = azul e/ou crescimento no meio Citrato negativo = cor verde (inalterado) SIM (Sulfeto de hidrogênio - Indol - Motilidade) ➢Informa sobre motilidade, indol e sulfeto de hidrogênio. Introduzir o estilete até 2/3 do meio (este meio deve preencher 1/3 da capacidade do tubo) Incubar por 24 horas à 36oC Interpretação: _ Motilidade (+) – Crescimento além do local da inoculação (meio turva) _ Motilidade (-) – Crescimento apenas no local da inoculação _ H2S (+) – precipitado negro (forma-se sulfato de ferro) _ H2S (-) – ausência de precipitado negro Para a leitura do Indol, adicionar 2 gotas de Reativo de Kovacs (q _Indol (+) – reativo muda para a cor rosa no primeiro minuto - Indol (-) – reativo não muda de cor