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TSI 
➢Determinar se o micro-organismo é capaz de fermentar os açucares glicose, lactose e sacarose, se forma gás 
carbônico a partir de glicose e se produz sulfeto de hidrogênio (H2S). 
O meio TSI é inclinado em bico de flauta, de cor vermelho-cereja e deve ser inoculado por picada central até 
o fundo, seguido de espalhamento na superfície. 
Incubar 18 - 24 horas/ 35oC. 
Interpretação: 
a) Púrpura / amarelo (ápice púrpuro ESCURO e base amarelada) = fermentação apenas da glicose (lactose e 
sacarose negativas) 
b) Púrpura / amarelo (ápice púrpuro CLARO e base amarelada) = fermentação apenas da glicose (lactose ou 
sacarose negativa). PS: Se a lactose é positiva em meio indicador o teste geralmente se repete em tubo, neste 
caso ápice púrpuro claro indica apenas sacarose negativa. 
c) Amarelo/ amarelo (ápice e base amarelos) = fermentação da glicose + lactose + sacarose 
d) Presença de gás (CO2) = bolhas ou o meio fragmentado 
e) H2S positivo = presença de precipitado negro 
 
 
 
 
 
CITRATO 
➢Determinar se o microrganismo é capaz de utilizar o citrato como única fonte de carbono em seu metabolismo 
com resultante alcalinidade do meio de cultura. 
Deve ser o primeiro dos tubos a ser inoculado, ou então o estilete flambado antes de se pegar a colônia para 
evitar contaminação de substâncias de outros meios de cultura. 
Incubar 24 horas/ 35oC. 
Interpretação: Citrato positivo = azul e/ou crescimento no meio 
Citrato negativo = cor verde (inalterado) 
 
 
 
 
 
SIM 
(Sulfeto de hidrogênio - Indol - Motilidade) 
➢Informa sobre motilidade, indol e sulfeto de hidrogênio. 
Introduzir o estilete até 2/3 do meio (este meio deve preencher 1/3 da capacidade do tubo) 
Incubar por 24 horas à 36oC 
Interpretação: 
_ Motilidade (+) – Crescimento além do local da inoculação (meio turva) 
_ Motilidade (-) – Crescimento apenas no local da inoculação 
_ H2S (+) – precipitado negro (forma-se sulfato de ferro) 
_ H2S (-) – ausência de precipitado negro 
Para a leitura do Indol, adicionar 2 gotas de Reativo de Kovacs (q 
_Indol (+) – reativo muda para a cor rosa no primeiro minuto 
- Indol (-) – reativo não muda de cor

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