Avaliação I - Individual Ale

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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:823741)
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Prova 65698436
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
A transcrição reversa é uma reação que ocorre pela ação da enzima transcriptase reversa ou RT. Essa 
enzima é uma DNA polimerase dependente de RNA, ou seja, ela é capaz de sintetizar uma fita de 
DNA utilizando como molde a fita simples de RNA. Sua descoberta se deu a partir da observação de 
que, quando os retrovírus, cujo material genético é um RNA, infectam um hospedeiro, o RNA viral é 
convertido em DNA. Sobre a RT-PCR, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para o processo de transcrição reversa são necessários Oligonucleotídeos sintéticos, os quatro 
dNTPs, a amostra de RNA e os cofatores enzimáticos. Ao invés da Taq DNA polimerase, essa técnica 
utiliza a enzima transcriptase reversa.
PORQUE
II- O objetivo final da técnica é originar o DNA complementar ou cDNA, que é formado por essa 
enzima.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B A asserção I é uma proposição verdadeira, mas a II é uma proposição falsa.
C As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
D As asserções I e II são proposições falsas.
Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da técnica. Em 
torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se obter milhares de cópias de 
DNA. Sobre os ciclos do PCR associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
( ) Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar.
( ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de cada uma das 
fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º C.
( ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, denominada 
como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - II - III.
B I - III - II.
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C II - I - III.
D III - II - I.
Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o gene de um 
organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis mutações, cadeias de 
transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. De acordo com as técnicas 
empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as 
falsas:
( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o método de 
Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com eletroforese. 
( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo 
adicionado à nova fita. 
( ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de 
sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de sequenciamento de DNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - F - F.
B F - F - V.
C V - F - V.
D V - V - F.
A técnica de eletroforese consiste na separação de moléculas de DNA, RNA ou proteínas em gel 
de agarose ou poliacrilamida. Essa separação se dá de acordo com o tamanho da molécula. Com base 
no processo de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:
I- Uma corrente elétrica é transmitida através do gel do polo negativo ao polo positivo. 
II- As moléculas de DNA são carregadas negativamente e são carregas por afinidade para o polo 
positivo. 
III- Moléculas menores tendem a migrar com maior dificuldade no gel. Já as moléculas maiores, 
tendem a migrar mais facilmente.
 
Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças I e III estão corretas.
B As sentenças I e II estão corretas.
C Somente a sentença III está correta.
D Somente a sentença II está correta.
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[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as 
amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e 
armazenadas em tubos, ambos “livres” de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse 
– nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou - 80 ºC). Todos os procedimentos 
devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de 
nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA 
identificado na prática, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Etapa de Lise.
II- Etapa de Ligação.
III- Etapa de Lavagem.
IV- Etapa de Eluição.
( ) Pipete 25 µl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 µl da amostra de 
sangue no mesmo tubo e, por último, pipete 200 µl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e 
homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min.
( ) Pipete 210 µl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, 
pipete 640 µl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto. 
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 µl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue 
novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem utilizará 600 µl do 
tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo 
de coleta e centrifugue novamente.
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 µl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e 
centrifugue a amostra.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - III - IV - I.
B IV - III - II - I.
C I - II - IV - III.
D I - II - III - IV.
A descoberta da estrutura do DNA, por James Watson, Francis Crick, Maurice Wilkins e 
Rosalind Franklin, em 1950, possibilitou o entendimento a respeito da replicação e transmissão da 
informação genética de uma célula à outra. Sobre o DNA, assinale a alternativa CORRETA:
A O DNA é formado por duas fitas que não se complementam entre si.
B O DNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela pentose, denominada desoxirribose, os
nucleotídeos, adenina, timina, citocina e guanina, e fosfato.
C O DNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, timina, citosina e
guanina.
D O DNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina.
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[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o sumário da aula prática, a hibridização é uma técnica 
que tem o princípio da complementariedade das bases nitrogenadas dos ácidos nucleicos como base 
(adenina com timina e citosina com guanina). Essa técnica consiste, de forma básica, em localizar 
sequências de interesse no genoma de quaisquer organismos, hibridizando-as ao próprio DNA da 
espécie.
Considerando a aula prática de hibridização, assinale a alternativa CORRETA:
A Ao final da reação é possível visualizar as células marcadas com pontos verdes e vermelho.
B A técnica de CGH array é avaliada diretamente no microscópio, sem o uso de scanner.
C O reagente DAPI é adicionado logo no início da reação, junto à sonda na técnica de FISH, sem
necessidade de incubação.
D A técnica de FISH utiliza a marcação de vários genes.
Para detecção do DNA em bibliotecas de DNA, uma membrana é colocada em contato com as 
colônias na placa logo após o crescimento das colônias bacterianas em placas de cultivo contendo 
meio sólido. Algumas células irão se aderir à membrana, formando uma impressão das colôniaspresentes na placa. Em seguida, as células aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar o DNA, que 
permanece aderido à membrana. Por fim, a membrana é incubada com sondas de hibridização 
marcadas, complementares à porção do gene de interesse, permitindo a visualização da posição dos 
clones que contêm o fragmento de interesse. Sobre a técnica exposta, assinale a alternativa 
CORRETA:
A Hibridização in situ.
B Northen-blot.
C Southern-blot.
D Hibridização em colônia.
A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as 
sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificar a 
molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA:
A
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em fragmentos
de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada novo nucleotídeo
adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção ocorre em tempo real.
B
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas sólidas, nas
quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, formando uma
biblioteca de DNA.
C
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o DNA a ser
sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a uma placa de vidro
por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, que será submetida ao PCR.
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D
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA de forma
portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos,
semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada.
"A PCR pode ser precedida por uma reação de transcrição reversa (RT) para a obtenção de cDNA a 
partir de RNA (RT-PCR), representando, por exemplo, uma possibilidade de análise de expressão 
gênica em células ou tecidos" (SANTOS, 2004, s.p.). Sobre os componentes essenciais para a 
realização da técnica de PCR e RT-PCR, analise as sentenças a seguir:
I- Para o processo de PCR convencional, utiliza-se a fita molde de DNA, os nucleotídeos ou dNTPs, 
os primers e a Taq DNA polimerase.
II- Para o processo de RT-PCR, é utilizada uma enzima denominada como termoestável, como a Taq 
DNA polimerase.
III- Para o processo de RT-PCR, utiliza-se a fita molde de mRNA, os nucleotídeos ou dNTPs, primers 
oligodT e enzima transcriptase reversa.
Assinale a alternativa CORRETA:
Fonte: SANTOS, Carlos Ferreira dos et al. Transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase: 
princípios e aplicações em odontologia. J. Appl. Oral Sci., v. 12, n. 1, p.1-11, 2004.
A As sentenças I e II estão corretas.
B As sentenças I e III estão corretas.
C As sentenças II e III estão corretas.
D Somente a sentença I está correta.
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