Avaliação I - Individual biologia

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[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso 
dessa prática depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências 
complementares após a desnaturação (período em que a fita de DNA é simples). 
Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o momento em que ocorre a 
ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia de um 
organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade 
de pares de base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de 
fusão do genoma. Isso ocorre porque o par G-C é mais estável, apresentando três 
pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta apenas com duas. Após o 
anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de 
hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão, 
outros fatores podem interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses 
fatores, analise as opções a seguir: 
I- Temperatura de fusão. 
II- pH alto para produzir condições de hibridização. 
III- Concentração de cátions monovalentes. 
IV- Presença de solventes orgânicos. 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As opções I, II, III e IV estão corretas. 
B 
Somente a opção III está correta. 
C 
Somente a opção I está correta. 
D 
Somente a opção II está correta. 
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[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o sumário da aula prática, a 
hibridização é uma técnica que tem o princípio da complementariedade das bases 
nitrogenadas dos ácidos nucleicos como base (adenina com timina e citosina com 
guanina). Essa técnica consiste, de forma básica, em localizar sequências de 
interesse no genoma de quaisquer organismos, hibridizando-as ao próprio DNA da 
espécie. 
Considerando a aula prática de hibridização, assinale a alternativa CORRETA: 
A 
A técnica de FISH utiliza a marcação de vários genes. 
B 
A técnica de CGH array é avaliada diretamente no microscópio, sem o uso de 
scanner. 
C 
Ao final da reação é possível visualizar as células marcadas com pontos verdes e 
vermelho. 
D 
O reagente DAPI é adicionado logo no início da reação, junto à sonda na técnica de 
FISH, sem necessidade de incubação. 
3Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com 
enzimas de restrição e clonagem em vetor. Com base nas etapas para construção 
de uma biblioteca de DNA, ordene os itens a seguir: I- Fragmentos de DNA são 
inseridos em vetores idênticos e ligados através da DNA ligase. II- Clivado do DNA 
com uma enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de 
DNA. III- Inserção do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos 
diferentes fragmentos. IV- Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou 
até mesmo de um organismo. Assinale a alternativa que apresenta a sequência 
CORRETA: 
A 
I - IV - III - II. 
B 
I - III - II - IV. 
C 
IV - II - III - I. 
D 
IV - II - I - III. 
4Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da 
técnica. Em torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se 
obter milhares de cópias de DNA. Sobre os ciclos do PCR associe os itens, 
utilizando o código a seguir: I- Desnaturação. II- Anelamento. III- Extensão. ( ) 
Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar. 
( ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos 
de cada uma das fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em 
cerca de 95º C. ( ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA 
polimerase específica, denominada como Taq DNA polimerase, em uma 
temperatura de 72º C. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 
A 
I - II - III. 
B 
III - II - I. 
C 
I - III - II. 
D 
II - I - III. 
5A descoberta da estrutura do DNA, por James Watson, Francis Crick, Maurice 
Wilkins e Rosalind Franklin, em 1950, possibilitou o entendimento a respeito da 
replicação e transmissão da informação genética de uma célula à outra. Sobre o 
DNA, assinale a alternativa CORRETA: 
A 
O DNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela pentose, denominada 
desoxirribose, os nucleotídeos, adenina, timina, citocina e guanina, e fosfato. 
B 
O DNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, 
timina, citosina e guanina. 
C 
O DNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e 
citosina. 
D 
O DNA é formado por duas fitas que não se complementam entre si. 
6Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar 
o gene de um organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica 
possíveis mutações, cadeias de transmissão e origem da chegada do vírus a uma 
região específica. De acordo com as técnicas empregadas para o sequenciamento 
de DNA, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) Os 
didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o 
método de Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência 
com eletroforese. ( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de 
pirofosfato a cada novo nucleotídeo adicionado à nova fita. ( ) O método 
empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de 
sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de 
sequenciamento de DNA. Assinale a alternativa que apresenta a sequência 
CORRETA: 
A 
F - F - V. 
B 
V - V - F. 
C 
V - F - V. 
D 
V - F - F. 
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"A PCR pode ser precedida por uma reação de transcrição reversa (RT) para a 
obtenção de cDNA a partir de RNA (RT-PCR), representando, por exemplo, uma 
possibilidade de análise de expressão gênica em células ou tecidos" (SANTOS, 
2004, s.p.). Sobre os componentes essenciais para a realização da técnica de PCR e 
RT-PCR, analise as sentenças a seguir: 
I- Para o processo de PCR convencional, utiliza-se a fita molde de DNA, os 
nucleotídeos ou dNTPs, os primers e a Taq DNA polimerase. 
II- Para o processo de RT-PCR, é utilizada uma enzima denominada como 
termoestável, como a Taq DNA polimerase. 
III- Para o processo de RT-PCR, utiliza-se a fita molde de mRNA, os nucleotídeos ou 
dNTPs, primers oligodT e enzima transcriptase reversa. 
Assinale a alternativa CORRETA: 
Fonte: SANTOS, Carlos Ferreira dos et al. Transcrição reversa e reação em cadeia 
da polimerase: princípios e aplicações em odontologia. J. Appl. Oral Sci., v. 12, n. 1, 
p.1-11, 2004. 
A 
As sentenças I e III estão corretas. 
B 
Somente a sentença I está correta. 
C 
As sentenças II e III estão corretas. 
D 
As sentenças I e II estão corretas. 
8O uso de bibliotecas de DNA ou cDNA permitem a manutenção e replicação do 
material genético em grandes coleções mantidas em colônias de bactérias, nas 
quais um fragmento específico de DNA ou um gene podem ser procurados. Sobre 
as bibliotecas de DNA e cDNA, avalie as asserções a seguir e a relação proposta 
entre elas: I- A bactéria E. coli é a principal célula hospedeira utilizada no processo 
de clonagem em vetores, inclusive na construção de bibliotecas de DNA e cDNA, em 
que cada bactéria irá internalizar apenas um vetor. PORQUE II- Assim que o vetor é 
inserido, em condições adequadas de diluição e meio de cultivo, em poucas horas 
corre a formação de diversos clones dos fragmentos inseridos, sendo cada um 
encontrado em uma colônia diferente de crescimento bacteriano. Assinale a 
alternativa CORRETA: 
A 
As asserções I e II são proposições falsas. 
B 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I. 
C 
A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. 
D 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da 
I. 
9O gráfico a seguir ilustra uma curva de amplificação da PCR em tempo real. De 
acordo com a interpretação do gráfico, classifique V para as sentenças verdadeiras 
e F para as falsas: ( ) A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma 
vez que possui menorCt. ( ) A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois 
quanto maior o Ct, maior a quantidade de material disponível para iniciar a 
amplificação do gene de interesse. ( ) A amostra B ultrapassou o Threshold após o 
ciclo 20, apresentando uma quantidade intermediária de amostra, quando 
comparadas às amostras A e C. Assinale a alternativa que apresenta a sequência 
CORRETA: 
A 
V - F - V. 
B 
V - V - F. 
C 
F - F - V. 
D 
V - F - F. 
10Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se 
aplica dependendo da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas 
recentes, que são mais robustas e sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, 
ainda assim, demonstram um excelente resultado, apesar de serem mais 
complicadas e menos automatizadas. Sobre essas técnicas, associe os itens, 
utilizando o código a seguir: I- Sequenciamento de Sanger. II- Next Generation 
Sequencing. III- Sequenciamento de terceira geração. ( ) Método de primeira 
geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de cadeia (ddNTP). ( 
) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única 
molécula de DNA, sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo 
real. ( ) São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores 
de cadeia para o processamento das amostras. Assinale a alternativa que apresenta 
a sequência CORRETA: 
A 
I - III - II. 
B 
III - II - I. 
C 
I - II - III. 
D 
II - I - III.