22-05- Testes de Identificacao e Pureza pdf

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Testes	de	
Identificação	
e	Pureza
Controle	de	
qualidade	Físico-
Químico	de	
Medicamentos
Profa.:	Drª	Ana	
Carolina	Costa
Testes	de	
Identificação
Testes	de	
Identificação
Qual	a	
diferença	
entre	análises	
qualitativas		e	
quantitativas?
• Simplificando,	 a	 principal	 diferença	 entre	 pesquisa	
quantitativa	 e	 qualitativa	 é	 a	 seguinte:	 dados	
quantitativos	 apresentam	 os	 números	 que	 comprovam	
os	 objetivos	 gerais	 da	 pesquisa,	 enquanto	 dados	
qualitativos	permitem	compreender	a	complexidade	e	os	
detalhes	das	informações	obtidas
O que é isso? Quanto tem 
disso?
Métodos	de	Identificação
• Métodos	analíticos	de	natureza	qualitativa;
• Confirmação	da	identidade	da	matéria-	prima;
• A	validade	desses	métodos	depende	basicamente	de	sua	especificidade;
• Podem	ser	classificados	em	métodos	químicos	ou	físicos	e	ainda	em	clássicos	ou	
instrumentais
REAÇÃO	COLORIMÉTRICA
Espectroscopia	de	absorção	no	IV	
Descreva	suas	
característica
s	físicas?		
TESTES	DE	IDENTIFICAÇÃO
Características físicas. Cristais, brancos ou incolores, massas 
cristalinas ou grânulos. Volatiliza-se lentamente à temperatura 
ambiente. 
Solubilidade. Pouco solúvel em água; muito solúvel em álcool etílico; 
facilmente solúvel em óleos fixos e voláteis.
Faixa de fusão: 174 ºC a 179 ºC. 
Rotação óptica específica: +41 a +43 para a cânfora natural. Cânfora 
sintética é a forma racêmica, opticamente inativa. Determinar em 
solução a 10% (p/v) em álcool etílico.
Testes químico: À cânfora pulverizada (obtida por tratamento com pequena 
quantidade de álcool etílico),juntar uma gota de vanilina 1,0% (p/v) e uma 
gota de ácido sulfúrico; aparecerá uma cor amarela, que passa 
gradativamente a roxo, violeta e azul. Esta prova é positiva somente para a 
cânfora natural. 
Método instrumental: No espectro de absorção no ultravioleta, na faixa de 
200 nm a 400 nm, da solução amostra a 0,1% (p/v) em álcool etílico, 
hámáximo de absorçãoem (289 ± 1)nm.
https://www.gov.br/anvisa/pt-
br/assuntos/farmacopeia/farmacopeia-
brasileira/arquivos/7987json-file-1
MÉTODOS	DE	IDENTIFICAÇÃO
• Métodos	químico:	
• Baseados	em	reações	químicas	de	grupos	funcionais	importantes	
presente	nos	insumos	farmacêuticos;
• Perceptível	a	olho	nú;	
• Ensaios	eliminatórios	e	não	confirmatórios.				
Reações	de	Identificação	de	
Cátions	e	Ânions
Reações	comuns	de	identificação	de	cátions	e	ânions
Testes	para	identificação	de	THC
TESTE	COLORIMÉTRICO	DE	DUQUENOIS	–	LEVINE
ü 	É	um	teste	colorimétrico	usado	como	método	de	triagem	para	identificação	de	
THC	(maconha)	em	grandes	centros	de	perícias	cientificas.		
ü 	O	reagente	de	DUQUENOIS	–	LEVINE	consiste	em:
2,5	ml	de	
acetaldeído 2g	de	vanilina 100	ml	de	Etanol	a	95%
Testes	para	identificação	de	THC
Separar	uma	alícota	da	
substancia	suspeita.
Colocar	0,5	ml	de	
Duquenois	
Pelas	paredes	do	tubo	
adicionar	0,2	ml	de	ácido	
clorídrico	PA
Testes	para	identificação	de	THC
RESUMINDO
RESUMINDO
Métodos Instrumentais
• Equipamentos	que	avaliam	propriedades	físicas:		refratômetro,	
determinador	do	ponto	de	fusão,	picnômetro,	pHmetro.	Esses	
métodos	não	são	confirmatórios
PONTO	DE	FUSÃO
pHmetro
picnômetro
CONSTANTES FÍSICAS
Métodos Instrumentais
• Os	métodos	instrumentais	são	ensaios	físicos	de	identificação,	os	
quais	podem	ser	baseados	em	espectros,	cromatogramas,	ou	
medidas	diretas	das	propriedades	físico-	química,	dependendo	da	
variada	complexidade	da	instrumentação	utilizada.
• Os	métodos	de	identificação	baseados	em	espectros	são	em	geral	
confirmatórios----	impressão	digital	das	substâncias.	Isso	não	vale	
para	misturas;
Espectros	são	gráficos	obtidos	a	
partir	da	análise	de	substâncias	
por	Espectroscopia,	em	
equipamentos	chamados	
Espectrofotômetro.
Espectroscopia
• Espectroscopia na região do	infravermelho
• Ressonância magnética nuclear
• Espectroscopia de	massas
• Espectroscopia na região do	ultravioleta
Espectroscopia	 é	 um	 conjunto	 de	
técnicas	 analíticas	 que	 estudam	 as	
estruturas	 dos	 átomos	 e	moléculas.	
O	 grande	número	de	 comprimentos	
de	 ondas	 emitidos	 por	 esses	
sistemas	 faz	 com	 que	 seja	 possível	
estudar	sua	estrutra	em	detalhes.
Todas	essas	técnicas	me	dão	um	
gráfico	que	permite	a	identificação	
das	substâncias	analisadas,	
quando	não	estão	em	uma	mistura
• O	espectro	no	infravermelho		(IV)	é	
uma	 técnica	 muito	 poderosa	 que	
usa	 radiação	 eletromagnética	 na	
região	 do	 infravermelho	 para	
determinação	 e	 identificação	 de	
estruturas	 moleculares,	 além	 de	
possuir	várias	aplicações	analíticas.	
Ácido	acético
Espectroscopia na Região do Infravermelho
A	 espectroscopia	 no	 infravermelho,	
fornece	evidencias	da	presença	de	vários	
grupos	 funcionais	 na	 estrutura	 orgânica	
devido	 à	 interação	 das	 moléculas	 ou	
átomos	 com	 a	 radiação	 eletromagnética	
em	um	processo	de	vibração	molecular
Interação	das	moléculas	ou	átomos	
com	a	radiação	eletromagnética	em	
um	processo	de	vibração	molecular
Cada	grupo	absorve	em	freqüência
	característica	de	radiação	na	região
	do	IV.	
Assim,	 um	 gráfico	 de	 intensidade	 de	 radiação	 versus	
freqüência,	o	espectrograma	de	IV,	permite	caracterizar	
os	grupos	 funcionais	de	um	padrão	ou	de	um	material	
desconhecido
Espectroscopia	na	Região	do	Infravermelho
• O espectro no 
infravermelho (IV) é uma 
técnica muito poderosa 
que usa radiação 
eletromagnética na região 
do infravermelho para 
determinação e 
identificação de estruturas 
moleculares, além de 
possuir várias aplicações 
analíticas. 
Espectroscopia na Região do Infravermelho
• Espectro
A	possibilidade	de	dois	 compostos	diferentes	 terem	o	mesmo	
espectro	no	infravermelho	é	improvável,	é	por	este	motivo,	que	
cada	 função	 orgânica	 apresenta	 no	 espectro	 a	 região	 de	
impressão	digital	na	faixa	de	900	–	1300	cm-1
Espectroscopia na Região do Infravermelho
• Vibrações	 moleculares:	 A	 energia	 fornecida	 pela	 radiação	 no	
infravermelho	é	da	ordem	de	2	 a	 15	Kcal	 e	 tende	a	 afetar	 os	níveis	
vibracionais	de	uma	ligação	química.	
Estiramento	simétrico Estiramento	assimétrico Tesoura
Torção Balanço
Rotação
Espectrocopia na Região do Infravermelho
SILVERSTEIN,	 Robert	 M.;	 WEBSTER,	 Francis	 X.	 (Autor).	
Identificação	 espectrométrica	 de	 compostos	 orgânicos.	 7.	 ed.	
Rio	de	Janeiro,	RJ:	LTC,	2007.
A	possibilidade	de	dois	 compostos	diferentes	 terem	o	mesmo	
espectro	no	infravermelho	é	improvável,	é	por	este	motivo,	que	
cada	 função	 orgânica	 apresenta	 no	 espectro	 a	 região	 de	
impressão	digital	na	faixa	de	900	–	1300	cm-1
PERFIL ESPECTROSCÓPICO
28
1mg da amostra
99mg de KBr
IR prestigie 21 - Shimadzu
• Avaliar	as	freqüências	
vibracionais	dos	grupos	
funcionais	característicos;
• Alargamento	de	banda	x	
Freqüência;
• Pode	se	observar	ligações	de	
hidrogênio,	interações	iônicas	e	
processos	similares;
• Maior	massa,	menor	freqüência;
• Mais	forte	ligação,	maior	a	
freqüência;
• Maior	distância	internuclear,	
menor	a		freqüência;
• Materiais	cristalinos	apresentam	
bandas	mais	finas;
• Uso	de	bibliotecas	de	padrões	
para	comparação.
IR-FT	
30
DRX
Outras	técnicas-Difração	de	Raios	X
• Dentre	as	várias	
técnicas	de	
caracterização	de	
materiais,	a	técnica	de	
difração	de	raios	X	é	
indicada	na	
determinação	das	fases	
cristalinas	de	insumos	
farmacêuticos.
ü No	estado	cristalino,	as	unidades	constituintes	do	sólido	encontram-se	ordenadas	numa	rede	rígida,	a	
rede	cristalina.	
ü 	Estado	amorfo	contrariamente	ao	estado	cristalino,	consiste	num	arranjo	desordenado	de	moléculas	
que	não	possui	uma	rede	cristalina	distintiva
Devido	ao	aumento	da	mobilidade	no	sistema	verifica-se	então	um	aumento	da	solubilidade	do	fármaco	
amorfo.
1	e	4	polimorfo		II
Amostra	5	
polimorfo		I
1	e	4	polimorfo		II
Testes	de	pureza
Impurezas	inorgânicas
• São	geralmente	decorrentes	do	
processamento	da	matéria-	prima	
ou	produto,	e	os	ensaios	de	pureza	
são	associados	com	frequência	
(abundância)	e/ou	relevância	docontaminante.
• ÁGUA
• ÍONS	METÁLICOS
• CLORETOS
• SULFATOS	E	OUTROS	ÂNIONS
Ensaios	de	Pureza:CQ	fitoterápicos
granulometria
Métodos	
quantitativos
• Perda	de	substâncias	solúveis	
e	insolúveis	totais
• Teor	de	cinzas
• Teor	de	substâncias	voláteis	e	
não	voláteis
• Teor	de	cinzas	sulfatadas
• Teor	de	cinzas	insolúveis	em	
ácido	cloridríco
Análises	térmicas
TG
• A	termogravimetria	é	a	
técnica	de	análise	térmica	
em	que	a	variação	de	
massa	da	amostra	é	
determinada	como	uma	
função	da	temperatura,	
ou	tempo	de	
aquecimento,	utilizando	
um	programa	controlado	
de	temperatura.	
TGA-60 shimadzu
Figura 10:Aparelho de termogravimétrica
Para	a	pesquisa	POLIMORFOS:	Avaliar	a	forma	polimórfica	que	possui	maior	perda	de	massa
DSC
• A	calorimetria	
exploratória	
diferencial	é	uma	
técnica
que	possibilita	avaliar	
os	fenômenos	
energéticos,		físicos	
e/ou	químicos	
produzidos	durante	o	
aquecimento	(ou	
resfriamento)	de	uma	
substância.	
42
DSC-60 Shimadzu
DSC
Ensaios	quantitativos
• Teor	de	umidade
•Método	gravimétrico
• %	de	umidade=	Pa-	Ps/Pa
• Pa	é	o	peso	da	amostra,	Os	é	o	peso	da	amostra	
seca
•Método	volumétrico	(Karl	Fischer)-	baseia-se	na	
reação	quantitativa	entre	a	água	e	o	reagente	de	
Karl	Fischer
• Destilação	azeotrópica
Testes	de	Pureza
pH . 2,0 a 2,6. Determinar em solução a 2% (p/v) da amostra em água isenta 
de dióxido de carbono;
Metais pesados No máximo 0,002% (20 ppm). 
Perda por dessecação Determinar em 1 g da amostra. Dessecar em estufa 
a 60 ºC, sob pressão reduzida, por 3 horas. No máximo 1,0%. Resíduo por 
incineração(5.2.10). Determinar em 1 g da amostra. No máximo 0,2%
https://www.gov.br/anvisa/pt-br/assuntos/farmacopeia/farmacopeia-brasileira/arquivos/7987json-file-1
Espectroscopia	de	
massas	acoplada	a	
cromatografia	a	gás
• Estudo	de	sistemas	pela	formação	de	íons	em	
fase	gasosa,	com	ou	sem	fragmentação,	que	são	
caracterizados	por	suas	relações	massa/carga	e	
abundâncias	relativas.
REFERÊNCIAS
• Gil,	Orlando,	Matias	e	Serrano.	Controle	físico-químico	de	qualidade	
de	medicamentos.	1a	edição,	Ediora	Uniderp.	2010.
• Conselho	Federal	de	Farmácia.	Manual	de	equivalência	e	correção	/	
Conselho	Federal	de	Farmácia.	–	Brasília:	Conselho	Federal	de	
Farmácia,	2017.