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12/10/2022 14:09 Como fazer diluições seriadas | Biomedicina Padrão
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Como fazer diluições seriadas
Para entender o que é, e como fazer uma diluição seriada, primeiramente temos que saber o que é uma
diluição [simples].
Para fazer uma diluição simples é necessário combinar a amostra líquida de interesse com uma
determinada quantidade de solvente, para chegar na concentração desejada.
O fator de diluição é o número total de unidades de volume em que seu material será dissolvido. A
amostra diluída deve ser muito bem homogeneizada para alcançar a verdadeira diluição.
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POR BRUNNO CÂMARA - QUARTA-FEIRA, ABRIL 06, 2016
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⭐Preparatório de Análises Clínicas para Residência e Concurso
Por exemplo, se quiser fazer uma diluição de 1/5, ou 1:5 (leia-se: 1 para 5), você deve combinar 1 unidade
de volume da amostra (material a ser diluído) mais 4 unidades de volume do solvente (água, NaCl 0,9%,
etc.)
Como fazer e calcular diluições simples – clique aqui
Diluição seriada
Uma diluição seriada é basicamente uma série de diluições simples que ampli�ca o fator de diluição. A
fonte da amostra para diluição de cada etapa vem da diluição anterior.
Todas as diluições na série têm o mesmo fator de diluição, em que a amostra da diluição anterior é usada
para fazer a diluição subsequente.
Por exemplo, se eu tiver uma diluição 1/2, meu fator de diluição é 2. Todas as diluições seguintes serão
multiplicados por 2.
1/2 * 2 = 1/4 * 2 = 1/8 * 2 = 1/16 …
O objetivo desse tipo de diluição é ir diminuindo progressivamente a quantidade de soluto (amostra) em
relação ao diluente.
Fórmulas
Nos cálculos a seguir, são utilizadas essas fórmulas:
Volume transferido = Volume do diluente / (Fator de diluição -1);
Volume total misturado = Volume do diluente + Volume transferido;
Como fazer
Exemplo: digamos que você quer fazer uma diluição começando com 1/2 para uma curva padrão com 7
pontos (a partir da amostra pura).
Isso que dizer que teremos 7 tubos identi�cados da seguinte forma: 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64 e
1/128.
1. Determine o volume do diluente para cada etapa:
Suponhamos que vamos precisar de no mínimo 100 uL. Adicione um volume extra, por exemplo 20 uL,
para compensar erros de pipetagem. Desse modo, colocaremos em cada tubo 120 uL de diluente.
2. Calcule o volume a ser transferido de um tubo para outro:
Volume transferido = 120 uL / (2-1) = 120 uL.
3. Calcule o volume total misturado:
Volume total misturado = 120 uL + 120 uL = 240 uL.
4. Prepare os tubos, colocando 120 uL de diluente em cada um.
5. Prepare a primeira diluição, que será de 1/2, com 120 uL de amostra mais 120 uL de diluente (que já
está no tubo).
6. Trans�ra 120 uL do tubo 1 (diluição 1/2) para o segundo tubo e misture bem.
7. Faça o mesmo para todos os tubos seguintes.
8. Quando chegar no último tubo, retire 120 uL, para não �car com 240 uL.
Se você tiver certeza que não irá precisar dos 120 uL restantes na pipeta, pode desprezá-los.
Caso você venha a precisar deles para dar continuidade na sua diluição seriada, guarde num tubo
identi�cado.
Isso é importante pois você economiza tempo e não vai precisar começar do zero (da diluição de 1/2).
 
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Aplicações
As diluições seriadas são muito utilizadas nas análises clínicas e em pesquisas cientí�cas.
Em alguns exames com resultadospositivos, como por exemplo VDRL, Coombs indireto, ASO, PCR e
Fator Reumatoide (aglutinação em látex), a diluição seriada é utilizada para ver em qual diluição da série
houve o último sinal de reatividade.
Por exemplo: tenho um resultado de VDRL positivo. Faço a diluição seriada e constato que a última
reatividade ocorreu na diluição de 1/256. Esse é o resultado do exame, que a gente chama de título da
reação.
VDRL 
Resultado: Reagente (Título 1/256) 
Valor de referência: Não reagente 
Metodologia: Microfloculação
No caso de uma curva padrão para ELISA, também utilizamos a diluição seriada. Nesse caso não é
observada a reatividade da reação, apenas diluímos o padrão para calibrar o aparelho.
Na microbiologia, a diluição seriada também é utilizada para diluir colônias de bactérias, por exemplo.
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Brunno Câmara - Biomédico, CRBM-GO 5596, habilitado em patologia clínica e hematologia. Docente
do Ensino Superior. Especialista em Hematologia e Hemoterapia pelo programa de Residência
Multiprofissional do Hospital das Clínicas - UFG (HC-UFG). Mestre em Biologia da Relação Parasito-
Hospedeiro (área de concentração: virologia). Criador e administrador do blog Biomedicina Padrão.
Criador e integrante do podcast Biomedcast. 
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