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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS CURSO: FARMÁCIA DISCIPLINA: BIOQUIMICA METABOLICA NOME DO ALUNO: WALQUIRIA RIBEIRO BARBOSA RA: 0608978 POLO DE MATRÍCULA : SÃO JOAQUIM DA BARRA – SP POLO DE PRÁTICA : RIBEIRÃO PRETO –SP VISTO DO DOCENTES : PROFº DRA. FERNANDA , PROFº DRA. ANA PAULA DATA DAS AULAS PRÁTICAS: 19/08/2023 e 26/08/2023 TITULO DO ROTEIRO: Bioquímica Metabólica INTRODUÇÃO: Carboidratos são polidroxialdeídos ou polidroxicetonas ou substâncias que liberam tais compostos por hidrólise. Os carboidratos constituem mais de 90% de matéria seca dos vegetais. Fornecem a maior parte das calorias da dieta da população humana, além de proporcionar texturas e adaptabilidade desejáveis, também é importante para a lubrificação das articulações e é universalmente reconhecido poder edulcorante. Os mais utilizados pelo homem são o amido e a sacarose e, por isso, as plantas que os contêm são as mais cultivadas e consumidas. Nos animais, o principal açúcar é a glicose, a qual vai ser utilizada por consumidas. Nos animais, o principal açúcar é a glicose, a qual vai ser utilizada por no mínimo 5 vias metabólicas, e o carboidrato de reserva, o glicogênio, que é pouco solúvel e composto exclusivamente por monômeros de glicose unidos por ligação do tipo 1, 4. Nas plantas, há grande variedade de carboidratos, e o amido (polissacarídeo) é, por excelência, o de reserva, encontrado, por exemplo, no tubérculo da batata e no agrião. Nos açúcares as denominações das letras D e L, depende da posição do grupo hidroxila (-OH) no penúltimo carbono, ou seja, do carbono próximo ao grupo CH2, (-OH do lado direito, denominação D; -OH do lado esquerdo, denominação L). A classificação mais simples dos carboidratos divide-os em três grupos: monossacarídeos, que são os açúcares simples com uma unidade de poliidroxialdeído ou poliidroxicetona, que é a glicose, a frutose e a galactose; oligossacarídeos, que são polímeros com 2 a 20 açúcares simples unidas por ligações glicosídicas, que é a sacarose (glicose + frutose), a maltose (glicose +glicose) e a lactose (glicose + galactose); e/polissacarídeos, que são polímeros com mais de 20 açúcares simples unidos por ligações glicosídicas, que é a celulose, o glicogênio e o amido. (Campbell, Farrel,2007) Os lépidos são compostos orgânicos que tem a natureza de ésteres, pois são formados pela combinação de ácidos (ácidos graxos) com álcoois (geralmente o glicerol). De forma incorreta os lipídios são chamados de gorduras por algumas pessoas, mas na realidade as gorduras são um tipo de lipídios provenientes dos animais e vegetais. São substâncias cuja característica principal é a insolubilidade em solventes polares e a solubilidade em solventes orgânicos (apolares), apresentando natureza hidrofóbica, ou seja, aversão a molécula de água. (Banes, John, Dominiczak, 2000) As proteínas são macromoléculas compostas por pequenas moléculas de aminoácidos relacionadas através de ligações peptídicas. Sendo assim, são polímeros, onde os monômeros são aminoácidos. Essas macromoléculas possuem os aminoácidos (AA) como subunidade estrutural básica, que apresentam um grupo amina (NH2). Um grupo carboxila (grupo ácido), e um radical (R) que irá fazer a diferenciação dos tipos de aminoácidos. (Baynes, John, Dominiczak, 2000) A glicose é a principal fonte de energia que nossas células usam para exercer suas atividades. Ela é absorvida por todos os tecidos do nosso corpo, porém fica acumulada principalmente em três deles: o tecido adiposo o tecido muscular e o tecido hepático. A insulina e o glucagon são produzidos pela parte endócrina do pâncreas em dois tipos celulares diferentes chamadas de células betas e células alfa, respectivamente. O DM1 ocorre quando as células de defesa do nosso corpo atacam especificamente as células betas do pâncreas, responsáveis pela produção da insulina. Como consequência não há mais a sinalização para que a glicose seja captada pelas células, desencadeando um aumento em suas concentrações séricas. O diagnóstico de DM1 ocorre quando o paciente ainda é muito novo, geralmente antes dos 5 anos de idade, podendo ainda ser diagnosticado antes mesmo de completar 1 ano. Quando o diagnóstico é feito praticamente todas as células produtoras de insulina já foram destruídas e a reposição de insulina para o paciente é obrigatória. (Devlin,2007) O teste de Curva Glicêmica é chamado de tolerância à glicose, ou TOTG, é um exame que tem o objetivo de auxiliar no diagnóstico de diabetes, pré-diabetes, resistência à insulina ou outras alterações relacionadas ás células pancreáticas. Esse exame é feito a partir da análise da concentração de glicose no sangue em jejum e depois da ingestão de um líquido açucarado. Assim, o médico pode avaliar como o organismo funciona frente a elevadas concentrações de glicose. (Devlin,2007) Aula 1 - Roteiro 1: Determinação da Glicemia. O exemplo da glicose é feito com objetivo de verificar a quantidade de açúcar no sangue, que recebe o nome de glicemia, e é considerado o principal exame para diagnosticar a diabetes. Pode ser feito de várias maneiras, como: Glicemia capilar, Glicemia em jejum, Hemoglobina glicada, Curva glicêmica, Glicemia pós-prandial. (Devlin,2007) Procedimento: Durante a aula, o método utilizado para a determinação da glicemia foi o enzimático-colorimétrico. Conclusão: Conclui-se que o paciente está com a glicemia em jejum normal, pois o resultado apresenta-se dentro da referência da normalidade (abaixo de 100). Foto: autoria própria Foto: autoria própria Fazendo a leitura no espectrofotômetro: Foto: autoria própria Aula 1 - Roteiro 2: Determinação da Glicosúria. Glicosúria significa a presença de glicose na urina, o que pode indicar a presença de alguns problemas como diabetes até doenças renais. Os adultos em situação saudável, o rim é capaz de reabsorver quase toda a glicose presente na urina e, por isso, o exame de urina não é capaz de detectar a presença de glicose. Quando alguma quantidade de glicose é identificada, isso pode significar duas situações: • existe glicose em excesso no sangue, podendo ser sinal de diabetes ou alterações no pâncreas; o rim não está conseguindo reabsorver a glicose corretamente devido a algum problema renal. Neste caso, a glicosúria é chamada de glicosúria renal. Os sintomas da glicosúria são de diabetes descompensada, seja ela do tipo Mellitus ou gestacional, principalmente quando o paciente apresenta aumento no volume urinário (poliúria), e sede excessiva (polidispsia). (Baynes, John Dominiczak, 2000) . A principal diferença entre as causas mais comuns e os problemas renais é que, no caso da glicosúria causada por diabetes ou alterações no pâncreas, a quantidade de glicose no sangue também está aumentada, enquanto que no caso da glicosúria renal, causada por problemas nos rins, o valor de glicose no sangue tende a estar normal. (Banes, John, Dominiczak, 2000) Procedimento: Com o auxílio da pipeta dor automático, foi pipetado uma quantidade mínima da urina na fita na marca de glicose. Assim, que a urina entrou em contato com a fita, no local indicado, já houve alteração da cor de amarelo para verde bem escuro, onde se detecta a presença de glicose na urina do paciente. Conclusão: Pode-se concluir que o paciente está com uma grande quantidade de glicose na urina, o que indica que o paciente pode estar com uma alta taxa de glicose no sangue ou ainda, com um possível problema renal. Foto: autoria própria Aula 1 - Roteiro 3: Determinação da Colesterol Total no sangue. O colesterol é uma substância pertencente aogrupo dos álcoois, tem alto peso molecular, é denominado de zoosteróis por ser sintetizado pelo próprio organismo animal. No caso do ser humano, o colesterol é sintetizado pelo fígado, órgão que produz cerca de 75% do colesterol utilizado no nosso organismo. Como característica da classe álcool, o colesterol apresenta um grupo OH ligado a carbono saturado, porém a maior parte de sua estrutura é composta apenas por átomos de carbono e hidrogênio, o que faz com que ele tenha uma característica apolar. Por ser apolar, apresenta intensa dificuldade em dissolver-se na água, e consequentemente no sangue, portanto, é um composto lipossolúvel. Para ser transportado através da corrente sanguínea ele liga-se a diversos tipos de lipoproteínas, ou seja, o colesterol associa-se a um fosfolipídio e a uma proteína. As lipoproteínas são classificadas de acordo com a sua densidade e as duas principais usadas para o diagnóstico do colesterol são: • LDL (Low Density Lipoproteins): São as proteínas de baixa densidade, apresenta maior quantidade de gordura do que de proteína e tem a função de levar o colesterol do fígado até os tecidos, por esse motivo, ele é chamado de "colesterol ruim". HDL (Higt Density Lipoproteins): São as proteínas de alta densidade, apresenta maior quantidade de proteína do que de gordura, sua função é levar o colesterol dos tecidos até o fígado, para pósteros excreção, uma ação benéfica ao organismo e por isso é chamado de "colesterol bom ". (Marzzoco, Torres, 2007) Procedimento: Para este teste, utilizamos o kit de determinação de colesterol. Conclusão: Conclui-se que o paciente está com o colesterol dentro na normalidade, pois o resultado do exame foi de 97 (abaixo de 190). Foto: autoria própria Aula 2 - Roteiro 1: Determinação da Triglicerídeos no sangue. Triglicerídeos, também chamado de Triglicérides, são gorduras ou óleo de origem vegetal ou animal, e sua obtenção vem da reação entre um ácido graxo e um glicerol. Se o triglicerídeo for uma gordura, ele apresentará em sua estrutura radicais de ácidos graxos saturados (só com ligações simples). Mas se for óleo, predominara radicais de ácidos graxos insaturados (possui ligações duplas ou triplas). É obtido através de reações entre um glicerol e ácidos graxos (ácidos carboxílicos de cadeia longa, ou seja, compostos orgânicos que apresentam este grupo carboxila: _COOH). Triglicérides, são a reserva de energia do corpo humano, tem a função de fornecer "combustível" para os músculos. Quando as triglicérides não são usadas como fonte de energia, passam a ser armazenados no tecido adiposo, como gordura. (Marzzoco, Torres, 2007) Procedimento: Para este teste, utilizamos o kit de determinação de enzimática. Resultado: Conclui-se que o paciente está com a triglicérides dentro da normalidade, pois o resultado do exame foi de 88 (abaixo de 150). Foto: autoria própria Aula 2 - Roteiro 2: Determinação de Proteínas Totais e Albumina Sanguínea. As proteínas são estruturas importantes para o bom funcionamento do organismo, tomando uma variedade de formas como albumina, anticorpos e enzimas, desempenhando funções como o combate a doenças, regulação das funções do corpo, construção do músculo, e transporte de substâncias pelo corpo. A albumina é uma proteína produzida no fígado e é necessário para diversos processos no organismo, como transporte de hormônios e nutrientes e para regular o ph e manter o equilíbrio osmótico do organismo, o que acontece por meio da regulação da quantidade de água no sangue. Aproximadamente 7% do volume do plasma sanguíneo é composto por substâncias proteicas, sendo classificada como: . Fibrinogênio: atua na coagulação do sangue; . Globulinas: correspondem aos anticorpos que agem na defesa do organismo, contra infecções, e as lipoproteínas, que transportam lipídeos, como o HDL, que evita o depósito de ateroma nas paredes das artérias. Albuminas: proteína que auxilia a regulação do controle osmorregular do sangue e faz a manutenção da pressão sanguínea, além de proporcionar a difusão de agentes hormonais e ácidos graxos, sem a mais abundante na composição do plasma. (Campbell, Farrel,2007) Procedimento: Durante a aula, o método utilizado para a determinação de proteínas totais e albumina sanguínea foi o biureto, esse método se baseia na reação do reativo do biureto, que é constituído de uma mistura de cobre e hidróxido de sódio com um complexante que estabiliza o cobre em solução. Conclusão: Conclui-se que o paciente está com baixa de proteínas totais e albumina em seu organismo, o que deve ser indicado uma dieta com alimentos ricos em proteínas, como carnes, leite, ovos, peixe, pois as proteínas desse alimento são de alto valor biológico, sendo utilizado pelo organismo mais facilmente. Foto: autoria própria Aula 2 – Roteiro 3: Determinação de Proteínas Totais e Albumina na Urina. As proteínas também podem ser encontradas na urina, que são chamadas de proteinúria, que corresponde à presença de proteína na urina, em geral, a albumina, neste caso, quando há presença de albumina, o termo correto é albuminúria, já que essa é a proteína mais comum na urina. A proteinúria é um marcador de doença renal e desempenha um papel importante na triagem, no diagnóstico e na monitorização das doenças renais. Estudos epidemiológicos demonstram que a proteinúria é um fator de risco independente para eventos cardiovasculares e doença renal progressiva. A proteinúria acontece porque as moléculas de proteína são grandes em tamanho e, por isso, não conseguem passar através dos glomérulos ou filtros renais, não sendo normalmente excretadas na urina. Os rins filtram o sangue, eliminando aquilo que não interessa e retendo aquilo que é importante para o organismo, no entanto, em algumas situações, os rins permitem que as proteínas passem pelos seus filtros, causando um aumento do teor proteico na urina. No caso da albuminuria pode ser classificada de acordo com a extensão da lesão nos rins, ela pode ser microalbuminúria, quando pequenas quantidades de albumina são encontradas na urina o que nade significar que a lesão renal ainda está no início, ou é somente um caso situacional, com uma infecção urinária. Quando é encontrada grande concentração de albuma na urina, é classificado como macroalbuminúria, o que indica um problema renal grave. (Campbell, Farrel,2007) Foto: autoria própria Aula 3 Roteiro 1: Determinação de Ácido Úrico no Sangue (uricemia) Roteiro 2: Determinação de Ácido Úrico na Urina O ácido úrico é uma substância formada pelo organismo depois da digestão das proteínas, que formam uma substância chamada purina, que depois dão origem aos cristais de ácido úrico, que se acumulam nas articulações causando dor intensa. Normalmente o ácido úrico não causa nenhum problema de saúde sendo eliminado pelos rins, porém, quando existe algum problema renal, quando a pessoa ingere muita proteína ou quando seu corpo produz ácido úrico em excesso, este se acumula nas articulações, tendões e rins, dando origem a Artrite Gotosa, também conhecida popularmente como Gota, que é o tipo de artrite muito dolorosa e ataca principalmente membros inferiores e é mais comum em homens adultos. (Devlin, 2007) Foto: autoria própria Conclusão: Nos dois experimentos os valores de presença de ácido úrico no sangue e na urina resultaram normais. Aula 3 - Roteiro 3: Determinação de bilirrubinas no sangue A bilirrubina é uma substância amarelada, produto da destruição das hemácias, que para ser eliminada pelo organismo, necessita ser conjugada a um açúcar no fígado e sofrer ação da bile. Ela permanece no plasma sanguíneo até ser eliminada pela urina. O excesso de birrubina (hiperbilirrubina), pode indicar problemas no fígado, baço, nos rins ou na vesícula biliar. Existemdois tipos de bilirrubina, a indireta e a direta. Na indireta, também chamada de não conjugada, ela é insolúvel em água, é a substância formada pela destruição dos glóbulos vermelhos e é transportada para o fígado, onde é transformada em substância solúvel, por esse motivo, tem maior concentração no sangue e pode ser alterada por alguma condição com as hemácias, como a anemia. Já na bilirrubina direta, também chamada de conjugada, pois ela é conjugada ao ácido glicurônico, no fígado, sofre ação da bile no intestino, sendo eliminada na forma de urobilinogênio ou estercobilinogênio, portanto, quando há alguma lesão hepática ou obstrução biliar, a concentração da bilirrubina direta e alterada; essa forma é solúvel em água, e por isso, pode ser encontrada em pequenas quantidades na urina. (Devlin,2007) Foto: autoria própria Conclusão: Valores normais para Bilirruna direta, indireta e total. Aula 4 – Roteiro 1: Determinação de Bilirrubina em Amostra de Urina. Quando a urina apresenta uma alteração na sua cor para um amarelo escuro a alaranjado, significa a presença de bilirrubina, que indica problemas no fígado, e que pode ser confirmado através de um exame de urina. As principais causas de bilrrubina na urina são: hepatite, cirrose, câncer de fígado e cálculos biliares. O exame é bem simples, sendo realizado através da coleta da urina do paciente e feito com a utilização de fita teste. O valor de referência é dado através da alteração da cor da fita comparando com a cor de referência indicada na embalagem da fita teste. (Marzzoco, Torres, 2007) Foto: autoria própria Procedimento: Com o auxílio do pipetador automático, foi colocado uma pequena quantidade da urina na fita teste. O teste foi tanto com a urina patológica, quanto com urina saudável. Resultado: Resultado positivo para a urina patológica e negativo para urina saudável. Aula 4 – Roteiro 2: Determinação do Ferro no Sangue. O objetivo desse exame é determinar a concentração de ferro no sangue do paciente, verificando se há carência ou sobrecarga desse mineral, que permite a fixação do oxigênio na hemoglobina havendo transporte para todo o corpo, faz parte do processo de formação das hemácias e ajuda na formação de algumas enzimas importantes para o corpo. Dependendo da quantidade de ferro no organismo, o diagnóstico pode ser de deficiência nutricional, anemia ou problemas no fígado. (Marzzoco, Torres, 2007) Quando o ferro sérico se apresenta baixo, a principal consequência é a anemia ferropriva, que acontece devido à diminuição da falta de ferro no corpo, o que diminui a quantidade de hemoglobina e hemácias. Esse tipo de anemia pode acontecer tanto devido à diminuição da quantidade de ferro consumido diariamente, como também devido a alterações gastrointestinais que tornam a absorção do ferro mais difícil, outras situações como fluxo menstrual intenso, hemorragias gastrointestinais, neoplasias, entre outras também são consequências de baixa de ferro. Quando o ferro se apresenta aumentado no sangue, sintomas como dores abdominais e nas articulações. Problemas cardíacos. Perda de peso fadiga fraqueza muscular e diminuição da libido são apresentados. O aumento da quantidade de ferro pode ser devido a alimentação rica em ferro, hemocromatose, doenças do fígado, entre outras. (Marzzoco, Torres, 2007) O tratamento para diminuir a quantidade de ferro, é o ajuste na dieta ou ainda o uso de medicamentos quilates de ferro, que são aqueles que são aqueles que se ligam ao ferro e não deixam que se acumule no organismo. Já para aumento de ferro, além de uma dieta rica nesse mineral, pode ser indicada a suplementação de ferro com medicamentos. (Marzzoco, Torres, 2007) Foto: autoria própria Procedimento: Durante a aula, o método utilizado para a determinação de ferro no sangue é o Goodwin modificado, que é quando o ferro é liberado da transferrina em meio ácido e reduzido ao estado ferroso por ação da hidroxilamina. Posteriormente, reage com o ferrozine levando a formação de um complexo de cor violeta. Conclusão: No caso de o paciente ser do sexo feminino, o resultado apresenta-se dentro da normalidade de ferro sérico no sangue Aula 4 – Roteiro 3: Determinação do Cálcio no Sangue. O cálcio é o mineral mais encontrado no nosso corpo, sendo encontrado nos ossos e nos dentes, além da formação dos ossos, ele também participa dos processos de contração muscular, liberação de hormônios e coagulação do sangue, transmite impulsos nervosos e mantem o equilíbrio do ph do sangue. E muito importante que o cálcio seja ingerido na quantidade adequada, especialmente durante a infância, pois é nesta fase que se formam os ossos e os dentes, que no futuro poderão funcionar como uma reserva de cálcio em casos de deficiência, já que é muito utilizado pelo organismo. Quando não há ingestão correta de alimentos ricos em cálcio, como leite e derivados, sardinha, amêndoas, tofu, pode haver uma deficiência de cálcio fazendo com o que o organismo retire o cálcio dos ossos para desempenhar suas funções, com isso, problemas como osteopenia (diminuição da densidade mineral dos ossos), e osteoporose (perda da massa óssea) pode surgir. Para um adulto, o valor de referência foca entre 8,8 a 11,0 mg/dl. (Campbell, Farrel,2007) Foto: autoria própria Procedimento: Durante a aula, o método utilizado para a determinação de cálcio no sangue é o colorimétrico - cresolftaleina. Conclusão: No caso de o paciente ser um adulto, o resultado de 6,03 está abaixo do valor de referência, sendo orientado o paciente a uma dieta rica em cálcio, com alimentos como leite, queijo iogurte, sardinha, castanhas e amêndoas. REFERENCIAS: - Baynes, John & Dominiczak, Marek H. Bioquímica Médica. 1ª Edição, Editora Manole, São Paulo - SP, 2000. - Campbell, M.K.; Farrell, S.O. Bioquímica, v.3 - Bioquímica Metabólica. 1ª Edição, Editora Thomson, São Paulo-SP, 2007. - Devlin, T. M., Manual de Bioquímica com correlações clínicas. 6ª Edição, Editora Sarvier, São Paulo - SP, 2007. - Marzzoco, A. e Torres, B. B., Bioquímica Básica. 3° Edição, Editora Guanabara, Rio de Janeiro - RJ, 2007
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