laboratorio 1 de fitoterapia

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Considere que você é um pesquisador do laboratório de farmacognosia de sua universidade e está prestes a validar um novo método de cromatografia em camada delgada para a identificação de compostos isolados a partir de uma espécie vegetal. Os compostos pertencem à classe dos terpenos e apresentam ligeira lipofilia. Em seu laboratório, há disponibilidade de cromatoplacas compostas por diferentes materiais adsorventes.
Nessas condições, qual das alternativas a seguir seria uma cromatoplaca viável para a sua análise?
Você não acertou!
A. 
Cromatoplaca de celulose.
As cromatoplacas de celulose são indicadas para a separação de compostos hidrofílicos, como aminoácidos e carboidratos, devido à presença de grupamentos hidroxila nesse material adsorvente. Nesse caso, essa fase estacionária não é indicada para a análise de terpenos.
Resposta incorreta.
B. 
Cromatoplaca de Kieselguhr.
O adsorvente de Kieselguhr é indicado para a análise de açúcares e aminoácidos, pois essas funções apresentam carácter hidrofílico. Portanto, as placas de Kieselguhr não são indicadas para a análise de terpenos.
Resposta correta.
C. 
Cromatoplaca de sílica em gel.
A sílica em gel, como fase estacionária da técnica de CCD, é indicada para a análise de compostos lipofílicos, como alcaloides, fenóis, compostos terpênicos e esteroides. Portanto, as cromatoplacas de sílica em gel seriam a primeira escolha para a análise dos compostos terpênicos isolados.
Você recebeu, em seu laboratório, três amostras de óleo essencial de capim-limão (Cymbopogonis folium) para análise. Conforme a Farmacopeia brasileira (BRASIL, 2019), essa planta medicinal apresenta como composto majoritário citral o óleo essencial. Você conduz a análise de CCD conforme descrito na farmacopeia e aplica a solução de referência, composta por padrão de citral. A revelação da placa sob luz ultravioleta (365nm) apresentou os seguintes resultados, conforme esquema demonstrado na imagem:
Amostra (1): banda de coloração azul-escura e Rf de 0,6.
Amostra (2): banda de coloração azul-clara e fluorescente e Rf de 0,6.
Amostra (3): banda de coloração azul-escura e Rf de 0,4.
Solução de referência (padrão de citral): banda de coloração azul-escura e Rf de 0,6.
Mediante os resultados, você pode concluir que:
Resposta correta.
A. 
Somente a amostra 1 se trata do óleo essencial de capim-limão.
A amostra 1 apresentou coloração de banda (azul-escura) e Rf (0,6) compatíveis com a banda da solução de referência, caracterizando-a como óleo essencial de capim-limão. Já as amostras 2 e 3 não apresentaram bandas características do composto citral.
Resposta incorreta.
B. 
As amostras 1 e 2 apresentaram valor de Rf idêntico à solução de referência, caracterizando-as como óleo essencial de capim-limão.
Apesar de ter valor de Rf (0,6) igual ao da solução de referência, amostra 2 apresentou coloração da banda diferente. Dessa forma, somente a amostra 1 se trata do óleo essencial de capim-limão.
Você não acertou!
C. 
Nenhuma amostra analisada apresentou os parâmetros de banda (cor e Rf) característicos do composto majoritário citral.
A amostra 1 apresentou coloração de banda (azul-escura) e Rf (0,6) compatíveis com a banda da solução de referência, o que indica a presença do composto majoritário citral no óleo essencial.
Embora seja considerada uma técnica de fácil execução e de baixo custo, durante a análise de compostos por CCD, alguns cuidados devem ser adotados, a fim de se obter um resultado com boa confiabilidade. Entre os procedimentos citados a seguir, qual está de acordo com os procedimentos-padrão adotados para a execução da prática?
Você acertou!
A. 
Para o cálculo do fator de retenção, a placa deve ser imediatamente marcada na linha correspondente à eluição do solvente após a remoção da placa da cuba.
Para o cálculo do FR, faz-se necessário ter os valores de deslocamento da banda da amostra a partir da origem de aplicação e de deslocamento total da fase móvel. Para tanto, o deslocamento da fase móvel deverá ser marcado a lápis antes da evaporação do solvente.
Resposta incorreta.
B. 
Para a marcação, pode ser empregado qualquer material, desde que risque a cromatoplaca.
Para a marcação da cromatoplaca, deve ser utilizado apenas lápis (grafite), uma vez que a tinta de canetas tem pigmentos que seriam eluídos pela placa, impossibilitando a visualização da migração das amostras.
Resposta incorreta.
C. 
O volume de fase móvel preparado deverá ser suficiente para cobrir a linha de aplicação das amostras na cromatoplaca após a transferência desta para a cuba.
Durante o procedimento, a cromatoplaca deve ser transferida com cuidado para a cuba de CCD contendo o solvente, e a linha de aplicação das amostras não poderá entrar em contato direto com o solvente, uma vez que isso não permitiria a eluição de forma correta.
4. 
O eugenol (164,2g/mol) é um alilbenzeno que apresenta ligeira lipofilia e está presente em óleos essenciais de diferentes espécies vegetais. A sua aplicação em formulações cosméticas, por exemplo, pode exercer atividade antimicrobiana, além de ser comumente empregado como aroma. Com base nas características físico-químicas desse composto, quais seriam a fase móvel e a fase estacionária ideais, respectivamente, para a sua análise por CCD?
Resposta incorreta.
A. 
Acetato de etila:tolueno (97:e cromatoplaca de sílica em gel.
Em prática e conforme recomendado em compêndios oficiais, para a análise de eugenol, faz-se necessária a aplicação de uma fase móvel mais apolar, e a proporção ideal de acetato de etila e tolueno seria de 3:97. A cromatoplaca de sílica em gel é recomendada para a análise desse composto.
Você acertou!
B. 
Tolueno:acetato de etila (97:e cromatoplaca de sílica em gel.
A aplicação de fase móvel apolar, como tolueno:acetato de etila (97:3), e cromatoplaca de sílica em gel é ideal e preconizada em compêndios oficiais para a análise de eugenol por CCD, em virtude de ser um composto lipofílico.
Resposta incorreta.
C. 
Tolueno:acetato de etila (97:e cromatoplaca de poliamida.
A fase móvel composta por tolueno:acetato de etila (97:3) é ideal para a análise de compostos lipofílicos, como o eugenol. Contudo, a cromatoplaca de poliamida é indicada para a análise de compostos polares, como aminoácidos, não sendo indicada para essa análise.
 
Considerando que a vanilina sulfúrica a 5% é um revelador cromogênico universal para CCD e interage com o eugenol (4-alil-2-metoxifenol), formando uma banda de coloração castanho-avermelhada, qual composto a seguir formará uma banda de coloração semelhante ao eugenol ao reagir com a vanilina sulfúrica?
Você acertou!
A. 
Apiol (fenilpropanoide, 1-alil-2,5-dimetoxi-3,4-metilenodioxibenzeno).
Assim como o eugenol, o apiol pertence à classe dos fenilpropanoides e, devido à interação com a solução de vanilina sulfúrica, produz banda de coloração castanho-avermelhada.
Resposta incorreta.
B. 
Linalol (monoterpeno, 3,7-dimetil-octa-1,6-dien-3-ol).
O linalol pertence à classe dos terpenos e interage com a solução de vanilina sulfúrica, formando uma banda de coloração azul.
Resposta incorreta.
C. 
Citral (monoterpeno, 3,7-dimetil-2,6-octadienal).
O citral pertence à classe dos terpenos e interage com a solução de vanilina sulfúrica, formando uma banda de coloração azul-violeta.