Teste conhecimento 3

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BIOLOGIA MOLECULAR E FARMACOGENÉTICA 
 
Lupa 
 
 
 DGT1143_201902519681_TEMAS 
 
 
 
 
AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 
 
 
 
1. 
 
 
No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia 
da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada 
para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a 
determinação da resistência a antibióticos e, até 
mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A 
figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de 
amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma 
amplificação de um determinado segmento gênico 
que identifica um determinado marcador tumoral em 
células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo 
segmento gênico em células não neoplásicas. 
A partir das informações apresentadas, conclui-se 
que: 
 
 
A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase 
exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais 
positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. 
 
O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não 
neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), 
que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência-alvo um bom marcador tumoral. 
 
o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção 
da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. 
 
A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da 
amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no 
ciclo 40, para a amostra B. 
 
O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, 
pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. 
Data Resp.: 29/08/2023 16:29:19
 
Explicação: 
A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do 
limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. 
 
 
 
 
2. 
 
 
Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de 
identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e 
informativo, pode-se notar três fases: uma inicial, após a descrição 
de um marcador voltado ao polimorfismo genético em 1980, que
deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de 
técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição 
- restriction fragment length polymorphism (RFLP) -; uma segunda 
fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 
do século XX, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que 
permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e 
a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas 
de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira 
etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica 
e estatística e a geração de bancos de dados. 
Considerando as aplicações da PCR, assinale a opção correta. 
 
 
A RT-qPCR permite a amplificação por meio da adição de aminoácidos a novas fitas de 
polímero sintetizadas. 
 
Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar diferentes sequências 
simultaneamente. 
 
Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a 
identificação de indivíduos. 
 
O uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que 
as fitas são separadas. 
 
Ao se planejar um experimento para identificação de indivíduos, deve-se ter o cuidado de 
escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações. 
Data Resp.: 29/08/2023 16:29:40
 
Explicação: 
A resposta correta é: Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem 
repeats) facilita a identificação de indivíduos. 
 
 
 
 
3. 
 
 
SNPs são empregados amplamente para a identificação humana e 
possuem diferenças relevantes. A análise dos SNPs também pode 
estar associada aos fenótipos individuais, havendo uma 
possibilidade futura de identificação de traços físicos como, por 
exemplo, a cor da íris. Os SNPs são: 
 
 
Sequências presentes somente no DNA mitocondrial 
 
Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA 
 
Heterozigotos 
 
Homozigotos 
 
Elementos repetitivos do genoma nuclear 
Data Resp.: 29/08/2023 16:29:48
 
Explicação: 
A resposta correta é: Polimorfismos de nucleotídeo único; uma variação na sequência de DNA. 
 
 
 
 
4. 
 
 
Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA 
transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de 
bibliotecas. 
 
Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a 
figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para 
síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta. 
 
 
 
Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados 
por A, U, C, G. 
 
A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. 
 
O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA. 
 
A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa. 
 
A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA. 
Data Resp.: 29/08/2023 16:30:14
 
Explicação: 
A resposta correta é: A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. 
 
 
 
 
5. 
 
 
A Biotecnologia trabalha predominantemente manipulando 
material genético de seres vivos; para a maioria dos organismos, o 
material genético é a molécula de DNA. Acerca da estrutura da 
molécula de DNA, assinale a opção correta. 
 
 
O DNA é composto por quatro tipos de bases nitrogenadas: adenina, citosina, timina e 
uracila. 
 
O açúcar contido na molécula de DNA é a ribose. 
 
As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de hidrogênio entre 
suas bases nitrogenadas. 
 
Há complementaridade entre as bases nitrogenadas adenina e timina e entre guanina e 
uracila. 
 
Em uma cadeia de DNA, os nucleotídeos se ligam aos açúcares e fosfatos por pontes de 
hidrogênio. 
Data Resp.: 29/08/2023 16:30:35
 
Explicação: 
A resposta correta é: As duas fitas que compõem a molécula de DNA são ligadas por pontes de 
hidrogênio entre suas bases nitrogenadas.