Teste conhecimento 4

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BIOLOGIA MOLECULAR E FARMACOGENÉTICA 
 
Lupa 
 
 
 
DGT1143_201902519681_TEMAS 
 
 
 
SEQUENCIAMENTO, CLONAGEM E TÉCNICAS DE HIBRIDIZAÇÃO 
 
 
 
1. 
 
 
A hibridização in situ é uma ferramenta diagnóstica de doenças 
genéticas, como a distrofia muscular de Duchenne, e infecciosas, 
como a infecção por papilomavírus humano (HPV) em colo uterino. 
Sobre as técnicas de hibridização in situ, é incorreto afirmar que: 
 
 
São feitas em tecidos e células fixadas e permeabilizadas, para preservação das estruturas 
celulares e entrada das sondas, respectivamente; 
 
As sondas podem ser marcadas com enzimas, fluoróforos e radioatividade; 
 
Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; 
 
Permite a identificação com precisão do local na célula ou tecido em que a sequência-alvo 
está; 
 
Exigem leitura através de microscópios especializados. 
Data Resp.: 29/08/2023 17:02:39
 
Explicação: 
A resposta correta é: Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; 
 
 
 
 
2. 
 
 
O sequenciamento de DNA revolucionou nosso conhecimento 
sobre o material genético e revelou que a maior parte dele não 
codifica nenhuma proteína. Com relação ao sequenciamento de 
DNA, assinale a alternativa correta. 
 
 
Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que 
não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo 
pela DNA polimerase. 
 
Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos 
os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada 
um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. 
 
O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de 
substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da 
segunda geração. 
 
Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma 
das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar por 
completo. 
 
Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de 
comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro 
tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades. 
Data Resp.: 29/08/2023 17:07:15
 
Explicação: 
A resposta correta é: Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados 
de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo 
nucleotídeo pela DNA polimerase. 
 
 
 
 
3. 
 
 
O desenvolvimento da engenharia genética permitiu a retirada de 
genes de uma espécie e a posterior introdução deles em outro 
indivíduo de espécie diferente. Com essa ferramenta em mãos, o 
homem foi capaz de reproduzir genes de interesse. 
COSTA, Marco Antônio F.; COSTA, Maria de 
Fátima B. Biossegurança de OGM: uma 
visão integrada. Rio de Janeiro: Publit, 2009, 
p. 154, com adaptações. 
Com base nos conceitos de organismos geneticamente 
modificados (OGMs), assinale a alternativa correta. 
 
 
Organismos que tiveram genes alterados apenas quanto à respectiva posição ou expressão 
são transgênicos 
 
O setor da saúde não apresenta qualquer tipo de questionamento em relação ao uso dos 
OGMs, considerando os inúmeros benefícios trazidos por eles para o setor. 
 
Os transgênicos são produzidos através da alteração de genes em organismos adultos, 
sendo a modificação genética transmitida de uma célula a outra através de transformação. 
 
Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido modificado por 
qualquer técnica. 
 
Os OGMs, na respectiva totalidade, são considerados transgênicos. 
Data Resp.: 29/08/2023 17:07:41
 
Explicação: 
A resposta correta é: Os OGMs são organismos cujo material genético (RNA ou DNA) tenha sido 
modificado por qualquer técnica. 
 
 
 
 
4. 
 
 
As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-
se em uma amplificação clonal antes da reação de 
sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma 
técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, 
assinale a opção correta. 
 
 
Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em 
uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de 
DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 
(pirosequenciamento). 
 
A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 
(pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando 
gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e 
uma "bead" para sua ancoragem. 
 
A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e 
consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que 
contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua 
ancoragem. 
 
Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em 
uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de 
DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger. 
 
A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e 
consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que 
contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua 
ancoragem. 
Data Resp.: 29/08/2023 17:08:13
 
Explicação: 
A resposta correta é: A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 
454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando 
gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma 
"bead" para sua ancoragem. 
 
 
 
 
5. 
 
 
Alguns processos biotecnológicos podem ser empregados na 
produção de bioderivados, como é o caso dos ensaios de 
hibridização. Qual nome é dado para o processo de hibridização 
em que o DNA é fixado e transferido para uma membrana de 
nitrocelulose ou nylon? 
 
 
Hibridização in situ 
 
Hibridização por microarray 
 
Southern Blot 
 
Northern Blot 
 
Western Blot 
Data Resp.: 29/08/2023 17:08:21
 
Explicação: 
A resposta correta é: Southern Blot