Imunoensaios_ELISA

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29/04/2019 
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Imunologia 
Clínica 
Curso: Farmácia 
Profa: Bruna Santos 
profbrunasantos.edu@gmail.com 
 
Imunodiagnóstico 
IMUNOENSAIOS 
 Aglutinação 
 Imunoprecipitação 
 Imunoenzimáticos 
 Neutralização 
 Imunofluorescencia 
 Radioimunoensaio 
 Imunofluorimétricos 
 Quimioluminescência 
 
ENSAIOS 
IMUNOENZIMÁTICOS 
 Testes que permitem ensaios quali e 
quantitativos, para a detecção tanto de antígenos 
quanto de anticorpos. 
 
 Estes testes usam o produto da mudança de cor 
da interação da enzima com o seu substrato para 
medir a reação entre o antígeno e o anticorpo. 
 
 
ENSAIOS 
IMUNOENZIMÁTICOS 
 ELISA (Enzime-linked immunosorbent assay) 
Ensaio de imunoabsorção enzimática 
 Técnica imunoenzimática, sensível, para a quantificação de 
antígenos ou anticorpos. 
 Um dos reagentes é imobilizado em uma superfície sólida, 
enquanto outro pode ser ligado a uma enzima, com preservação 
tanto da atividade enzimática como da imunológica. 
 A detecção se completa ao analisar a presença do marcador 
depois de lavar os poços, que 
 vai mudar a coloração. 
ELISA 
 Elevadas sensibilidade e especificidade 
 Rapidez e baixo custo 
 Objetividade de leitura 
 Possibilidade de adaptação a diferentes graus de 
automação 
Eficiência depende da: 
Padronização adequada de todos os reagentes 
(concentração, tempo de incubação, pH do meio) 
 
ELISA 
 
 VARIAÇÕES 
 DIRETO 
 INDIRETO 
 CAPTURA 
 COMPETIÇÃO 
 
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ELISA DIRETO 
 Pesquisa do antígeno 
ELISA INDIRETO 
 Pesquisa do anticorpo 
Vamos praticar 
 A técnica de ELISA é muito utilizada na imunologia para o teste de 
anticorpos específicos ou presença de antígenos em soro de pacientes. 
No teste de ELISA indireto, assinale a alternativa que apresenta a ordem 
correta de colocação dos reagentes e onde o anticorpo secundário se 
liga. 
1. Antígeno conhecido. 
2. Substrato. 
3. Soro de paciente. 
4. Anticorpo secundário. 
 
a)2, 4, 1, 3 e anticorpo conhecido. 
b)1, 3, 4, 2 e região variável do anticorpo do paciente. 
c)2, 4, 1, 3 e região constante do anticorpo do paciente. 
d)3, 1, 4, 2 e parede do poço da placa de microtitulação. 
e)1, 3, 4, 2 e região constante do anticorpo do paciente. 
 
 
ELISA DE CAPTURA 
 Pesquisa do anticorpo 
ELISA DE CAPTURA 
 Pesquisa do anticorpo 
ELISA DE COMPETIÇÃO 
 Pesquisa do anticorpo ou antígeno 
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ELISA 
 
 Leitura visual: qualitativo 
 Equipamentos de detecção: quantitativo 
Vamos praticar 
Sobre a técnica de ELISA, assinale a alternativa incorreta: 
a)Na técnica de ELISA, é utilizado um suporte plástico onde é 
adsorvido o antígeno ou o anticorpo de interesse purificados, a 
amostra a ser testada é adicionada e a reação específica antígeno-
anticorpo é detectada pelo desenvolvimento de cor que acontece pela 
oxidação de um cromógeno incolor em consequência da reação 
catalisada por uma enzima previamente conjugada ao anticorpo 
detector. 
b)Na técnica de ELISA de captura, o detector é a molécula de antígeno, 
sendo a enzima conjugada desta forma a este antígeno. 
c)Na técnica de ELISA indireto, utiliza-se um anti-imunoglobulina 
conjugado a uma enzima para a detecção da ligação dos anticorpos 
presentes na amostra com os antígenos específicos acoplados ao 
suporte. 
d)A relação diretamente proporcional entre a intensidade da cor e a 
quantidade de antígeno ou anticorpo detectado só acontece na técnica 
de ELISA direto.