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Estudo dirigido 1- Bacteriologia 1- O que é microbiota normal? População de microrganismos. Habitam a pele e às mucosas de indivíduos normais e sadios. A microbiota normal desenvolve- se por sucessões, desde o nascimento até as diversas fases da vida adulta, resultando em comunidades bacterianas estáveis. 2-Explique a diferença de bactérias patogênicas de virulentas. Quais são os fatores (estruturas) de virulência das bactérias e suas funções? Identifique 3: Patogenia bacteriana: mecanismo pelo qual a bactéria causa uma lesão; bactéria patogênica: capaz de causar doença. Bactérias tem fatores de virulência variável: umas são mais virulentas e outras são menos virulentas. Fator de virulência: qualquer molécula e ou estrutura da bactéria que pode contribuir com o sucesso de uma infecção; vários são os fatores de virulência: Adesinas: qualquer estrutura ou molécula bacteriana que está relacionada com sua adesão nos tecidos do hospedeiro (pêlos, glicocálix etc). Flagelos: permite as bactérias flageladas (móveis) invadir áreas aquosas do corpo onde as bactérias não flageladas (imóveis) não conseguem. Exoenzimas: as exoenzimas e/ou toxinas que os patógenos produzem constituem os principais mecanismo pelos quais eles causam determinadas doenças. Coagulase: uma importante característica que identifica o Stahylococcus aureus no laboratório é sua capacidade de produzir uma proteína chamada coagulase. 3-Como as bactérias realizam a transferência de material genético e a resistência às antibióticos? Contato físico entre as bactérias através de Pili. Ocorre quando uma bactéria anteriormente sensível a um agente se torna resistente, o que resulta de uma modificação estrutural ou funcional da célula. O mecanismo de aquisição dessa resistência se dá por mutação ou transferência horizontal, sendo que ambos modificam o material genético cromossômico ou extra cromossômico(plasmídeo). A mutação ocorre raramente, pois a chance de sucesso em uma troca aleatória na sequência de genes é baixa, e, além disso, depende da falha de enzimas corretoras do DNA e da velocidade de replicação. A transferência horizontal pode ocorrer por conjugação, transformação, transdução ou transposição, entre a mesma espécie ou entre espécies diferentes. 4-Como os antibióticos funcionam nos microorganismos? Antibióticos são medicamentos poderosos que combatem as infecções bacterianas. Substâncias químicas produzidas por diferentes espécies de microrganismos que suprimem o crescimento de outros microrganismos e podem eventualmente destruí-los. Os antibióticos podem ter: Largo espectro – matam um grande leque de bactérias ex. Penicilina. Espectro reduzido – matam um tipo específico de bactérias ex. Isoniazida. Funcionam de duas maneiras: Bactericidas – matam as bactérias e os bacteriostáticos – evitam que as bactérias se dividam. 6- O que são e como agem os probióticos? Probióticos são alimentos (ou produtos) que contêm micro-organismos vivos que proporcionam benefícios para a saúde e são essenciais para o equilíbrio da microbiota ou flora intestinal. A boa saúde do intestino, mantida por bactérias benéficas que compõem a microbiota, está relacionada à manutenção da saúde de todo o organismo. Estudo dirigido 2- Bacteriologia 1- Observe a figura abaixo e identifique as estruturas: 1. Flagelo 2. Fímbrias 3. Cápsula 4. Parede 5. Membrana 6. Núcleo 7. Ribossomos 8. Citoplasma https://www.ecycle.com.br/7929-bacterias.html Estudo dirigido 3- Bacteriologia Roteiro de Aula Prática: Cultivo e Isolamento de bactérias Objetivo: Conhecer e aplicar técnicas de cultivo e isolamento bacteriano. Exercício 1 – TÉCNICA DE SEMEADURA – ESTRIAS DE DILUIÇÃO O Diagnóstico laboratorial bacteriano é um processo caracterizado por uma sucessão de etapas, dentre elas o cultivo e isolamento do agente infeccioso, a identificação e por fim o antibiograma. O cultivo e isolamento é de fundamental importância visto que permite a obtenção de culturas puras, ou seja, nas quais se encontram presentes apenas um tipo de microrganismo. A cultura pura é necessária para a realização das demais etapas do diagnóstico bacteriano visto que a amostra clínica, obtida de um animal com suspeita de infecção bacteriano, é usualmente composta por uma mistura de microrganismos. 1. Com o objetivo de se obter colônias isoladas, será realizada a semeadura da amostra em Placas de Petri, por meio da Técnica das estrias de diluição, conforme ilustrado abaixo: As equipes de estudantes utilizarão dois tipos de amostras, representadas por culturas puras de Staphylococcus aureus e de Escherichia coli, identificadas por S.A e E.C, respectivamente. Tendo em vista os resultados do cultivo e isolamento das amostras identificadas como S.A e E.C, semeadas nos meios de Cultura identificados com BHI, Manitol e Mac Conkey: 1. Responda as seguintes perguntas: 1. O BHI é um meio rico ou seletivo? Rico. Seletivo, para quem? Enterobactérias, Pneumococos, Estreptococos, Meningococos, Fungos, Leveduras e Não Fermentados 2. OManitol - meio rico ou seletivo? Seletivo Seletivo, para quem? Staphilococcus aureus 3. OMac Conkey - rico ou seletivo? Seletivo Seletivo, para quem?Escherichia coli 4. Quais são as sequências tintoriais para identificação das bactérias? Explique cada uma. 1ª Etapa: Cobrir o esfregaço fixado pelo calor com cristal violeta por 1 min. Todas as células coradas em roxo. 2ª Etapa: Adicionar a solução de iodo por 3 min. Todas as células permanecem roxas. 3ª Etapa: Descorar rapidamente com álcool por aproximadamente 20 seg. As células Gram negativas apresentam-se incolores. 4ª Etapa: Contracorar com Safranina por 1 – 2 min. As células Gram positivas coram-se em roxo. As Gram negativas são róseas ou vermelhas. 5. Qual característica principal das bactérias Gram negativas e Gram positivas? As paredes celulares são formadas por dissacarídeos que se repetem, sendo esses a N-acetilglicosamina (NAM) e o N-acetilmurâmico (NAG). A composição de G+ dá-se por várias camadas de peptidoglicana (é bem espessa) e não possui membrana externa. Ademais, sua parede possui ácidos teóicos que são as estruturas mais externas à célula, e que servem tanto para regular movimento de cátions, para se aderir a célula hospedeira e como antigênico (induz o hospedeiro a produzir anticorpos). A de células G-, porém, difere em alguns aspectos. Sua parede celular contém poucas camadas de peptidoglicano, bem menos espessa. Possuem uma membrana externa, parecida com a membrana plasmática quanto à composição básica de dupla camada fosfolipídica, contém embebidas na membrana os lipopolissacarídeos (LPS), possuem lipoproteínas que a ancoram à peptidoglicana. 6. As bactérias produtoras de beta lactamases possuem certa resistência aos antibióticos que possuem o anel beta lactâmico em sua estrutura. Por quê? É uma enzima capaz de clivar o anel betalactâmico dos antibióticos e anular o seu efeito.
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