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Transcrição da informação genética DNA —-> RNA O isolamento da transcriptase reversa e da replicase conseguiu descobrir que esse fluxo não é unidirecional. - RNA <> 3 tipos: mensageiros, transportador e ribossômico. Composto por 4 tipos de ribonucleicos unidos por ligações fosfodiéster [Ribose + base nitrogenada (adenina, uracila, citosina e guanina). - Transcrição <> é um processo altamente seletivo e varia de acordo com o tipo celular, para algumas regiões do DNA muitos transcritos são feitos enquanto que, para outras, poucos transcritos são feitos, isso tem haver com as características das células e suas respectivas funções. Além disso, os RNA’s podem sofrer várias modificações, como por exemplo: adições terminais, remoção de segmentos internos e junções. Essas modificações convertem o transcrito primário em uma molécula funcional. |-> Então, a transcrição é a síntese de RNA que utiliza uma das fitas de DNA como molde. Etapas do processo: I. Desenrolamento, abertura da dupla-hélice e exposição das bases de cada fita do DNA II. A sequência de nucleotídeos da fita do RNA é determinada pela sequência de nucleotídeos da fita molde de DNA III. Os ribonucleotídeos incorporados são covalentemente ligados à cadeia em formação do RNA em uma reação catalisada por uma enzima chamada de RNA-POLIMERASE A cadeia nova de RNA é produzida SEMPRE na direção 5’ —> 3’ - Conceitos importantes da transcrição ⬌unidade de transcrição: delimitada pela sequência de DNA na qual se inicia a transcrição (promotor) e uma sequência terminadora (terminador), na qual se encerra a transcrição ⬌ caixa TATA, ou caixa Goldberg-Hogness, é uma região do DNA que ajuda a iniciar o processo de transcrição, se localiza na região promotora, é constituída pelas nucleobases TATAAA, a cerca de 25 pares antes do local da transcrição. Portanto a TATA faz parte da região promotora, regula a expressão gênica e fornece um local de ligação para enzimas envolvidas na transcrição de genes. Portanto, é uma sequência específica do DNA necessária para dar início ao processo de transcrição. O TATA box se encontra antes do início da transcrição em si, diferentemente do RNA primer que serve para desencadear a replicação mas diferentemente do TATA box o processo se inicia nele mesmo. **do promotor ao terminador: uma única fita de RNA é sintetizada, correspondendo a esta região do DNA** - Tipos de RNA polimerase <> RNA polimerase I (localizada no nucléolo e responsável pela síntese de RNA ribossômico), RNA polimerase II (localizada no nucleoplasma e responsável pela síntese de RNA mensageiro), RNA polimerase III (localizada no nucleoplasma e responsável pela síntese do RNA transportador), mRNA citoplasmáticos (derivam de precursores nucleares[RNA heterogêneo] de alto peso molecular) *** IMPORTANTE *** - Funções que a RNA polimerase exerce no processo de transcrição 1. reconhece sítios de iniciação (promotores) do DNA 2. contribui, não faz sozinha, desespitaliza um curto trecho da dupla hélice do DNA próxima a ela, liberando um molde de fita única 3. mantém a estabilidade do híbrido DNA-RNA 4. seleciona o ribonucleíco fosfato correto e catalisa a formação de uma ligação fosfodiéster; este processo é repetido muitas vezes à medida que a enzima se move ao longo do DNA 5. detecta sinais de terminação 6. interage com atividades e repressores, fatores de transcrição (enzimas e proteínas que podem modular o processo), que modulam a velocidade da transcrição - Etapas da síntese de RNA 1: Iniciação - envolve a ligação da RNA POLIMERASE a uma região do DNA que determina a transcrição de um gene em particular. Esta região é conhecida como região PROMOTORA |-> a enzima RNA POLIMERASE utiliza a fita 3’ —> 5’ do DNA como molde, produzindo uma fita de RNA na direção 5’ —> 3’. A fita molde do DNA é antiparalela e complementar à fita codificadora do DNA ao RNA. 2: Alongamento - Uma vez que a região promotora tenha sido reconhecida, a RNA POLIMERASE começa a sintetizar o transcrito e a subunidade sigma é liberada 3: Terminação - O alongamento continua até um sinal de terminação ser atingido, em algumas situações, uma proteína adicional pode ser requerida para a liberação de transcrito |-> Término da transcrição é diferente em procariotos e eucariotos: ° Procariotos: a região terminadora apresenta uma longa sequência de A na fita molde ° Eucariotos: as 3 RNAs polimerases terminam a síntese em regiões rica em T. - Splicing * modificação pós-transcricional * Quando o DNA é transcrito tanto os íntrons quanto os éxons são transcritos e o processo de splicing remove os segmentos que não servem para a síntese proteica, íntrons, e juntam os segmentos que servem para esse processo, éxons, e assim será feito um RNA funcional. |-> Além disso, após a união dos éxons ocorre a modificação das duas extremidades, adicionando uma CAP 5’, que protege o RNA contra degradação enzimática [ nucleases e fosfatases] e etc, e uma cauda poli-A, auxilia na estabilização do RNAm e sua saída do núcleo. https://youtu.be/_Zyb8bpGMR0?si=RUsBu4hfjljF3t5V
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